一个F8基因大片段缺失的血友病A家系遗传学分析

目的检测1个重型血友病A（hemophilia A，HA）患者家系凝血因子Ⅷ基因（F8）的突变情况，明确F8基因的突变类型，为家系提供遗传咨询。方法联合应用反向转变PCR（inverse-shifting PCR,，IS-PCR）、二代测序技术（next generation sequencing, NGS）、多重连接探针扩增技术（ multiplex ligation dependent probe amplification, MLPA）和短串联重复序列（short tandem repeat,STR）连锁分析等方法对1个重型血友病A家系先证者、携带者及胎儿进行分析。结果IS-PCR结果显示先证者未发生F8基因第1内含子倒位（intron 1 inversion, Inv1）或第22内含子倒位（intron 22 inversion，Inv22）；NGS结果显示先证者船基因未发生点突变以及小的插入缺失，但在NGS覆盖度分析中发现先证者F8基因第2外显子测序深度为0；MLPA结果显示先证者F8-E2缺失，先证者母亲为F8基因第2外显子杂合缺失携带者。另外连锁分析与其它几种方法相比较，出现了结果不一致的情况。结论通过NGS确定1例F8基因第2外显子大片段缺失突变，血友病A家系F8基因连锁分析用于携带者筛查及产前诊断需慎重，多种方法联合分析可准确判断F8基因的突变情况。

重型A型血友病患者的F8倒位检测

目的对两个家系中重型A型血友病（hemophiliaA，HA）患者的凝血因子Ⅷ基因（factorⅧ，F8）进行倒位检测，为家系提供遗传咨询和产前诊断。方法收集家系先证者外周血、胎儿羊水和绒毛细胞，应用反向转变PCR（inverse—shiftingPCR，IS-PCR）检测第1内含子倒位（intron1inversion，Invl）或第22内含子倒位（intron22inversion，Inv22），并明确Inv～22的亚型。结果IS-PCR检测结果显示家系1先证者为Inv22倒位者，先证者母亲为Inv22倒位携带者，其他家系成员未检测到Inv22倒位；Invl检测结果显示均无Invl倒位。家系2先证者为Invl倒位者，先证者姐姐为Invl倒位携带者，另3名家系成员未检测到Invl倒位；Inv22检测结果显示，均无Inv22。结论通过IS—PCR检测出两个家系中Inv22或Invl的患者和携带者，并能明确Inv22的亚型，为家系的遗传咨询和产前诊断提供了依据。