膀胱癌组织LncRNA SPINT1-AS1表达及临床意义

目的检测膀胱癌组织长链非编码核糖核酸(LncRNA)丝氨酸肽酶抑制剂Kunitz 1型反义核糖核酸1(SPINT1-AS1)表达并探讨其临床意义。方法选取安阳市第三人民医院泌尿外科2018年1月至2023年2月收治的328例行腹腔镜下根治术膀胱癌患者作为研究对象,RT-qPCR检测膀胱癌组织和切缘正常组织LncRNA SPINT1-AS1的表达。比较不同临床病理特征患者癌组织LncRNA SPINT1-AS1的表达;随访至2023年5月,分析膀胱癌组织LncRNA SPINT1-AS1的表达与腹腔镜下根治术后复发的关系;Cox回归分析探讨影响膀胱癌患者腹腔镜下根治术后复发的危险因素。结果LncRNA SPINT1-AS1在膀胱癌组织的表达高于切缘正常组织(P<0.05);肌层浸润、TNM分期≥Ⅱb期、最大肿瘤直径≥3 cm、多发病灶、有淋巴结转移患者膀胱癌组织LncRNA SPINT1-AS1的表达分别高于非肌层浸润性、TNM分期<Ⅱb期、最大肿瘤直径<3 cm、单发病灶、无淋巴结转移患者(P<0.05);随访期间患者腹腔镜下根治术后复发率为15.88%(47/296);肌层浸润(HR=1.692,95%CI:1.157~2.475)、TNM分期≥Ⅱb期(HR=1.784,95%CI:1.187~2.682)、多发病灶(HR=1.837,95%CI:1.200~2.810)、膀胱癌组织LncRNA SPINT1-AS1表达(HR=1.557,95%CI:1.195~2.029)均为腹腔镜下根治术后复发的危险因素(P<0.05)。结论膀胱癌组织LncRNA SPINT1-AS1表达高于切缘正常组织,肌层浸润、TNM分期≥Ⅱb期、多发病灶及癌组织LncRNA SPINT1-AS1表达均为膀胱癌腹腔镜下根治术后复发的危险因素。

细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA在急性髓细胞性白血病中的表达及与患者临床特征的关系

目的探讨细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)在急性髓细胞性白血病(AML)中的表达及与患者临床特征的关系。方法选取82例AML患者,作为观察组,依据患者病情分为初治组(n=53)、缓解组(n=19)和复发组(n=10),另选取31例非血液病健康者,作为对照组。采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测各组受试者骨髓ANRIL m RNA的相对表达量,并分析其与AML患者临床特征的关系。结果观察组、初治组、缓解组、复发组患者骨髓ANRIL mRNA的相对表达量均明显高于对照组(P﹤0.01)。复发组患者骨髓ANRIL m RNA相对表达量明显高于缓解组和初治组(P﹤0.01),缓解组患者骨髓ANRIL mRNA的相对表达量明显低于初治组(P﹤0.01)。血小板计数﹤20×10^(9)/L、疾病进展、预后未缓解或缓解后再复发AML患者骨髓ANRIL mRNA相对表达量分别明显高于血小板计数≥20×10^(9)/L、疾病无进展、预后缓解患者(P﹤0.01)。结论ANRIL在AML患者中高表达,其表达水平能反映患者的疾病严重程度,可指导临床诊疗。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA1靶向微小RNA-339-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA1(lncRNA CDKN2B-AS1)对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及分子机制。方法 收集南阳市中心医院2017年1月2019年1月收治的37例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织。将MDA-MB-453细胞分为CDKN2B-AS1阴性对照(si-NC组)、CDKN2B-AS1小分子干扰RNA(si-CDKN2B-AS1组)、CDKN2B-AS1小分子干扰RNA+miR-339-5p阴性对照(si-CDKN2B-AS1+anti-miR-NC组)以及CDKN2B-AS1小分子干扰RNA+miR-339-5p特异性寡核苷酸抑制剂(si-CDKN2B-AS1+anti-miR-339-5p组)。采用RT-qPCR法对CDKN2B-AS1及微小RNA-339-5p(miR-339-5p)表达水平进行检测;细胞周期及增殖活性检测分别采用流式细胞术及MTT实验;采用Transwell小室技术对细胞迁移和侵袭进行检测;采用Western blotting法对增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki67)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达进行检测;荧光素酶报告实验检测CDKN2BAS1对miR-339-5p的靶向调控。结果 在乳腺癌组织中CDKN2B-AS1表达水平上调[(2.23±0.08)比(1.00±0.06)](P<0.05)。抑制CDKN2B-AS1可增加G0期细胞比例[(43.29±3.76)%比(30.25±3.01)%]、P21表达水平升高,S期细胞比例[(21.91±3.10)%比(34.19±3.32)%]、细胞存活率[(53.02±5.38)%比(100.00±7.12)%]、迁移、侵袭数以及Ki67、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。CDKN2B-AS1靶向调控miR-339-5p,抑制miR-339-5p逆转抑制CDKN2B-AS1对MDA-MB-453细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结论 抑制CDKN2B-AS可抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖、迁移、侵袭,且靶向调控miR-339-5p表达。

lncRNA MIF-AS1调节miR-423-5p/PYCR1轴对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)巨噬细胞移动抑制因子反义RNA1(MIF-AS1)调节miR-423-5p/吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养PC3细胞,敲低MIF-AS1或下调miR-423-5p表达,检测PC患者肿瘤组织与癌旁组织和细胞中MIF-AS1、miR-423-5p和PYCR1 mRNA的表达;检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot检测PYCR1蛋白表达;验证miR-423-5p和MIF-AS1、PYCR1的关系。结果MIF-AS1、PYCR1 mRNA在肿瘤组织中呈高表达,miR-423-5p呈低表达。沉默MIF-AS1可抑制PC3细胞增殖、迁移、侵袭及PYCR1表达,上调miR-423-5p表达,诱导细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-423-5p表达可逆转沉默MIF-AS1对PC3细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。MIF-AS1、PYCR1与miR-423-5p存在靶向调控关系。结论沉默MIF-AS1可能通过上调miR-423-5p来抑制PYCR1表达,抑制PC细胞的恶性行为。

急性冠脉综合征患者血清lncRNA CDKN2B-AS1、miR-184水平与介入治疗后冠状动脉再狭窄发生的相关性研究

目的分析急性冠脉综合征(ACS)患者血清长链非编码RNA细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2B基因反义RNA1(lncRNA CDKN2B-AS1)、微小RNA-184(miR-184)水平与经皮冠状动脉介入(PCI)治疗后冠状动脉再狭窄(RS)发生的相关性。方法选取2020年2月至2023年3月在该院行PCI治疗的288例ACS患者,根据术后6个月复查造影结果分为RS发生组96例和RS未发生组192例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA CDKN2B-AS1、miR-184相对表达水平;采用Pearson相关性分析血清lncRNA CDKN2B-AS1与miR-184相关性;影响ACS患者PCI后RS发生的因素采用多因素Logistic回归分析;以受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA CDKN2B-AS1、miR-184对ACS患者PCI后RS发生的评估价值。结果与RS未发生组相比,RS发生组血清lncRNA CDKN2B-AS1水平显著升高,miR-184水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);两组超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素18(IL-18)、总胆红素(TBIL)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)比较,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,ACS患者血清lncRNA CDKN2B-AS1与miR-184水平呈显著负相关(r=-0.427,P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA CDKN2B-AS1、hs-CRP、IL-18、cTnI是影响ACS患者PCI后RS发生的危险因素,miR-184、TBIL是影响ACS患者PCI后RS发生的保护因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清lncRNA CDKN2B-AS1、miR-184及二者联合对ACS患者PCI后RS发生评估的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.844、0.929,二者联合对ACS患者PCI后RS发生评估的AUC显著高于血清lncRNA CDKN2B-AS1、miR-184单独评估(Z_(二者联合-lncRNA CDKN2B-AS1)=4.490、Z_(二者联合-miR-184)=3.429,均P<0.05)。结论ACS患者血清lncRNA CDKN2B-AS1水平显著升高,miR-184水平显著降低,与ACS患者PCI后RS发生具有相关性,均是影响ACS患者PCI后RS发生的因素,且二者联合对ACS患者PCI后RS发生的评估效能更佳。

巴戟天调控LncRNA LIFR-AS1对乳腺癌细胞T-47D增殖、凋亡及迁移的影响

目的 探讨巴戟天对乳腺癌细胞T-47D增殖、凋亡、迁移的影响及其对长链非编码(Lnc)RNA白血病抑制因子受体反义RNA-1(LIFR-AS1)的调控作用。方法 T-47D细胞培养于含不同浓度(100、200、400μg/ml)巴戟天水提取物的培养液内培养24 h,分别为巴戟天低、中、高剂量组。同时将正常培养的细胞作为对照组。将si-NC、si-LIFR-AS1分别转染至T-47D细胞后加入含400μg/ml巴戟天培养液培养24 h,分别为巴戟天高剂量+si-NC组、巴戟天高剂量+si-LIFR-AS1组。采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LIFR-AS1表达水平;采用平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;应用流式细胞仪检测细胞周期与细胞凋亡率;采用划痕实验检测细胞迁移能力。结果 与对照组比较,巴戟天中、高剂量组LIFR-AS1表达水平及凋亡率明显升高,克隆形成数明显减少,G0-G1期细胞比例明显升高,S期细胞比例及划痕愈合率明显降低(P<0.05);与巴戟天高剂量+si-NC组比较,巴戟天高剂量+si-LIFR-AS1组克隆形成数明显增多,G0-G1期细胞比例及凋亡率明显降低,S期细胞比例及划痕愈合率明显升高(P<0.05)。结论 巴戟天可通过上调LIFR-AS1表达诱导细胞周期阻滞从而降低乳腺癌细胞增殖能力,并可诱导细胞凋亡及抑制细胞迁移。

沉默lncRNA ST7-AS1通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭影响的实验研究

目的:探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)致癌性抑制基因7反义RNA1(ST7-AS1)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:肝癌细胞系HCCLM3分成Control组、Vector组、ST7-AS1组、sh-NC组、sh-ST7-AS1组和sh-ST7-AS1+Wnt/β-catenin通路激动剂(SKL2001)组。结果:与Control组比较,ST7-AS1组HCCLM3细胞的吸光度(A570)值及N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vemintin)、Wnt1和β-catenin的表达升高,克隆数量和迁移、侵袭数目增多,上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和GSK-3β的表达降低(P<0.05)。Wnt/β-catenin通路激动剂SKL2001可部分逆转沉默ST7-AS1对HCCLM3细胞增殖、迁移、侵袭的影响(P<0.05)。结论:沉默ST7-AS1可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

血清CHI3L1、ANRIL联合检测对慢性乙型肝炎的诊断价值

目的探究血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)联合检测诊断慢性乙型肝炎(CHB)的临床价值。方法前瞻性选取2022年10月至2024年4月西安市第八医院收治的172例CHB患者作为研究组,另选取同期在本院体检的健康者172例作为对照组。检测并比较两组受检者的血清CHI3L1、ANRIL水平和肝功能[总胆红素(TBIL)、谷草转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和白蛋白(ALB)]以及不同肝纤维化程度CHB患者的血清CHI3L1、ANRIL水平、肝功能和肝纤维化指标[层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)及Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)];采用Pearson相关性分析CHB患者血清CHI3L1、ANRIL及两者与肝功能、肝纤维化指标的相关性;采用多因素Logistic回归分析CHB的影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析血清CHI3L1、ANRIL对CHB的诊断价值。结果研究组患者的血清CHI3L1、ANRIL、TBIL、AST、ALT水平分别为(74.56±5.54)ng/m L、2.52±0.50、(42.03±4.52)mol/L、(56.45±4.65)U/L、(59.66±5.77)U/L,明显高于对照组的(46.37±3.42)ng/m L、1.01±0.24、(16.53±3.02)mol/L、(25.05±3.54)U/L、(30.54±4.38)U/L,ALB为(34.77±8.22)g/L,明显低于对照组的(50.42±12.21)g/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。S0期、S1~S2期及S3~S4期患者的血清CHI3L1、ANRIL、TBIL、AST、ALT、LN、Ⅳ-C、HA和PC-Ⅲ水平依次升高,ALB依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清CHI3L1与ANRIL呈正相关(P<0.05),且两者与TBIL、AST、ALT、LN、Ⅳ-C、HA和PC-Ⅲ均呈正相关(P<0.05),但与ALB均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,CHI3L1、ANRIL、TBIL、AST、ALT、LN、Ⅳ-C、HA和PC-Ⅲ均是影响CHB的危险因素(P<0.05),ALB为保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CHI3L1、ANRIL检测诊断CHB的AUC分别为0.830、0.779,两者联合检测诊断CHB的AUC为0.897,两者联合优于各自单独诊断(P<0.05)。结论CHB患者的血清CHI3L1、ANRIL水平显著升高,两者与肝功能以及肝纤维化指标有关,两者联合检测可提高对CHB的诊断价值。

lncRNA ANRIL和VEGF在原因不明复发性流产绒毛中表达

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)和血管内皮生长因子(VEGF)在原因不明复发性流产(URSA)患者绒毛中的表达。方法:选取2017年8月-2019年6月在本院就诊的URSA患者62例(观察组),同期行人工流产术的正常早孕者62例(对照组)。观察组行清宫手术、对照组行人工流产术时采集新鲜胎盘绒毛组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测绒毛组织中lncRNA ANRIL、VEGF mRNA表达水平;Pearson法分析URSA患者绒毛组织中lncRNA ANRIL和VEGF mRNA表达水平的相关性;采用多因素logistic回归分析影响URSA发生的因素。结果:观察组绒毛组织中lncRNA ANRIL(0.74±0.20)、VEGF mRNA(0.30±0.09)表达水平均低于对照组(1.00±0.25、1.00±0.18)(P<0.05),lncRNA ANRIL与VEGF mRNA表达水平呈显著正相关(r=0.484,P<0.05),lncRNA ANRIL、VEGF mRNA表达水平均为影响URSA发生的保护因素(P<0.05)。结论:URSA患者绒毛组织中lncRNA ANRIL和VEGF表达水平均显著下调且密切相关,可能共同影响疾病发生。

INHBA-AS1通过c-Myc/SCD通路调控宫颈癌HeLa细胞的鸟氨酸代谢和EMT进程

目的:探讨抑制素β亚基A反义RNA1(INHBA-AS1)对宫颈癌HeLa细胞EMT和鸟氨酸代谢途径的影响及其机制。方法:体外常规培养HeLa细胞,实验分为10组:对照组、阴性对照(NC)组、sh-INHBA-AS1组、PluriSIn 1[硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearyl CoA desaturase,SCD)抑制剂]组、NC+PluriSIn 1组、sh-INHBA-AS1+PluriSIn 1组、10058-F4(c-Myc抑制剂)组、NC+10058-F4组、sh-INHBA-AS1+10058-F4组、sh-INHBA-AS1+OE-c-Myc组。平板克隆实验检测各组细胞的增殖能力,FCM检测各组细胞的凋亡情况,Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭、迁移能力,qPCR法检测各组细胞中INHBA-AS1、c-Myc、SCD和EMT相关基因(N-cadherin、TGF-β、ZEB1)mRNA的表达,WB法检测各组细胞中c-Myc、SCD、EMT相关(N-cadherin、TGF-β、ZEB1)、S-腺苷-甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶(SSAT)蛋白的表达,ELISA检测各组细胞上清液中鸟氨酸脱羧酶(ODC)的含量。结果:敲减INHBA-AS1表达使HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低(均P<0.05)而细胞凋亡率显著升高(P<0.05),q PCR、WB法检测结果显示,敲减INHBA-AS1均可显著抑制HeLa细胞中c-Myc、SCD、N-cadherin、TGF-β、ZEB1和SAMDC的表达(均P<0.05),而促进SSAT的表达(P<0.05),并降低HeLa细胞上清液中ODC的含量(P<0.05)。与c-Myc抑制剂和SCD抑制剂单独处理相比,其联合敲减INHBA-AS1后上述作用更加显著(均P<0.05);与sh-INHBA-AS1组相比,进一步过表达c-Myc后HeLa细胞的增殖能力显著升高(P<0.05)、SCD和N-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)、细胞上清液中ODC含量显著升高(P<0.05)。结论:INHBA-AS1可通过c-Myc调控SCD的表达,从而影响HeLa细胞鸟氨酸代谢和EMT进程,进而促进HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

长链非编码RNA细胞周期激酶抑制因子4位点反义非编码RNA在评估急性心肌梗死合并高血压介入术预后的价值

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)细胞周期激酶抑制因子4位点(INK4)反义非编码RNA(LncRNA-ANRIL)在评估急性心肌梗死(AMI)合并高血压介入术中无复流及术后发生心血管事件中的价值。方法选取笔者单位2016年7月-2019年7月收治的AMI合并高血压行经皮冠状动脉介入(PCI)治疗患者196例的临床资料,根据患者术中是否出现冠状动脉复流分为复流组(n=154)和无复流组(n=42),再根据所有患者随访1年过程中是否出现主要不良心血管事件(MACE)分为MACE组(n=31)和非MACE组(n=165)。实时荧光定量法检测并分析比较各组患者入院24 h内术前血lncRNA-ANRIL(外显子1-2)表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA-ANRIL(外显子1-2)表达水平在AMI合并高血压介入术中无复流及术后发生心血管事件评估中的价值。结果复流组lncRNA-ANRIL(外显子1-2)表达水平高于无复流组(2.17±0.43比0.86±0.24,P<0.05);MACE组lncRNA-ANRIL(外显子1-2)表达水平低于非MACE组(0.50±0.18比2.15±0.46,P<0.05);复流组、无复流组术前Killip分级、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、高敏C反应蛋白(hsCRP)、左心室射血分数、血栓负荷程度、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、lncRNA-ANRIL(外显子1-2)、血管再开通时间水平的差异有统计学意义(均P<0.05);多因素logistic回归分析显示,术前Killip分级、肌酸激酶、CK-MB、hsCRP、血栓负荷程度、lncRNA-ANRIL(外显子1-2)和cTnI水平及血管再开通时间是影响AMI合并高血压患者PCI发生无复流的独立影响因素(P<0.05);年龄、术前Killip分级、肌酸激酶、CK-MB、hsCRP、lncRNA-ANRIL(外显子1-2)水平、cTnI水平、罪犯血管长度、梗死后心绞痛情况、术后服药情况是影响AMI合并高血压患者PCI发生MACE的独立影响因素(P<0.05);经ROC曲线分析,当lncRNA-ANRIL(外显子1-2)取值1.77时,评估AMI合并高血压患者PCI发生无复流的ROC曲线下面积(AUC)为0.841;当lncRNA-ANRIL(外显子1-2)取值1.41时,评估AMI合并高血压患者PCI发生MACE的AUC为0.813。结论术前Killip分级、肌酸激酶、CK-MB、hsCRP、lncRNA-ANRIL(外显子1-2)水平是AMI合并高血压患者PCI发生无复流及MACE的独立影响因素,lncRNA-ANRIL(外显子1-2)在评估AMI合并高血压患者PCI发生无复流及MACE中具有较高价值。

mED2——一个小鼠胚胎发育的新基因(英文)

克隆参与胚胎发育的新基因并研究其表达规律和功能是揭示胚胎发育的基因调控机理的重要途径。囊胚形成和原肠形成是哺乳动物胚胎发育过程中的两个关键阶段。囊胚阶段发生了胚胎的第一次分化,是细胞多能性和分化的一个转折点。此时涉及的基因活动,既有维持胚胎干细胞全能性或多能性的基因活动,又有按照预定发育模式参与胚胎定向分化的基因活动。原肠期是胚胎发育过程中的第二个关键转折点,涉及到3个胚层的形成和细胞命运决定等多种变化。在这个时期胚胎获得了胎儿原基的所有信息,新组织的产生和细胞迁移的再生组织与形态发生、细胞增殖、细胞分化、模式形成等存在着非常复杂而相互协调的关联。大多数细胞正由原来的多潜能逐渐向寡潜能发展,控制组织器官形态建成的基因正逐渐开启。这两个时期的基因表达图式、特征和种类会有很大的差异和变化,因此研究这两个时期的新基因的表达规律和功能,将是了解胚胎发育的基因调控机理的重要途径。文章以这两个时期胚胎为原始材料,利用减法杂交方法克隆到一新的小鼠胚胎基因mED2,对其进行了表达规律和生物学功能的初步分析。RT-PCR-Southern和原位杂交实验表明,mED2基因转录水平具有发育阶段的依赖性;随着发育过程的进行,其表达主要在胚神经系统和中胚层衍生的组织表达。mED2基因活性的knockdown对于合子的卵裂和植入前早期胚胎发育均有抑制作用。亚细胞定位实验表明,mED2基因编码的蛋白基本定位于细胞核膜及其临近的内膜细胞器(粗糙内质网和高尔基体)。根据生物信息学分析,mED2蛋白可能为一跨膜蛋白且与含有硫氧还蛋白结构域的蛋白有部分匹配。由此推测mED2基因参与了小鼠植入前早期胚胎发育,其基因产物可能通过蛋白之间的相互作用,即对蛋白进行后期修饰、折叠及行使分子伴侣等作用来活化或抑制其靶蛋白的活性,进而参与小鼠的早期胚胎发育。

ANRIL表达水平与妊娠期糖尿病的相关性分析

目的:分析细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)表达水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性。方法:选择2019年7月-2020年6月于本院产科进行产检并分娩的妊娠期妇女122例,根据孕24~28周口服葡萄糖耐量试验(OGTT)结果是否异常将其分为OGTT异常组(n=61)和OGTT正常组(n=61)。比较两组血清激素[雌二醇(E2)、孕酮(P)]水平以及lncRNA ANRIL表达水平,分析lncRNA ANRIL表达水平与GDM患者激素水平的相关性。结果:两组孕期体重增加、FPG、餐后1 h血糖、餐后2 h血糖比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。OGTT异常组血清E2、P水平均显著高于OGTT正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。OGTT异常组血清lncRNA ANRIL mRNA表达水平显著高于OGTT正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,血清lncRNA ANRIL mRNA表达与GDM患者E2、P水平均呈明显正相关(P<0.05)。logistic回归模型分析结果显示,lncRNA ANRIL是影响GDM发生的危险因素(P<0.001)。结论:GDM患者lncRNA ANRIL表达水平显著升高,并与激素水平呈显著正相关,lncRNA ANRIL表达升高可能是机体抵抗胰岛功能的影响因素。

CDKN2B-AS1基因多态性与子宫内膜异位症的相关性研究

目的:研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2B-反义RNA(CDKN2B-AS1)基因多态性与子宫内膜异位症(EM)的相关性。方法:选择2017年12月至2019年7月邯郸市中心医院和河北医科大学第四医院收治的子宫内膜异位症的患者112例为病例组,另取同期因宫外孕、输卵管黏连等手术患者112例为对照组,采用DNA PCR测序法检测所有受试者血液CDKN2B-AS1基因多态性,分析CDKN2B-AS1基因rs10965235位点多态性与EM临床分期的关系,采用Logistic回归分析CDKN2B-AS1基因多态性对EM易感性的影响。结果:病例组与对照组年龄、BMI、月经周期、CDKN2B-AS1 rs4977574位点等位基因A与G、AA与AG+GG基因型频率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。CDKN2B-AS1基因rs4977574位点与AA基因型比较,AG+GG基因型与EM易感性无关(OR=1.105,95%CI:0.819-1.491;P=0.124)。与对照组比较,病例组CDKN2B-AS1基因rs10965235位点等位基因C、CC基因型频率高,等位基因A、CA+AA基因型频率低(χ2=4.397、4.075,P=0.036、0.044),差异有统计学意义。与Ⅰ~Ⅱ期比较,III^IV期EM患者CDKN2B-AS1基因rs10965235位点CC基因型频率高、CA+AA基因型频率低,差异有统计学意义(χ2=5.168,P=0.023)。CDKN2B-AS1基因rs10965235位点,与CC基因型比较,携带CA+AA基因型可降低EM易感性(OR=0.564,95%CI:0.347-0.917,P=0.000)。结论:CDKN2B-AS1基因rs4977574位点与EM易感性无关,rs10965235位点基因多态性与中国北方女性EM易感性有关。

血清ANRIL和miR-122在隐匿性乙型肝炎病毒感染中的表达关系研究

目的探讨细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)、微小RNA-122(miR-122)在隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染鉴别诊断中的应用价值。方法选取2019年2月至2021年1月宁夏医科大学总医院感染科收治的20例隐匿性乙型肝炎患者为隐匿性乙型肝炎组;选取同期住院治疗的80例慢性乙型肝炎患者作为慢性乙型肝炎组;另同期选取80例健康体检者作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清ANRIL、miR-122水平,PCR结合荧光探针的体外DNA扩增技术检测血清HBV DNA载量,全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;分析隐匿性乙型肝炎患者血清ANRIL、miR-122与TBil、ALT、AST、HBV DNA载量的相关性;分析血清ANRIL、miR-122鉴别诊断隐匿性乙型肝炎的价值;分析影响隐匿性乙型肝炎发生的因素。结果慢性乙型肝炎组ANRIL、TBil[(42.94±7.85)mol/L]、ALT[(236.48±40.76)U/L]、AST[(193.26±45.78)U/L]水平高于隐匿性乙型肝炎组[(25.64±6.35)mol/L、(32.74±7.15)U/L、(29.36±7.24)U/L]和健康对照组[(22.46±4.68)mol/L、(26.95±7.03)U/L、(19.46±6.13)U/L],HBV DNA载量高于隐匿性乙型肝炎组[(6243.58±1006.74)VS(3.95±1.09)],miR-122(0.43±0.12)低于隐匿性乙型肝炎组(0.69±0.21)和健康对照组(1.02±0.23)(P<0.05);隐匿性乙型肝炎组(1.53±0.37)血清ANRIL高于健康对照组(1.01±0.21),miR-122低于健康对照组(P<0.05)。隐匿性乙型肝炎患者血清ANRIL与miR-122呈负相关(r=-0.597,P<0.05),且ANRIL(miR-122)与TBil、ALT、AST、HBV DNA载量均呈正(负)相关(P<0.05)。血清ANRIL、miR-122及二者联合鉴别诊断隐匿性乙型肝炎的曲线下面积(AUC)分别为0.901、0.887、0.941,特异度分别为91.2%、73.8%、96.3%,敏感度分别为85.0%、95.0%、90.0%。ANRIL是影响隐匿性乙型肝炎发生的独立危险因素(P<0.05),miR-122是影响隐匿性乙型肝炎发生的保护因素(P<0.05)。结论隐匿性乙型肝炎患者血清ANRIL表达水平升高,miR-122表达水平降低,二者对鉴别诊断隐匿性乙型肝炎有良好的特异度和敏感度。

沉默CDKN2B-AS1调控miR-98-5p、STAT3对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

[目的]探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA 1(CDKN2B-AS1)是否通过靶向miR-98-5p影响高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤。[方法]将HUVEC分为对照组(含5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养)、模型组(含33.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养)、模型+si-NC组、模型+si-CDKN2B-AS1组、模型+miR-NC组、模型+miR-98-5p模拟物组、模型+si-CDKN2B-AS1+anti-miR-NC组、模型+si-CDKN2B-AS1+anti-miR-98-5p组。运用实时定量聚合酶链反应检测HUVEC的CDKN2B-AS1、miR-98-5p表达;Western blot检测信号转导及转录激活因子3(STAT3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD、LDH、MDA水平。双荧光素酶报告实验分析miR-98-5p与CDKN2B-AS1、STAT3的靶向结合。[结果]高糖使HUVEC中CDKN2B-AS1、STAT3表达、凋亡率、LDH、MDA水平升高,miR-98-5p表达、SOD水平降低(P<0.05)。沉默CDKN2B-AS1或过表达miR-98-5p后,高糖诱导的HUVEC中CDKN2B-AS1、STAT3表达、凋亡率、LDH、MDA水平降低,miR-98-5p表达、SOD水平升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,CDKN2B-AS1靶向miR-98-5p,miR-98-5p靶向STAT3。抑制miR-98-5p逆转了沉默CDKN2B-AS1对高糖诱导的HUVEC凋亡、氧化应激、STAT3蛋白表达的抑制作用。[结论]沉默CDKN2B-AS1通过调节miR-98-5p/STAT3轴抑制高糖诱导的HUVEC氧化应激和凋亡,CDKN2B-AS1可作为糖尿病相关血管并发症的候选治疗靶标。

肝癌组织LncRNA TINCR和ANRIL表达水平及其与患者预后的关系

目的探讨肝癌组织长链非编码RNA(LncRNA)组织分化诱导非蛋白质编码RNA(TINCR)和细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)表达水平及其与患者预后的关系。方法选取2010年7月至2012年11月本院进行手术切除的68例肝癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,采用RT-PCR方法检测肝癌组织和癌旁组组中LncRNA TINCR和ANRIL相对表达量,分析LncRNA TINCR和ANRIL表达与患者临床病理特征及生存率的关系。结果肝癌组织中TINCR和ANRIL相对表达量均显著高于癌旁组织(P<0.05);TINCR表达量与患者肿瘤大小、肿瘤分化程度及TNM分期有关,ANRIL表达量与患者肿瘤大小和TNM分期有关;TINCR高表达患者无瘤生存率及5年总生存率均显著低于TINCR低表达患者(P<0.05);ANRIL高表达患者无瘤生存率及5年总生存率均显著低于ANRIL低表达患者(P<0.05);肿瘤大小、TINCR高表达和ANRIL高表达是影响肝癌患者预后的危险因素。结论肝癌组织中TINCR和ANRIL表达显著上调,可能参与肿瘤进展过程,与患者预后密切相关。