ABO免疫磁珠反定型试剂自动化检测方法的建立

目的建立ABO免疫磁珠反定型试剂自动化检测方法。方法使用自动化血型定型检测系统，摸索ABO免疫磁珠反定型试剂使用浓度、与待检血浆或血清的最适比例，确定操作程序，通过调整自动判读仪的参比值进行血型的自动判读。结果反定型试剂的最佳使用浓度为2％，与待检血浆或血清的最佳比例为1：2；操作程序为磁场作用时间30s、磁场作用次数为2次、震荡模式为弱震后强震。将自动判读仪参比值选定在0．3～0．4，对640人份样本进行检测，准确率为98．43％。结论ABO免疫磁珠反定型试剂可以用于血型自动化检测。

ABO反定型试剂红细胞配制方法的探讨

目的摸索ABO反定型试剂红细胞的配制方法。方法配制20%的洗涤红细胞悬液后放置4±2℃冰箱保存,每周混匀后取样进行红细胞抗原性及特异性测定和反定型试验(微板法)检测凝集能力实验,观察细胞凝集状态,并记录结果。结果自配反定型试剂保存期为35d。在配制后第35天,自配红细胞与相应的抗血清的特异性凝集反应仍有>2+S的凝集强度,具有良好抗原稳定性;与不对应的抗血清均无凝集反应,具有良好的特异性;用自配红细胞做反定型试验,特异性凝集能被酶标仪测出,符合实验要求。结论运用自配反定型试剂,操作简便,原料易得,成本低廉,制成的红细胞具有良好的免疫特异性、抗原稳定性和凝集效能,符合实验要求。

ABO反定型试剂红细胞在Xantus全自动血型仪检测中的应用探讨

目的 探讨反定型RBC血型试剂用于Xantus全自动数字血型分析仪进行血型检测的效果.方法 应用自配红细胞及试剂红细胞,两种试剂分别行手工操作及Xantus双机械臂全自动数字血型仪自动检测.结果 试剂红细胞无论手工还是自动化血型仪检测,一次性判读结果准确率高,无手工改动结果现象,明显优于自配红细胞.结论 反定型成品试剂盒可用于Xantus全自动数字血型分析仪,有较大的使用价值.

ABO反定型试剂特异性检测用国家参考品的制备

目的研制检测ABO反定型试剂特异性项目的血清国家参考品。方法收集健康献血员A_1、B、A_1B、O型4种型别血清,经确证实验及8家实验室联合标定,对其进行特异性、效价、不规则抗体、冷凝集抗体及稳定性考核。结果4种血清无冷凝集抗体及不规则抗体,其中A_1、B、O型血清效价均≥1∶8。根据实验结果特异性质量标准制定为A_1型血清与A_1、A_2、O型反定型红细胞反应为阴性,与B、A_2B型反定型红细胞反应为阳性;B型血清与B、O型反定型红细胞反应为阴性,与A_1、A_2、A_2B型反定型红细胞反应为阳性;A_1B型血清与A_1、A_2、A_2B、B、O型反定型红细胞反应均为阴性;O型血清与O型反定型红细胞反应为阴性,与A_1、A_2、A_2B、B型反定型红细胞反应均为阳性。本参考品开瓶12 d及25℃放置3 d、4℃5个月、-20℃半年,保存稳定性均良好,但不能反复冻融。结论已成功制备可用于多种血清免疫方法学的ABO反定型试剂特异性检测用国家参考品。

ABO反定型免疫胶体金试剂的研制

目的 研制ABO反定型免疫胶体金试剂,以解决反定型细胞需低温保存、保存期短的问题.方法 提取O、A和B型红细胞膜抗原并应用胶体金标记,研发ABO反定型免疫胶体金试剂.研究该试剂的最佳反应条件.用ABO反定型免疫胶体金试剂检测已知血型的临床全血标本200例,并与传统人ABO血型标准反定型细胞比较,评估其反应的特异性、灵敏度和准确性.结果 结果显示10μl金标记红细胞膜抗原和45μl左右的检测血清/血浆有最佳的凝结强度,最佳震荡反应转速为80 ～90 r/min,反应最佳时间为8～12 min.与传统人ABO血型标准反定型细胞相比,ABO反定型免疫胶体金试剂的准确性、特异性均为100％,灵敏度不低于反定型红细胞.结论 ABO反定型免疫胶体金试剂可以用于常规血型鉴定.

ABO血型反定型试剂质控方法和质量标准的建立

目的建立ABO血型反定型试剂的质控方法和质量标准。方法用抗P、抗M、抗N、抗C、抗c、抗E、抗e试剂检测O型血浆样本,选择分别与抗P、抗M、抗C、抗e试剂反应呈■强阳性样本,和与抗P、抗N、抗c、抗E试剂反应呈■强阳性样本各2份,配制ABO血型反定型用O型细胞。分别对两个厂家提供的和自制的ABO血型反定型用O型细胞进行抗原性检测,同时进行外观、特异性、ABH抗原性、亲和力、溶血率、稳定性检测,并检测35份含IgM类不规则抗体的阳性血浆样本,对比检出率。结果自制的ABO血型反定型用O型细胞与抗P、抗M、抗N、抗C、抗c、抗E、抗e试剂反应均呈■以上,而其他两个厂家提供的ABO血型反定型试剂均有部分抗体漏检;外观、特异性、ABH抗原性、亲和力、溶血率、稳定性检测均无明显差异,符合相关要求;自制的ABO血型反定型用O型细胞可检出所有IgM类不规则抗体,无漏检,而其他两个厂家提供的ABO血型反定型试剂均有部分血浆样本漏检。结论本研究建立的质控方法和质量标准适用于IgM类不规则抗体的检出。

疑难血型鉴定分析

输血是不同于药物治疗的一种特殊治疗措施,目前已经成为临床抢救、治疗危重患者的一种不可代替的手段。随着科学技术的发展,临床输血已越来越安全,但由于血液的复杂性和多样性,临床输血反应仍不时发生,尤其是对于疑难血型。现对本院输血科2011年1月～2013年1月遇到的4例疑难血型的检测和分析报告如下。资料与方法1一般资料：2011年～2013年在本院门诊和住院患者血型检测的30000例中选取的疑难血型4例。2仪器、试剂：孵育器、离心机、水浴箱、显微镜等。抗-A、抗-B、抗-H标准血清、正定型试剂、反定型试剂、木瓜酶试剂、