反向代谢工程研究进展

反向代谢工程通过构建具有遗传多样性的突变文库,结合有效的高通量筛选技术,从而获得由多基因控制的复杂表型。目前,它已成为工业生物技术中研究生物代谢途径和改造菌株性能的强有力工具。反向代谢工程研究中的一个瓶颈问题是如何获得多样化的细胞表型突变库,该文介绍了几种经典的和近期发展起来的解决该瓶颈问题的方法,并列举了这些方法的最新应用进展。

高产核黄素菌株中代谢途径酶基因表达与核黄素积累的关联分析

通过诱变得到枯草芽孢杆菌SYL-1,具有较高的核黄素产量。发酵测定其核黄素产量,在42 h达到1.90 g/L(±0.020 g/L)。利用实时荧光定量PCR系统分析其核黄素素代谢通路上基因表达量的变化,其磷酸戊糖途径和嘌呤代谢途径上的基因gmk、gntZ、prs、yqeC、yqjI、zwf以及嘌呤操纵子上的基因purE表达量相较于构建的菌株LY-05有所提高。在LY-05中,过表达基因prs、purF、gntZ、zwf核黄素产量提高。通过解析SYL-1菌株核黄素代谢通路上基因表达量的变化,找出影响枯草芽孢杆菌核黄素产量的关键位点。