子宫内膜容受性检测联用胚胎植入前遗传学检测在反复种植失败患者中的效果研究

目的评估联用子宫内膜容受性检测(ERT)与胚胎植入前遗传学检测(PGT)技术在反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植(FET)周期中的应用效果。方法选取2018年1月至2023年1月在徐州市妇幼保健院生殖医学中心接受FET的RIF患者,根据患者接受的评估检测不同分为4组:接受ERT评估(基于转录组测序的ERT技术模型)后移植经PGT检测筛选的整倍体囊胚RIF患者(联用组,n=138)、均未接受ERT评估和PGT检测移植RIF患者(RIF组,n=324)、仅接受ERT评估后移植RIF患者(ERT组,n=147)和仅接受PGT检测筛选整倍体囊胚移植RIF患者(PGT组,n=121),比较4组患者的基本情况及FET结局,并对RIF患者活产率的影响因素进行Logistic回归分析。结果95.79%(273/285)接受ERT评估的RIF患者的内膜容受期会推迟1~2 d,根据ERT评估结果相应调整了移植时间。各组患者的FET结果显示,联用组的胚胎种植率、宫内妊娠率、活产率均显著高于PGT组、ERT组与RIF组(P<0.05)。Logistic回归分析结果表明:实施PGT、接受ERT、接受优质囊胚移植、女方年龄4个变量是获得活产的独立影响因素(P<0.05)。结论联用ERT与PGT是治疗RIF的一次成功尝试,可在单独应用ERT、PGT的基础上进一步改善RIF患者的FET结局。

主动免疫治疗对反复胚胎植入失败患者CD4^+CD25^+调节性T细胞表达的影响

目的探讨淋巴细胞主动免疫治疗对反复胚胎植入失败(RIF)患者外周血CD4^+CD25^+调节性T淋巴细胞(CD4^+CD25^+Treg)表达的影响。方法选择在郑州大学第三附属医院生殖中心就诊的30例RIF患者(RIF组),采用荧光标记流式细胞分析技术,检测其淋巴主动免疫治疗前、后2周的外周血CD4^+CD25^+ Treg表达,并选择同期正常未妊娠妇女20例作对照(对照组)。结果 (1)RIF组治疗前CD4^+CD25^+ Treg占CD4^+T细胞的比例显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)RIF组治疗后CD4^+CD25^+ Treg的表达率明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RIF的发生可能与CD4^+CD25^+ Treg的表达下降有关;淋巴细胞主动免疫治疗可上调CD4^+CD25^+ Treg的表达,调控母胎免疫耐受,有利于胚胎植入成功。

反复植入失败原因及处理对策

体外受精-胚胎移植(IVF ET)的成功率受到胚胎质量、宫腔内环境、免疫等多种因素的影响,任何环节出现异常都有可能导致整个治疗周期的失败。反复植入失败(RIF)不但加重了患者的经济负担,而且对其身心亦造成了双重打击。为此,积极探寻RIF原因,采取有效的治疗措施降低IVF失败率,从而改善IVF结局成为辅助生殖技术中亟待解决的问题。

反复植入失败的实验室策略

反复植入失败（recurrent implantation failure,RIF）是指在体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transplantation,IVF-ET）中移植8细胞胚胎8枚以上,或移植囊胚5枚以上未获得临床妊娠^（[1]）。其原因多而复杂,其中实验室因素（培养胚胎质量、移植胚胎挑选、实验室质量控制等）为导致RIF的重要原因之一^（[2]）,不可忽视。本文就RIF实验室策略的相关研究进行综述,以期改进RIF患者的结局。

反复种植失败的治疗进展

随着临床和实验室技术的不断完善,体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer,IVF-ET)的成功率也在不断提高,临床妊娠率可达50%~60%,但是仍有患者会经历反复多次的胚胎移植后未能成功着床,从而被诊断为反复种植失败(repeated implantation failure,RIF),文献报道其发生率在10%左右[1,2]。RIF的病因复杂,治疗方法繁多,一些治疗方案尚不确定效果,如何降低RIF发生率,是困扰临床的一大难题。

环孢素治疗不明原因反复着床失败患者的临床疗效

目的探究环孢素A(CsA)治疗不明原因反复着床失败(RIF)患者的临床疗效。方法选择2021年6月至2022年10月温州医科大学新昌医院接受治疗的不明原因RIF患者作为研究对象,依据治疗方法将其分为对照组(110例,常规治疗)、观察组(110例,常规治疗+CsA)。对比2组患者临床妊娠率、胚胎着床率、流产率、免疫指标、妊娠并发症发生率和不良反应。结果观察组临床妊娠率(48.2%)及胚胎着床率(51.8%)对照组(25.5%、30.9%),观察组流产率(5.4%)低于对照组(17.3%)(P<0.05);治疗前2组各项免疫指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2组患者干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)低于对照组,白细胞介素-10(IL-10)高于对照组(P<0.05);观察组妊娠并发症总发生率(5.4%)、不良反应总发生率(5.4%)低于对照组(20.0%、18.2%)(P<0.05)。结论CsA治疗不明原因RIF患者可提高患者活产率、临床妊娠率、胚胎着床率,降低患者流产率、妊娠并发症、不良反应,增强患者免疫功能,值得临床采用。

富血小板血浆治疗对胚胎反复植入失败患者外周血Th1、Th2型细胞因子水平及妊娠结局的影响

目的初步探讨富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)治疗对于胚胎反复植入失败(recurrent implantation failure,RIF)患者外周血辅助性T细胞1(helperTcell1,Th1)、Th2型相关细胞因子水平变化及妊娠结局的影响。方法选取2021年1月至2022年8月于重庆医科大学第一附属医院生殖医学中心做3次以上胚胎移植仍未获得妊娠,准备再次做冻融胚胎移植的101例患者。根据其在接受标准激素替代治疗时是否还接受宫腔灌注PRP治疗分为PRP组(62例)和对照组(39例)。使用高通量流式细胞仪检测外周血Th1型细胞因子白介素-2(interleukin 2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)及Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10水平,并比较两组患者的妊娠结局。结果与对照组相比,PRP组外周血IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α总体水平显著升高,差异有显著性(P<0.05)。PRP组中30例患者经宫腔灌注PRP治疗5周后经阴道超声确定获得临床妊娠,这30例患者在PRP治疗后TNF-α/IL-10、IFN-γ/IL-10比值低于治疗前,差异有显著性(P<0.05)。PRP组生化妊娠率、临床妊娠率以及子宫内膜厚度均高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论PRP可能通过改变外周血Th1/Th2型细胞因子的平衡(主要是上调Th2型细胞因子水平)而影响RIF患者的妊娠结局。

高龄、复发性流产和反复种植失败患者胚胎植入前遗传学筛查结果分析

目的探讨胚胎植入前遗传学非整倍体检测(PGT-A)技术是否能改善女方高龄、复发性流产及反复种植失败患者的临床结局。方法通过二代测序(NGS)平台检测不同指征下患者胚胎染色体非整倍体情况,选择基因组拷贝数正常胚胎进行解冻移植,比较各组人群妊娠率和活产率的差异。结果共纳入PGT-A移植周期311个,其中高龄组18个周期,复发性流产组108个周期,反复种植失败组24个周期及对照组161个周期[均为地中海贫血PGT-M周期患者,平均年龄(32.1±4.3)岁]。另外还纳入同一时间段内1508个周期未做PGT-A的女方高龄患者进行比较分析。高龄组、复发性流产组、反复种植失败组及对照组临床妊娠率分别为50.0%、55.6%、58.3%、66.5%,差异无统计学意义(P>0.05),各组间活产率比较差异无统计学意义(P>0.05)。PGT-A高龄组中临床妊娠率为50.0%,高于女方高龄且未做PGT-A人群的28.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PGT-A可避免染色体非整倍体的胚胎植入,改善高龄、复发性流产和反复种植失败患者的临床结局,特别是对高龄女性可以有效提高临床妊娠率。

反复植入失败与子宫内膜容受性标志物研究进展

反复植入失败(RIF)是目前生殖医学领域的主要难题之一。良好的子宫内膜容受性减少了RIF发生的可能性。研究发现RIF和子宫内膜容受性与免疫、非编码RNA、粘附因子等因素相关。通过维持免疫平衡,探索RIF患者相关基因多态性,发现粘附因子和非编码RNA等生物标志物,进而提供了RIF的潜在治疗方法。

MiR-155及其靶基因MMP16在反复植入失败患者子宫内膜中的表达

目的观察miR-155及其靶基因在反复植入失败患者子宫内膜中的表达。方法选取2018年5月至2019年12月在秦皇岛市妇幼保健院生殖医学科进行体外受精与胚胎移植(IVF-ET)或者卵细胞质内单精子注射(ICSI)治疗的不孕患者,其中由于男方因素或者输卵管因素于我院首次进行辅助助孕后妊娠并分娩的患者15例作为对照组;至少进行3次移植(新鲜或者解冻的胚胎,每次至少有一枚优质胚胎,移植优质胚胎数≥4)均未妊娠的患者15例作为反复植入失败(RIF)组;采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-155及基质金属蛋白酶16基因(MMP16)mRNA在子宫内膜的表达;利用生物信息学技术预测miR-155的下游靶基因;利用双荧光素酶实验验证miR-155的靶基因;采用蛋白印迹法检测RIF患者内膜MMP16的表达;利用相关性分析判断miR-155和MMP16的相关性。结果 RIF组miR-155水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);通过生物信息学、双荧光素酶报告基因检测技术以及转染实验发现,miR-155通过结合于MMP16 3′UTR而抑制MMP16 mRNA和蛋白质的表达。qRT-PCR实验结果表明,RIF组MMP16 mRNA和蛋白质的表达水平下调,并且MMP16 mRNA表达水平与miR-155的表达水平呈负相关(r=-0.967,P<0.05)。结论 MiR-155在RIF患者子宫内膜中的表达上调,可能通过调控MMP16基因来影响子宫内膜的容受性。

抑制素α和β聚糖在反复植入失败患者子宫内膜中的表达研究

目的探讨抑制素α和β聚糖在反复植入失败(RIF)患者子宫内膜中的表达情况。方法选取2018年5月至2019年12月在秦皇岛市妇幼保健院进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵质内单精子注射(ICSI)助孕治疗的30例不孕患者作为研究对象。其中由于男方因素或者输卵管因素首次进行助孕治疗后妊娠并分娩的15例患者纳入对照组,因同样因素助孕至少进行3次移植均未妊娠的15例患者纳入RIF组。采用化学发光法检测性激素水平,观察控制性促排卵指标,采用Westernblotting检测子宫内膜中抑制素α和β聚糖蛋白的表达情况。结果RIF组抑制素α和β聚糖蛋白相对表达量显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。抑制素α预测RIF的敏感度为80.00%,特异度为93.30%,曲线下的面积(AUC)为0.904;β聚糖预测RIF的敏感度为46.70%,特异度为86.70%,AUC为0.713。结论抑制素α和β聚糖在RIF患者的子宫内膜中高表达,抑制素α对RIF有很好的预测作用。

反复胚胎种植失败行PGT-A妇女的临床特点分析

目的分析反复胚胎种植失败妇女行植入前遗传学筛查(PGT-A)技术的临床特点。方法选取498例体外受精-胚胎移植治疗的不孕症妇女,其中反复种植失败(RIF)行PGT-A妇女79例(RIF组),对照组419例。根据是否获得整倍体胚胎将79例RIF患者分为获得整倍体胚胎组51例(RIF-S)和未获得组28例(RIF-F)。观察其临床特点。结果RIF组年龄大于对照组,基础卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))水平均高于对照组,基础窦卵泡计数(AFC)少于对照组,外源性促性腺激素(Gn)用量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日E2水平、获卵数、MII卵数、2PN数均低于对照组(P<0.05)。RIF-S组年龄小于RIF-F组,活检胚胎数、D3优胚数、囊胚数、优囊数均多于RIF-F组(P<0.05)。结论高龄及卵巢储备功能差的女性容易发生RIF。

2种内膜准备方案对反复种植失败患者子宫内膜孕激素受体和整合素αⅤβ3表达的影响

目的:比较自然周期(NC)和激素替代(HRT)子宫内膜准备方案对反复种植失败(RIF)患者种植窗口期子宫内膜孕激素受体(PR)、整合素αⅤβ3表达的影响,探讨这2种方案对种植窗口期子宫内膜容受性的影响。方法:收集25例NC方案和18例HRT方案RIF患者的黄体中期子宫内膜,采用免疫组化法检测2组患者种植窗口期子宫内膜PR和整合素αⅤβ3的表达。结果:2组患者子宫内膜腺上皮细胞PR、整合素αⅤβ3和间质细胞中PR表达的H-score评分比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:NC和HRT内膜准备方案对RIF患者种植窗口期子宫内膜容受性影响一致,此两种内膜准备方案均可应用于RIF患者。

反复着床失败与配子、胚胎因素的研究进展

尽管近年来IVF领域已经取得了巨大的成就,然而许多患者仍然被反复着床失败所困扰。因此,反复着床失败的病因及治疗倍受关注。国内外的研究表明染色体异常、精子DNA损伤、透明带硬化及不恰当的培养条件是导致胚胎反复着床失败的重要因素。研究认为植入前遗传学筛查并不增加植入率或出生率。比较基因组杂交芯片和单核苷酸多态性芯片能够进行全染色体筛查。辅助孵化有助于解决某些情况下透明带硬化的问题。共培养和囊胚移植可以提高植入率和妊娠率。胞质移植可以解决卵质成分异常的问题。

淋巴细胞免疫治疗在反复种植失败和复发性自然流产中的作用

现代免疫学观点认为,正常妊娠时母一胎界面表现为一种特殊类型的外周免疫耐受机制,这种耐受状态形成复杂,各种免疫因素通过有机协调形成网络,达到母胎间免疫平衡,使妊娠得以维持。成功的妊娠本身就是一个免疫矛盾所在。一方面胎儿抗原不能作为"半同种移植物"被母体识别,另一方面为了在母体中生存,胎儿抗原又必须呈递给母体,被母体接受。因此。

夏天运用补肾调冲法治疗反复胚胎移植失败临床经验

介绍夏天主任治疗反复胚胎移植失败（RIF）的临床经验，首先分析RIF发生原因，其次中医辨证论治（包括滋补肝肾、调理冲任、活血祛瘀、健脾化湿）结合西医病因治疗2-3个月，进入IVF-ET周期后辨证论治和分期论治相结合以助孕。

慢性子宫内膜炎与反复种植失败的关系

慢性子宫内膜炎是子宫内膜局部持续炎症性疾病,因症状轻微且诊断困难,在临床中一直被忽视。但研究表明,慢性子宫内膜炎与不孕,尤其是体外受精—胚胎移植的反复植入失败有关。全球夫妇约有15%患有不孕不育,体外受精—胚胎移植术已经成为最广泛使用的治疗方式,但术后15%～20%出现反复植入失败。反复植入失败与卵母细胞或胚胎异常、植入胚胎的数量以及子宫内膜的容受性有关。现辅助生殖技术已能提供高质量胚胎,子宫内膜容受性成为改善体外受精妊娠结局的主要研究对象。慢性子宫内膜炎使子宫内膜容受性受损导致反复植入失败。

体外受精-胚胎移植反复失败患者外周血中CD4^+CD25^+Treg的表达

目的:探讨外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Treg)在体外受精-胚胎移植反复失败(RIF)发病机制中的作用。方法:用流式细胞分析技术检测12例RIF组、15例胚胎移植妊娠组、15例正常未孕组患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达。结果:RIF组患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达率为(0.80±0.56)%,低于正常未孕组的(4.05±0.91)%,两组差异有统计学意义(P<0.05);胚胎移植妊娠组患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达率为(11.01±2.09)%,高于RIF组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:辅助生殖中反复植入失败可能与CD4+CD25+Treg的表达下降有关,这为免疫治疗提供了理论依据。

谈勇运用滋阴补阳方序贯治疗反复移植失败经验撷菁

人类辅助生殖技术作为治疗不孕症的主要技术之一,胚胎反复移植失败是影响其妊娠率的关键问题。中医药治疗不孕症历史悠久,中医药结合辅助生殖技术尚处于起步阶段,而在胚胎反复移植失败方面的研究更是少之又少。谈勇教授秉承夏桂成教授补肾调周理论,创滋阴补阳方序贯治法,并将其运用到体外受精-胚胎移植的辅助治疗中,提高了胚胎种植率和临床妊娠率。

定点活检提高反复种植失败患者的临床妊娠率

胚胎反复种植失败(RIF)是阻碍辅助生殖技术进一步提高临床妊娠率的困难之一。子宫内膜容受性低下是造成反复种植失败的主要原因之一。宫腔镜下定点活检引起的子宫内膜损伤可通过炎症反应改善子宫内膜容受性,从而提高RIF患者的胚胎种植率和临床妊娠率。