反射式共聚焦激光扫描显微镜在会阴色素减退性疾病中的应用

目的探讨反射式共聚焦激光扫描显微镜(reflectance confocal microscopy,RCM)在会阴色素减退性疾病中的应用价值。方法回顾性分析2018年1月—2021年12月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科37例患者会阴色素减退性疾病的临床、RCM及组织病理学特征。结果37例患者中白癜风15例,硬化性苔藓13例,无色素痣2例,神经性皮炎4例,皮脂腺异位1例,非特异性炎症后色素减退2例。37例患者的皮损在RCM检测的同一部位进行组织病理检查,诊断均符合RCM。结论RCM有助于会阴色素减退性疾病的诊断及鉴别诊断,对白癜风及硬化性苔藓的分期也有辅助作用。

反射式共聚焦激光扫描显微镜在银屑病诊疗中的应用

银屑病严重影响患者的身心健康和生活质量，及时的诊断、准确的监测病情严重程度是判定临床病情、制定治疗方案并评估其疗效的重要前提，然而，临床上很多银屑病的皮疹并不典型，而且仅凭肉眼难以进行临床分期；

反射式共聚焦激光扫描显微镜的原理

X线、B超、CT和核磁共振等影像学技术已经成为临床医学不可缺少的一部分,现代皮肤科学的发展也需要无创性、原位、实时、动态的检测方法,对可疑皮损进行重复检查,提供客观量化的评价指标.正是基于此发展的需求,结合皮肤组织特殊的部位、厚度等,皮肤影像学方法包括皮肤镜、皮肤超声等得到了迅猛的发展.在体反射式共聚焦激光扫描显微镜（invivo Reflectance Confocal Microscopy, RCM）是基于共聚焦原理的皮肤原位、在体、实时、动态三维成像技术,是近年来最具前景的无创性皮肤影像学方法之一.

反射式共聚焦激光扫描显微镜在基底细胞癌术后随访中的应用

目的:明确反射式共聚焦激光扫描显微镜检测在基底细胞癌术后随访中的应用价值。方法:对22例基底细胞癌患者术后1个月、3个月、6个月、12个月分别进行手术部位的RCM扫描检测,RCM发现肿瘤组织的患者行组织病理学检查。结果:22例患者行RCM规律复查,其中4例于术后1个月复查发现肿瘤细胞,1例术后3个月复查发现肿瘤细胞,1例于术后半年发现肿瘤组织。6例患者均再次病理学检查诊断明确基底细胞癌,其余16例随访12个月于手术部位未见复发。结论:RCM在基底细胞癌术后随访中具有重要的应用价值。

点滴型银屑病反射式共聚焦激光扫描显微镜和皮肤镜图像特征

目的观察点滴型银屑病在反射式共聚焦激光扫描显微镜(RCM)和皮肤镜下的图像特征,为诊断及鉴别点滴型银屑病提供参考依据。方法选取组织病理学确诊的32例点滴型银屑病患者和30例斑块型银屑病患者,每例选1处皮损行RCM及皮肤镜检查,记录并统计各项图像特征。结果点滴型银屑病RCM下主要特征为角化过度、角化不全、Munro微脓肿、颗粒层变薄或缺如、棘层增厚、真皮乳头内毛细血管迂曲扩张、基底细胞层液化、真皮乳头层炎性细胞浸润等。其中Munro微脓肿及基底细胞层液化,在点滴型银屑病中发生率明显高于斑块型银屑病(P<0.05);银屑病增生模式在点滴型银屑病中发生率低(P<0.05)。点滴型银屑病皮肤镜下主要表现为低倍镜下亮红色背景、白色鳞屑、血管多种排列模式(点/球状、点/球+线状、短棒状血管);高倍镜下发夹样/环状、肾小球状血管。其中短棒状血管及血管灶性分布在点滴型银屑病中更常见(P<0.05)。结论RCM和皮肤镜可作为点滴型银屑病的无创检测方法。

激光扫描共聚焦显微镜辅助诊断诺卡菌性角膜炎1例

患者,女,57岁,因无明显诱因出现右眼异物感、视力下降1个月余,于2020年1月至成都东区爱尔眼科医院就诊后收治入院。否认糖尿病病史。患者曾于外院诊断为角膜炎,于10 d前在外院行角膜激光扫描共聚焦显微镜检查,报告发现菌丝,给予常规抗细菌治疗无效转至本院就诊。眼科检查:视力右眼0.02(-2.00 DS/-0.50 DC×90°=0.15),左眼0.08(-3.50 DS/-2.00 DC×90°=1.0);右眼眼压12.4 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),左眼眼压15.9 mmHg;右眼结膜混合充血(+),角膜中央瞳孔区可见一直径约2 mm灰白色圆形浸润灶,溃疡达浅基质层,溃疡底部较清洁,可见2个灰白色隆起针尖状病变(图1A),角膜中央直径2 mm荧光素钠染色阳性(图1B),右眼KP(-),Tyndall征(-),晶状体透明,玻璃体和视网膜未见明显异常。左眼前后节均未见明显异常。患者空腹血糖12.38 mmol/L。入院后立即行角膜刮片细胞学检查和细菌、真菌微生物培养,结果均为阴性。激光扫描共聚焦显微镜(HRT3,德国海德堡公司)检查在角膜浅基质层可见纤细分支、略微弯曲的高反光丝状结构,初次报告为“菌丝”(图2)。

非剥脱性1565 nm点阵激光治疗面部皮肤老化的临床效果及微观RCM反射式共聚焦显微镜分析

目的:采用非剥脱性1565 nm点阵激光治疗面部皮肤老化,运用反射式共聚焦显微镜(reflectance confocal microscopy,RCM)评价其临床疗效和安全性。方法:所有受试者行非剥脱性1565 nm点阵激光治疗,分别于治疗前、治疗一次后4周、8周、12周进行照相、RCM检测。结果:治疗后12周,93.3%的患者达到最佳效果;RCM结果显示,治疗后12周真皮胶原致密显著增加。结论:非剥脱性1565 nm点阵激光使面部年轻化,具有较好疗效;RCM对非剥脱性1565 nm点阵激光临床疗效的观察有显著意义。

反射式共聚焦激光扫描显微镜辅助诊断毛囊性扁平苔藓1例

患者女,50岁。躯干及上肢毛囊性丘疹伴瘙痒5个月。反射式共聚焦激光扫描显微镜(RCM)及病理诊断为毛囊性扁平苔藓。治疗后随访89 d皮疹消退,未再出现新皮疹。

高内涵分析系统联合激光扫描共聚焦显微镜观察细胞间隧道纳米管

目的隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNTs)是存在于细胞间的膜管样结构,具有直接且远距离的生物信息交换功能。TNTs因结构易破坏、存在时间短以及形成后不稳定,故观察其动态形成与功能存在一定难度。而本研究采用高内涵分析系统(HCA)联合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)尝试观察TNTs形成的动态过程及其对囊泡物质的转运功能。方法荧光探针标记人肺腺癌A549及顺铂耐药A549/DDP细胞,分别利用HCA观察TNTs形成过程、LSCM观察TNTs三维结构、HCA联合LSCM分析TNTs囊泡物质转运功能。结果同种肿瘤细胞(A549或A549/DDP)间、不同亚型肿瘤细胞(A549与A549/DDP)间均可形成TNTs结构;与A549细胞相比,A549/DDP细胞间TNTs结构长且粗、形成指数高(A549和A549/DDP细胞TNTs长度、直径和形成指数分别为14.71μm、2.27μm、4和25.44μm、2.59μm、11);肿瘤细胞间通过细胞接触-膜融合-细胞反向易位-胞膜融合区拉长变细,以及细胞膜凸起-膜凸起丝状伪足样拉长-膜凸起与其他细胞膜/膜凸起融合两种方式形成TNTs;TNTs囊泡转运功能具有双向性,囊泡转运速率及数量因转运阶段和供体细胞不同而存在差异,A549/DDP细胞向A549细胞进行囊泡转运过程中表现为囊泡转运速率初始快、末期慢,A549作为供体细胞向受体A549/DDP细胞转运的囊泡数量和比例高于A549/DDP作为供体细胞的反向转运。结论HCA联合LSCM可有效观察、分析TNTs动态形成过程及囊泡物质转运功能。

活体激光扫描共聚焦显微镜在睑缘蠕形螨检查中的应用

目的 对比活体激光扫描共聚焦显微镜(IVCM)与传统的光学显微镜对睑缘蠕形螨的检出阳性率,评价其临床应用价值。方法 收集2020年10月—2021年2月期间就诊于中国中医科学院西苑医院眼科门诊的患者93例(186只眼)。对同一患者分别使用IVCM法与光学显微镜法检测蠕形螨感染情况,记录不同方法检测出的蠕形螨的阳性率、漏诊率和检出蠕形螨数量的分布情况,比较光学显微镜检查法检测上、下睑缘的检出率。结果 (1)阳性率:2种方法检测蠕形螨均为阴性的患者8例(8.60%)。IVCM检测阳性83例(89.25%),高于光学显微镜检测阳性的56例(60.22%),差异有统计学意义(χ^(2)=20.755,P=0.000)。(2)上、下睑缘检出蠕形螨阳性率:光学显微镜法检出上、下睑蠕形螨均为阳性或均为阴性的患者84例(90.32%),不一致的患者9例(9.68%)。(3)漏诊率:IVCM法漏诊3例(3.23%),低于光学显微镜法漏诊24例(25.81%),差异有统计学意义(χ^(2)=19.107,P=0.000)。(4)蠕形螨数量的分布情况:2种检查方法检xu出不同数量蠕形螨的分布情况比较,差异有统计学意义(χ^(2)=42.809,P=0.000);对于同一患者IVCM法计数结果高于光学显微镜法2倍以上的患者达73例(86.90%)。结论 与传统光学显微镜法比较,IVCM对睑缘蠕形螨的检出的阳性率更高,漏诊率更低,定量更为准确,具有一定的临床应用价值。

超高分辨率激光扫描共聚焦显微镜的成像技术与应用

超高分辨率激光扫描共聚焦显微镜在生命科学研究领域中的应用日益广泛。该文以Zeiss LSM 880 Airyscan with STEDYCON超分辨率激光共聚焦显微镜为例,介绍了Airyscan技术和基于受激发射现象的超分辨技术(STED)的原理、应用和参数设置,以期能够为科研工作者究竟采用哪种模式进行图像采集提供参考,以获得最佳的成像效果。

反射式共聚焦激光扫描显微镜检测毛囊蠕形螨感染的临床应用

目的:探讨反射式共聚焦激光扫描显微镜(RCM)在毛囊蠕形螨检测中的临床应用。方法:对临床52例酒渣鼻患者采用挤压法、标准化皮肤表层取材法(SSSB)及RCM进行毛囊蠕形螨检测,并对其阳性率、高螨密度检出率(蠕形螨≥5个/cm^2)及单位面积内毛囊蠕形螨平均密度进行对比分析。结果:挤压法、标准化皮肤表层取材法(SSSB)及RCM法的阳性率分别为69.23%、78.85%、100%。单位面积内毛囊蠕形螨平均密度分别为8.21±6.45、16.22±13.12、410.8±203.2。结论:RCM法在毛囊蠕形螨检测中是一种更为敏感、准确、简便的方法。

反射式共聚焦显微镜评估2940nm点阵铒激光治疗皮肤痤疮瘢痕的临床疗效

目的探讨反射式共聚焦显微镜（reflectancecorffocalmicroscopy，RCM）观察2940nm点阵铒激光治疗皮肤痤疮瘢痕的疗效和安全性。方法全部受试者进行2940nm点阵铒激光治疗，并分别于术前、术后半小时、术后1—4周及3个月分别进行数码照相、RCM检测。结果术后3个月，93．33％的患者达到满意效果；RCM示：真皮胶原明显致密。结论2940nto点阵铒激光治疗痤疮瘢痕具有较好疗效：RCM对2940nm点阵铒激光临床疗效的观察有意义。

反射式共聚焦扫描显微镜在原发性皮肤淀粉样变诊断中的应用

目的探讨原发性皮肤淀粉样变在反射式共聚焦扫描显微镜(RCM)下的主要敏感图像特征。方法收集17例RCM下疑似原发性皮肤淀粉样变的病例,取该处皮损进行组织病理检查并结晶紫染色,记录并分析图像特征。结果皮损处RCM主要敏感图像特征:角化过度,棘层轻度增厚,个别真皮乳头内见中低折光团块样物质,浅层血管周围可见嗜黑素细胞及不等量炎性细胞浸润。结论RCM可作为原发性皮肤淀粉样变的无创诊断手段。

反射式共聚焦激光扫描显微镜在光动力治疗日光性角化后随访中的应用

目的:明确反射式共聚焦激光扫描显微镜检查在光动力治疗日光性角化后随访中的应用价值。方法:对16例日光性角化患者光动力治疗后1个月、3个月、6个月分别于治疗部位行RCM扫描,如RCM扫描发现肿瘤细胞,则进一步行组织病理学检查明确诊断。结果:16例患者完成治疗后均规律复诊,并行RCM检查。其中1例光动力治疗后1个月复查,RCM下发现肿瘤细胞。2例光动力治疗后3个月复查,RCM下发现肿瘤细胞。3例均再进一步行组织病理学检查诊断明确日光性角化,其余13例患者随访6个月未发现复发。结论:RCM在光动力治疗日光性角化后随访中具有重要的应用价值。

针孔参数优化对激光扫描共聚焦显微镜荧光成像的影响

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是一种高分辨率的光学成像仪器,它利用“共轭成像”原理,获得的图片质量远超于普通荧光显微镜。LSCM有两组功能不同的针孔,即照明针孔和探测针孔,这是实现“共轭成像”的关键。由于照明针孔的大小和位置一般是固定的,LSCM主要通过调节探测针孔的大小来获得高质量的成像图片。然而,很多使用者对于LSCM中针孔大小与荧光成像质量的关联缺乏了解。因此,本文阐述了针孔在LSCM中的作用原理及其与显微镜分辨率的关系,并通过小鼠脊髓腹侧白质中的免疫荧光成像分析,发现针孔参数优化对提高LSCM荧光成像质量具有显著影响。这一发现将为LSCM成像分析提供重要参考。

激光扫描共聚焦显微分析技术表征页岩亚微米级孔隙中的含油性——以准噶尔盆地芦草沟组页岩为例

亚微米级孔隙及其含油性是页岩油勘探开发所需的重要信息。为应用激光扫描共聚焦显微镜有效观测亚微米级孔隙的含油性,修改了激光扫描共聚焦显微镜主分光器和检测器的前置滤光片配置,使之能较好地进行反射光和荧光联合扫描,消除矿物所发荧光的干扰,实现了亚微米级孔隙及其含油性的精确观测。该方法在准噶尔盆地吉木萨尔凹陷芦草沟组页岩油研究中进行了应用,发现了大量的亚微米级含油孔隙;页岩油多呈不规则形状、斑块状和星点状。这套页岩的有机质成熟度Ro为0.6%~1.1%,平均约为0.9%,但轻、重质组分的分布具有显著的非均一性,不完全受成熟度控制。在有些部位,轻质组分含量及其与重质组分的比值均较高,但在成熟度相近甚至稍高的邻近部位,却存在以重质组分为主的情况。页岩层系内部的油气运移也是一个重要的控制因素。页岩中的轻质和重质组分的观测与分布规律研究,对于页岩油勘探开发十分重要,激光扫描共聚焦显微新技术可成为重要的观测手段。

激光扫描共聚焦显微镜研究储层孔隙结构

这是一项首次应用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)的激光荧光技术于油气储层的孔隙结构研究。供LSCM用的样品 ,用环氧树脂加入荧光剂后 ,经加压灌注 ,磨制成岩石薄片 ,在LSCM显微镜下观察孔喉的分布 ,可以测量面孔率 ,并可标出需要测量的每个孔喉的大小以及观察孔喉形状及分布状况。该法的优点 :1.可直接测量和观察到 2 μm左右大小的孔喉。 2 .在LSCM显微镜下可区分孔隙空间中的充填粘土杂基等 ,因此面孔率的测定较一般镜下统计和图像分析更为精确 ,因粘土矿物由于吸附染色剂后在颜色或灰度上有的不易区分。 3.岩石薄片中的微裂缝 ,在LSCM显微镜下可以更清楚地观察到。

利用激光扫描共聚焦显微镜观察同源四倍体水稻胚囊的形成与发育

激光扫描共聚焦显微镜是研究植物胚囊的形成与发育过程以及胚囊变异的理想工具。同源四倍体水稻是二倍体水稻染色体加倍形成的。本文利用激光扫描共聚焦显微镜直接观察经透明处理的水稻子房,研究加倍的基因剂量对于四倍体水稻的胚囊形成与发育的影响。结果表明,广陆矮4号四倍体大部分的胚囊形成与发育的过程基本是正常的,一部分胚囊出现异常现象,在成熟胚囊时期异常频率为10 61%;L202四倍体的异常频率较高,成熟胚囊时期异常频率达到45 65%。

激光扫描共聚焦显微镜的基本原理及其使用技巧

介绍了激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)的原理和构造,分析了LSCM的优点和缺点,并以花粉为例,详细介绍了共聚焦针孔直径、光电倍增管检测器增益、激光强度、扫描速度、扫描方式和Z轴步距等重要参数设置对共聚焦成像的不同影响。探讨了正确使用LSCM的方法与技巧,如获取高质量的图像、图像保存及图像处理,以便为科技人员利用LSCM开展更多植物学与环境科学相关的研究提供参考。