何首乌中顺式和反式-二苯乙烯苷的HPLC/DAD/MS测定及其光稳定性考察

目的采用液相色谱/光电二极管阵列检测器/质谱(HPLC/DAD/MS)联用技术鉴定何首乌中同时存在顺式和反式-二苯乙烯苷,并分别测定其含量,同时考察二苯乙烯苷对光的稳定性。方法采用反相UltimateXB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-10mmol·L-1醋酸铵水溶液二元线性梯度洗脱,流速为1mL·min-1,离子阱质谱(IT-MS)鉴定出何首乌中同时存在顺式和反式-二苯乙烯苷,DAD检测器做定量分析,检测波长为280nm。结果首次证实何首乌中不仅存在反式-二苯乙烯苷,还存在顺式-二苯乙烯苷。顺式和反式-二苯乙烯苷分别在0.252～4.022μg(r=0.9999)和2.14～34.36μg(r=0.9993)内线性关系良好,测得顺式、反式二苯乙烯苷在生首乌和制首乌中的含量分别为0.058%,1.56%和0.027%,0.84%。光照条件下何首乌中的反式-二苯乙烯苷部分转化成顺式结构,但总含量不变。结论此方法可以很好地将何首乌中的顺式和反式-二苯乙烯苷分离并准确测定其含量,灵敏度高,光照条件下何首乌中的反式-二苯乙烯苷会部分转化成顺式结构。

一种合成反式-1,2-二苯乙烯的新方法

采用Grubbs′s催化剂 ,以苯乙烯为原料 ,CH2 Cl2 为溶剂进行烯烃置换作用 ,合成出反式 1,2 二苯乙烯。为合成反式 1,2 二苯乙烯提供了一种实验简单、方法可靠的新方法。实验证明 ,用 2 (mol) %Grubbs′s催化剂 ,在 40℃ ,6h内反应产率可达 70 %。产物的结构由1HNMR。

苯乙烯焦油中反式1,2-二苯乙烯的提取与纯化

苯乙烯焦油是在苯乙烯生成过程中生成的工业废料,其中主要含有苯乙烯、反式1,2-二苯乙烯、酚类物质和其它低聚物.在对苯乙烯焦油中的苯乙烯回收过程中,二苯乙烯的提取,有利于提高经济效益,减少废弃物的排放,具有一定的实际意义和研究价值.本文对苯乙烯焦油中的,二苯乙烯的提取进行研究.苯乙烯焦油经过碱洗、分液、蒸馏,收集360℃前的馏分,经冷冻、结晶、过滤、洗涤、重结晶,得到>98%二苯乙烯;在最佳操作条件下,二苯乙烯的收率为80%,占焦油量的4%.

铁卟啉/胆固醇协同催化反式——二苯乙烯环氧化的研究

本文报道了以铁卟啉(Fe TPPCl)为催化剂、胆固醇为共底物的反式(trans)-二苯乙烯环氧化。相比单独的Fe TPPCl,在Fe TPPCl/胆固醇协同催化下trans-二苯乙烯转化率提高了6倍。通过考察反应因素包括反应温度、催化剂、共底物和反应时间的影响,得到最优的反应条件,即Fe TPPCl(1.0 mol%),胆固醇(1.0 equiv),110℃和8 h,此时trans-二苯乙烯转化率达到90%,trans-二苯乙烯环氧化物选择性达到69%。

桑根的反式二苯乙烯对HepG2细胞的抑制作用

目的:探讨桑根中提取分离的2,5′-二羟基-4,3′-二(β-D-吡喃糖氧基)-反式二苯乙烯(DGTS)对HepG2肝癌细胞的抑制增殖和诱导凋亡的作用。方法:应用台盼蓝排斥法检测不同质量浓度DGTS对HepG2细胞的增殖抑制作用;琼脂糖凝胶电泳测定细胞DNA的片段化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:DGTS作用72 h后,HepG2细胞的增殖明显受到抑制。不同浓度DGTS作用48 h后,出现HepG2细胞凋亡特征性的DNA梯度降解。经DGTS作用24、48、72 h后,HepG2细胞的凋亡率分别为0.96%、2.05%、3.29%。结论:DGTS能明显抑制HepG2细胞增殖,并存在剂量-效应关系和时间-效应关系。

指定紫外吸收区间的4,4’-二取代二苯乙烯分子的设计与合成

应用作者报导的反式4,4’-二取代二苯乙烯化合物紫外吸收能量方程进行计算,设计并合成了一系列在指定紫外吸收波长区间有吸收的反式4,4’-二取代二苯乙烯化合物.通过实验测定其紫外吸收能量,比较了文献报导的2个方程的设计合理性,进一步提出了一个三参数的方程,对目标化合物的紫外吸收能量进行计算和设计.结果表明,文献报导的2个方程基本上可以用于分子设计,而新提出的三参数方程的计算值与实验值相关性更好.方法可为二苯乙烯类光学材料的分子设计提供理论参考.

白藜芦醇对人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO生长抑制和凋亡的影响

目的观察白藜芦醇(Res)对人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO生长抑制和凋亡的影响,探讨其在抑制乳腺癌骨转移中的应用价值。方法将0、12.5、50、100、200μmo/L的Res分别与MDA-MB-231BO细胞作用24、48、72 h;用CCK-8法检测MDA-MB-231BO细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期并检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态。结果随Res浓度的增加及作用时间的延长,MDA-MB-231BO细胞的生长抑制率逐渐升高,S期细胞逐渐增多。Res浓度为200μmol/L、作用48 h,MDA-MB-231BO生长抑制率为82.17%±5.37%、早期凋亡率为4.48%±1.23%、晚期凋亡率为9.48%±2.30%,荧光显微镜下观察用药组随着Res浓度的增加,凋亡细胞逐渐增多。结论Res能抑制人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO细胞增殖,使MDA-MB-231BO细胞阻滞于S期,并可诱导该细胞凋亡。

白藜芦醇类似物的合成

3,5-二甲氧基苄溴(4)与NaCN反应生成3,5-二甲氧基苄腈(5),5经水解得到3,5-二甲氧基苯乙酸(6).5与苯甲醛或取代苯甲醛发生Knoevenagel反应生成化合物2a～2d,为Z式构型.6与苯甲醛或取代苯甲醛发生Perkin反应得到化合物3a～3c,为E式构型.2a～2d和3a～3c均为白藜芦醇类似物.给出了各步反应产物的IR,1HNMR,13CNMR和MS数据,讨论了影响反应的因素,并给出了化合物2a～2d和3a～3c对乳腺癌细胞MCF-7、肺癌细胞H446、乳腺癌细胞231的体外生理活性和对正常肝细胞L02体外毒性的半致死浓度.

壮药毛果鱼藤化学成分研究

目的:对壮药毛果鱼藤Derris eriocarpa How的化学成分进行分离鉴定,并对分离到的化合物进行抗肿瘤活性评价。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、ODS柱色谱等方法对毛果鱼藤的化学成分进行分离纯化,运用理化性质和现代波谱学技术进行化合物的结构鉴定;采用MTT法对化合物进行抗肿瘤活性评价。结果:从毛果鱼藤乙酸乙酯萃取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为:3,5-二甲氧基-4′-异丙基反式二苯乙烯(1)、2′-deoxyisoauriculatin(2)、flemichapparin B(3)、1-[6-羟基-2-甲氧基-2″,2″-二甲基吡喃-(5″,6″∶3,4)]-2-(4′-甲氧基苯基)-1,2-乙二酮(4)、1-[6-羟基-2-甲氧基-2″,2″-二甲基吡喃-(5″,6″∶3,4)]-2-(3′,4′-亚甲二氧基苯基)-1,2-乙二酮(5)、dimethylalpinum isoflavone(6)、4-羟基-3-[4′-O-(3,3-二甲基烯丙基)苯基]-5-甲氧基-2″,2″-二甲基吡喃-(5″,6″∶6,7)-香豆素(7)、derrubone(8)、甘草宁G(9)、derrusnin(10)、木豆素(11)、6a-dihydroxy-9-methoxypterocarpan(12)。体外抗肿瘤活性筛选的结果显示,化合物8抑制Hela细胞的IC_(50)为10.62μmol/L,化合物9抑制HepG_(2)细胞的IC_(50)为56.90μmol/L。结论:其中,化合物2~6和9为首次从毛果鱼藤中分离得到,化合物1、11和12为首次从鱼藤属植物中分离得到。化合物8具有较好的肿瘤细胞生长抑制作用,化合物9具有较弱的抗肿瘤活性。

古法黑豆蒸晒与药典黑豆汁连续蒸对何首乌中12个成分含量的影响

目的探究何首乌Polygoni Multiflori Radix采用古法黑豆"九蒸九晒"和现代药典黑豆汁连续蒸制对主要药效成分含量的影响。方法模拟"九蒸九晒"的时间安排,制备古法黑豆与何首乌分层铺放蒸后晒品、拌入黑豆汁蒸后晒品和药典拌入黑豆汁后连续蒸制品;建立超高压液相三重四极杆质谱(UPLC-Qq Q-MS/MS)测定何首乌中12个成分的分析方法并进行检测;结合t检验、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析评价不同炮制方法所得样品的差异。结果建立了可靠的UPLC-Qq Q-MS/MS测定何首乌中大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、顺式-2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(cis-THSG)、反式-2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(trans-THSG)、虎杖苷、白藜芦醇、表儿茶素、芦丁和金丝桃苷含量的方法;随着蒸制时间的延长,12个成分的含量发生了明显变化:游离蒽醌类成分先降低后升高,蒽醌苷类成分、cis-THSG、虎杖苷和金丝桃苷先升高后降低,trans-THSG、白藜芦醇、表儿茶素和芦丁降低;成分的含量与蒸制用的辅料和操作方法及炮制时间密切相关,操作方法的影响大于辅料对何首乌质量的影响。结论从成分含量的角度分析,古法黑豆蒸晒与药典法的黑豆汁连续蒸制不能等同,该研究为传承和发扬何首乌的传统炮制方法提供了实验依据。

基于半定量分析方法的药对配伍对制首乌成分含量及DPPH自由基清除能力影响研究

目的采用半定量分析方法对制首乌与9个补虚药配伍后成分含量及DPPH自由基清除能力变化进行研究。方法以UPLC-DAD建立制首乌多成分半定量分析方法,对制首乌与9味常用补虚药(当归、熟地黄、白芍、党参、黄芪、甘草、麦冬、枸杞子、墨旱莲)配伍后成分含量变化进行分析。采用DPPH法分别测定单味药以及配伍药对的自由基清除能力,绘制量-效曲线并计算半数清除浓度(EC50)。采用多元统计分析方法建立制首乌中多成分含量与DPPH自由基清除能力间的量-效回归模型,筛选量-效关系中影响显著的化学标志物,并通过质谱进行定性分析。结果线性范围、准确度、精密度、重复性及稳定性5项方法学验证结果表明,半定量分析方法可用于制首乌中12个成分在配伍前后的含量对比分析。含量对比分析结果表明,制首乌与不同药物配伍后,12个成分的含量均发生了不同程度的变化,且与墨旱莲配伍后制首乌中有33%的成分含量显著降低(P<0.05)、42%的成分含量显著升高外(P<0.05),与另8味药配伍后制首乌中至少50%的成分含量显著降低(P<0.05)。DPPH自由基清除能力实验结果显示,制首乌DPPH自由基清除能力高于其他9味中药,配伍后9个制首乌药对的DPPH自由基清除能力低于制首乌,但高于相应的配伍药物。量-效回归正交偏最小二乘法(orthogonal projections to latentstructures,OPLS)模型中R2X、R2Y及Q2值分别为0.841、0.981及0.962,筛选出4个量-效关系化学标志物,分别为反式-2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(trans-THSG)、大黄素甲醚、顺式-2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(cis-THSG)、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(EG)。结论建立的多成分半定量分析方法可用于何首乌在药对配伍过程中多成分含量变化的对比分析,trans-THSG、大黄素甲醚、cis-THSG、EG是影响制首乌在上述药对中发挥DPPH自由基清除作用的化学标志物,可为制首乌药对配伍机制的深入研究提供参考。

何首乌标准饮片的HPLC特征图谱分析

目的:建立何首乌标准饮片的HPLC特征图谱,并与何首乌原形饮片、原料药材、对照药材的HPLC特征图谱进行对比分析。方法:采用HPLC,Waters BEH-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,15%~30%A;20~35 min,30%~40%A;35~55 min,40%~75%A;55~75 min,75%~100%A),柱温30℃,检测波长270 nm,流速0.8 mL·min^-1,进样量10μL;对何首乌标准饮片及其原形饮片、原料药材、对照药材的HPLC特征图谱进行相似度分析和聚类分析。结果:构建了由7个色谱峰组成的何首乌标准饮片HPLC特征图谱;何首乌标准饮片与原形饮片特征图谱的相似度达0.999,优于原料药材、对照药材与原形饮片特征图谱的相似度;标准饮片与原形饮片的图谱在色谱峰个数上无明显差异,而对照药材与原形饮片图谱在峰个数上有明显差异;并且标准饮片与原形饮片、对照药材大体上聚为一类,而原料药材大体上聚为一类。结论:相比较原料药材和对照药材,所建立的何首乌标准饮片HPLC特征图谱能更好地反映原形饮片的内在质量,可用于何首乌饮片的质量控制。