肽核酸与基因治疗

肽核酸 (PNA)是一类以酰胺键连接骨架替代核酸中核糖磷酸二酯键骨架构成的核酸类似物 ,其中N -乙基甘氨酸骨架PNA与核酸链能稳定互补结合。文章对肽核酸的结构和功能特性作了简单的论述 ,并就其具体在基因治疗方面作为反义药物、反基因药物、特定基因的传递体以及在内源基因表达的诱导等方面应用进行了综述 。

肽核酸的特性及作用

肽核酸 (peptidenucleicacid ,PNA)是一类DNA结构类似物 ,能与DNA和RNA特异性杂交。它通过与DNA结合而抑制基因转录 ,通过与mRNA结合而阻止蛋白质的合成 ;同时 ,PNA不易被核酸酶和蛋白酶降解。

手性膦肽核酸单体的合成

肽核酸是一种潜在的反义和反基因药物.膦肽结构的引入克服了肽核酸低水溶性和低细胞膜通透性等缺点,有利于肽核酸的应用.本研究报道手性膦肽核酸单体的合成.还原氨化方法被用于实现N-Boc,N-Fmoc保护的丙氨醛与甘氨膦酸二酯的偶联,BBC-Cl,FEP等缩合剂被用于实现碱基侧链和母链的高效缩合.

HBV前S1编码链锁核酸的设计及体外抗HBV效果观察

目的针对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前S1 dsDNA同聚嘌呤区设计反基因寡核苷酸药物-锁核酸(locked nucleic acid,LNA),并在体外观察抑制HBV复制的效果。方法针对HBV前S1 dsDNA的3023~3037 nt、3094~3109 nt两个同聚嘌呤区,利用RNA structure软件分别设计并合成LNA,以阳离子脂质体为载体,将药物转染入HepG2.2.15细胞内,采用荧光定量PCR技术和化学发光免疫技术分别检测3 d、6 d和9 d细胞培养上清液中HBV DNA和HBsAg的含量;CCK8法检测锁核酸对HepG2.2.15细胞代谢的影响。结果LNA对HepG2.2.15细胞的HBV DNA转录和HBsAg表达有显著的抑制作用,并且抑制效果随着时间进一步加强,在第9天的抑制率分别为45.37%和52.09%。两个同聚嘌呤组与空白对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),而封闭3023~3037nt同聚嘌呤区的LNA抑制作用较强,且最适序列长度为15~25 bp。CCK8实验显示LNA对HepG2.2.15细胞无任何明显的代谢影响。结论针对前S1 dsDNA同聚嘌呤区的反基因锁核酸分子在体外能够有效地抑制HBV的复制,以封闭3023~3037 nt靶位效果较强,且合适序列长度为15~25 bp。