反向间接血凝抑制试验(RPHI)检测EHF抗体

我们用反向间接血凝试验(RPHI)与 IFAT同时检测临床诊断为 EHF 急性期(1周)患者血清183例,疑似 EHF 患者恢复期血清186例(1～6个月),阳性检出率分别为78.14%和78.86%,两法总符合率达99.44%。我们亦检查了非 EHF 发热者19例,类风湿性关节炎8例(类风湿因子1∶10000),脑炎病人2例,两法均获阴性结果。选择确诊为 EHF 患者的血清和 EHF

反向间接血凝抑制试验测定麻疹抗体

目的建立采用反向间接血凝抑制试验测定麻疹抗体的方法，并与传统的血凝抑制方法进行比较。方法采用麻疹单克隆抗体致敏人“O”型红细胞的反向间接血凝抑制法，检测麻疹抗体。结果两种方法检测麻疹疫苗免疫后抗体阳转率均为100％（11／11）；52份免疫后血清RPHI的GMT为26．55，HI的GMT为39．08，经统计学处理两种方法未见显著性差异，并具有很好的平行关系。应用该方法对其他相关病毒抗原和抗体的检测，结果无交叉反应。结论该法有较好的实际应用价值。

反向间接血凝试验(RIHA)在动物疾病诊断中的应用进展

反向间接血凝试验(RIHA)是一种简单实用的实验室检测技术,已广泛应用于人类及动物疾病的田间及临床检测。本文概述了RIHA在动物病毒病、细菌病和寄生虫病诊断方面的应用进展,以期为兽医临床科技工作者更好地应用该法诊断疾病提供参考。

反向间接血凝抑制试验检测不同种属动物血清中肾综合征血热病毒特异性总抗体的探讨

我国己从哺乳纲5目9科20属38种动物中分离出HFRSV或检出抗原。用间接免疫荧光试验(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体，对如此众多种属动物进行流行病学调查和流行病学监测，需制备各种动物的免疫血清并进行荧光标记或酶标记，不仅工作量大，而且很困难。况且某种抗血清标记物仅能检测其相应动物血清中一种型别的特异性免疫球蛋白，不能测定总抗体，难免出现假阴性结果。本试验用反向间接血凝抑制试验(RPHI)对检测不同种属动物血清中HFRSV总抗体进行探讨。

鼠疫反向间接血凝试验与鼠疫细菌培养结果的对比分析

目的对比鼠疫反向间接血凝试验(RIHA)与鼠疫细菌培养的检菌结果,选择灵敏、简便、快速的鼠疫诊断方法。方法用鼠疫菌感染小鼠、大耳白兔、豚鼠,动物死亡后取肝、脾脏;大耳白兔死亡后,在室温(18～22℃)下自然腐败,并于第0、15、60天取脾脏;取人感染鼠疫尸体的肺脏;将上述样品同时进行RIHA和细菌培养,计算鼠疫菌阳性率,比较两种方法的检菌效果。结果动物和人被鼠疫菌感染后,鼠疫RIHA的阳性率(100％)明显高于细菌培养(87％);对腐败材料鼠疫菌的检测,RIHA诊断效果明显优越于细菌培养,尤其在菌培养阴性的情况下,仍能检查出鼠疫菌抗原(抗体滴度为1:102 400)。结论RIHA在鼠疫诊断中,具有敏感、简便和快速的特点,有助于及时确定疫源的存在和疫情的判定,在实际工作中便于应用和推广,希望早日成为鼠疫实验室诊断标准。

用反向间接血凝试验快速检测轮状病毒抗原和抗体

用兔抗牛轮状病毒(NCDV株)IgG致敏绵羊红细胞进行反向间接血凝(RIHA)试验,直接检测105份犊牛腹泻粪样中的轮状病毒,查出阳性39份,阳性检出率为37.1％,与电镜检查,核酸PAGE和ELISA相比较,符合率分别为83.3％,91.7％和98.1％。同时还建立了用反向间接血凝抑制(RIHI)试验检测人和动物血清轮状病毒抗体的方法。两法特异性好,简便快速,易于推广。

应用反向间接血凝试验检测山羊痘病毒抗原

以兔抗山羊痘病毒IgG致敏绵羊红细胞,采用反向间接血凝试验(RPHA)检测山羊痘病毒抗原.该诊断试剂与山羊痘病毒抗原发生特异性的凝集反应;在PBS中不自凝;与其它动物病病毒抗原无交叉反应.对贵州省8个疫区现场采集山羊痘待检抗原检测结果表明,该方法阳性检出率为87.5%(7/8),与琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为50%(4/8)相比较,RPHA敏感性比AGP高;同时对山羊痘野生强毒H-GZ株F1～F5代细胞培养物进行检测,F1代就可检出RPHA效价,而AGP则不能检测.该诊断试剂可用于兽医临床上山羊痘的快速诊断及作为病毒分离培养的检测指标.

单克隆抗体反向间接血凝试验检测日本血吸虫循环抗原

反向间接血凝试验(RIHA)是一种简单、实用的实验诊断技术,其显著特点是操作简便、快速,无需特殊仪器和试剂,现场应用的适应性高,其检测效果与标记方法相比无显著差异.目前,以单克隆抗体检测日本血吸虫循环抗原的反向间接血凝试验国内文献报道不多,为此,我们拟用该法对日本血吸虫循环抗原进行了检测.

定量产肠毒素性大肠杆菌黏附素抗原反向间接血凝试验的建立

利用黏附素单因子血清IgG致敏绵羊红细胞,建立了定量产肠毒素性大肠杆菌黏附素抗原的反向间接血凝试验。该试验所用K88、K99、987P和F41单因子血清IgG致敏红细胞的最佳浓度依次为30μg/ml、56μg/ml、28μg/ml和100μg/ml。经交叉试验、抑制试验和敏感性试验证实,该试验具有很高的特异性和敏感性,可用于生物制品中黏附素含量的定量。

应用反向间接血凝试验检测魏氏梭菌α-毒素

采用兔抗魏氏梭菌 α-毒素 Ig G致敏马红细胞建立了反向间接血凝试验 ,该诊断试剂与魏氏梭菌标准株的培养上清液发生特异的凝集反应 ;在 PB缓冲液中不自凝 ;与其他致病菌培养上清无交叉反应。对现场分离样品的检测结果表明 :该方法与其生化试验结果的符合率为 97.2 %,可用于兽医临床上魏氏梭菌病的快速诊断。

用反向被动血凝抑制试验进行乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体的位阻分析

本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24种McAb可分为10个不同的抑制群。并对这种简单易行的位阻分析方法在实用中的价值做了讨论。

间接血凝抑制试验检测血清和卵黄中鸡毒支原体抗体的研究

将13只正处于产蛋期的试验鸡在接种疫苗前后分别采血、分离血清;收集鸡蛋,分离蛋黄,并分别用16%NaCl、8%柠檬酸纳和氯仿处理后,检测鸡毒支原体(MG)间接血凝抑制(HI)抗体。结果表明:接种疫苗前的血清和16%NaCl、8%柠檬酸钠和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为4.7,4.4,4.1和4.2log2;第一次接种疫苗后的血清和16%NaCl、8%柠檬酸纳和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7.4、6.7、7.1、6.9log2;第二次接种疫苗后第1次采集的血清和16%NaCl、8%柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为10.4、9.6、10.1、9.7log2,第2次采集的血清和16%NaCl、8%柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7.9、7.1、7.6和7.4log2。8%柠檬酸钠处理后的卵黄抗体效价最高,与血清抗体效价最接近。血清HI抗体效价与卵黄HI抗体效价具有良好的一致性和相关性,用卵黄可以代替血清进行HI试验。

定量产肠毒素性大肠埃希氏菌F_(41)黏附素反向间接血凝试验的建立

利用 F41 单因子血清 IgG 致敏绵羊红细胞,建立了定量产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)F41黏附素的反向间接血凝试验。经致敏的绵羊红细胞能被F41单因子血清特异性地抑制,且不与 ETEC K88、ETEC K99、ETEC 987P、致仔猪水肿病大肠埃希氏菌 O138、鼠伤寒沙门菌和猪链球菌2型菌液出现交叉反应,其敏感性比甘露糖抵抗血凝反应(MRHA)至少高 25 倍。结果表明,该反向间接血凝试验具有很高的特异性和敏感性,可用于生物制品中黏附素含量的定量。

计分法评价反向间接血凝抑制试验检测实验小鼠种群中流行性出血热病毒抗体的结果

一、引言流行性出血热(EHF)系自然疫源性疾病,鼠舍稍有不慎就可随野生鼠或其他病原媒介动物侵入。监测检查EHF的方法很多,最常用的当推李镐汪氏的间接免疫荧光法。该法取可疑鼠肺作冰冻切片,加上荧光素标记的抗EHF病毒的抗体,以检查标本中的抗原。或用已知EHF病毒感染鼠肺。

反向间接血凝试验在畜禽病毒疾病诊断中的应用进展

反向间接血凝试验(Reverse indirect hemagglutination test,RIHA)是一种简单实用的实验室检测技术,已广泛应用于人类及动物疾病的诊断及临床检测。本文概述了RIHA在动物病毒病诊断方面的应用进展,以期为兽医临床科技工作者更好地应用该法诊断疾病提供参考。

流行性出血热反向被动血凝抑制试验诊断试剂盒应用技术

(一)概况流行性出血热(EHF)是由汉坦病毒引起的病毒性疾病,主要临床表现为发热、出血和肾功能损害。本病呈全球性流行,我国除青海和新疆外各省市都有流行。它严重地危害着广大人民群众的身体健康。目前,EHF的诊断主要依靠实验室的血清学诊断和临床诊断。血清学诊断方法有间接免疫荧光试验(IFA)、免疫酶联试验(ELISA),反向被动血凝抑制试验(RPHIA)及聚合酶链法(PCR)等。

免疫荧光试验与反向被动血凝抑制试验测定乙型脑炎抗体对比分析

目的:比较两种乙型脑炎实验室诊断方法。方法:用间接免疫荧光法和反向被动血凝抑制试验检测疑似乙型脑炎患者的血清标本,用SPSS统计软件分析两者的特异性和敏感性。结果:50份临床疑似乙型脑炎患者的血清两种方法检测结果,IgG抗体检出率均为86%,无统计学意义。IgG抗体几何平均滴度RPHI法略高于IFA,但无统计学意义。IgM抗体阳性率IFA为78%;RPHI为76%。RPHI法的几何平均滴度为31.6,IFA的几何平均滴度为30.3,几何平均滴度无统计学意义。两种方法的相关性检测,相关系数分别为0.835和0.696。结论:IFA和RPHI法用于检测乙型脑炎抗体阳性检出率和几何平均滴度差异均无统计学意义。由于RPHI法无需特殊仪器设备,操作简便易行。IFA法除需要一台较好的荧光显微镜外,其操作简便,适于病人的早期诊断。

用单克隆抗体反向间接血凝检测兔出血症病毒

将抗兔出血症病毒(RHDV)的 AA8-1和 CG4-1两株单抗(McAb)分别致敏双醛化人红细胞,混合后建立单抗反向间接血凝(McAb-RPHA)方法。其敏感性较常规血凝试验(HA)高256倍,最小检出量为0.214 ng/ml。此法对感染兔的心、肝、脾、肺、骨髓、血液等检出率均为100%;脊髓、淋巴结、肌肉等组织的检出率分别为62.5%,58.3%和37.5%。HA 的检出率除肝为100%外,其余均低于 McAb—RPHA,不能检出脊髓、淋巴结和肌肉样品中的病毒抗原。