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地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA
1
作者
姚钧
王瑞安
《中国组织化学与细胞化学杂志》
CAS
CSCD
1994年第1期22-28,共7页
本实验采用含大鼠生长抑素基因的pSP65cDNA质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛(DigoxigeninDig)作为标记物,体外转录合成生长...
本实验采用含大鼠生长抑素基因的pSP65cDNA质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛(DigoxigeninDig)作为标记物,体外转录合成生长抑素反意RNA(cRNA)探针。实验动物选用wistar新生大鼠。冰冻切片,端、间脑切片经杂交前用Dig-UTP标记的cRNA探针杂交,杂交后用抗Dig-碱性磷酸酶复合物进行酶联免疫反应。X-磷酸盐-NBT显色。结果显示新生大鼠脑内生长抑素mRNA神经元着紫蓝色。杂交反应物集中于核周的胞浆及短小的突起内。胞核不着色。胞体轮廓清晰,周围背底浅淡。结果表明Dig标记cRNA探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能快速和准确检测组织细胞内mRNA的表达。
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关键词
地高辛
反意rna探针
生长抑素
m
rna
脑组织
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职称材料
不同方式标记非放射性探针原位杂交效果评价
2
作者
刘宁国
赵子琴
+3 位作者
顾云菊
陈忆九
阎祖康
廖燕萍
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期7-8,共2页
目的比较不同方式标记非放射性探针的原位杂交效果。方法通过两种方法标记地高辛随机引物DNA探针和反意RNA探针,在大鼠损伤模型的皮肤组织上进行原位杂交。结果两种探针均可满足要求,以反意RNA探针在阳性染色深度和背景方面效果更佳。结...
目的比较不同方式标记非放射性探针的原位杂交效果。方法通过两种方法标记地高辛随机引物DNA探针和反意RNA探针,在大鼠损伤模型的皮肤组织上进行原位杂交。结果两种探针均可满足要求,以反意RNA探针在阳性染色深度和背景方面效果更佳。结论RNA探针在杂交效果方面优于DNA探针。
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关键词
原位杂交
地高辛
随机引物
探针
反意rna探针
法医病理学
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职称材料
人体皮肤切创纤维连接蛋白EDA、EDB的表达与损伤时间关系的研究
被引量:
6
3
作者
薛爱民
赵子琴
+1 位作者
沈忆文
顾云菊
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2003年第3期140-142,共3页
目的研究纤维连接蛋白(fibronectin,FN)可变剪接片段EDA、EDB在人体皮肤切创的表达情况,并摸索EDA、EDBmRNA在离体皮肤上最长检出时限,以期为早期损伤时间的推断提供实用的参考指标。方法采用DIG标记的反意RNA探针,原位杂交检测人体皮...
目的研究纤维连接蛋白(fibronectin,FN)可变剪接片段EDA、EDB在人体皮肤切创的表达情况,并摸索EDA、EDBmRNA在离体皮肤上最长检出时限,以期为早期损伤时间的推断提供实用的参考指标。方法采用DIG标记的反意RNA探针,原位杂交检测人体皮肤在损伤早期(从30min开始)FNEDA、EDBmRNA表达的变化。结果正常人体皮肤无EDA、EDBmRNA表达;在损伤早期(≤3h)FNEDA、EDB的表达随时间的延长而呈现一种不断上升的趋势;EDA、EDBmRNA主要出现在表皮基底层细胞;EDA、EDBmRNA在标本离体后4h就不能检测到。结论FNEDA、EDB可作为早期损伤时间推断的较理想的参考指标,但原位杂交的检测方法不适用于实际应用。
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关键词
纤维连接蛋白
损伤时间
反意rna探针
原位杂交技术
创伤
法医学鉴定
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职称材料
题名
地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA
1
作者
姚钧
王瑞安
机构
第二军医大学组织胚胎学教研室
出处
《中国组织化学与细胞化学杂志》
CAS
CSCD
1994年第1期22-28,共7页
文摘
本实验采用含大鼠生长抑素基因的pSP65cDNA质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛(DigoxigeninDig)作为标记物,体外转录合成生长抑素反意RNA(cRNA)探针。实验动物选用wistar新生大鼠。冰冻切片,端、间脑切片经杂交前用Dig-UTP标记的cRNA探针杂交,杂交后用抗Dig-碱性磷酸酶复合物进行酶联免疫反应。X-磷酸盐-NBT显色。结果显示新生大鼠脑内生长抑素mRNA神经元着紫蓝色。杂交反应物集中于核周的胞浆及短小的突起内。胞核不着色。胞体轮廓清晰,周围背底浅淡。结果表明Dig标记cRNA探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能快速和准确检测组织细胞内mRNA的表达。
关键词
地高辛
反意rna探针
生长抑素
m
rna
脑组织
Keywords
Dingoxigenin
Probe
c
rna
Somatostatinl Braing Tissue
分类号
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
不同方式标记非放射性探针原位杂交效果评价
2
作者
刘宁国
赵子琴
顾云菊
陈忆九
阎祖康
廖燕萍
机构
司法部司法部司法鉴定科学技术研究所
复旦大学基础医学院法医学系
出处
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期7-8,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目(No:39770816)
文摘
目的比较不同方式标记非放射性探针的原位杂交效果。方法通过两种方法标记地高辛随机引物DNA探针和反意RNA探针,在大鼠损伤模型的皮肤组织上进行原位杂交。结果两种探针均可满足要求,以反意RNA探针在阳性染色深度和背景方面效果更佳。结论RNA探针在杂交效果方面优于DNA探针。
关键词
原位杂交
地高辛
随机引物
探针
反意rna探针
法医病理学
Keywords
in situ hybridization
digoxin
antisense
rna
probe
random primed DNA probe
分类号
D919.1 [医药卫生—法医学]
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职称材料
题名
人体皮肤切创纤维连接蛋白EDA、EDB的表达与损伤时间关系的研究
被引量:
6
3
作者
薛爱民
赵子琴
沈忆文
顾云菊
机构
复旦大学上海医学院法医学系
出处
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2003年第3期140-142,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(39770816)
文摘
目的研究纤维连接蛋白(fibronectin,FN)可变剪接片段EDA、EDB在人体皮肤切创的表达情况,并摸索EDA、EDBmRNA在离体皮肤上最长检出时限,以期为早期损伤时间的推断提供实用的参考指标。方法采用DIG标记的反意RNA探针,原位杂交检测人体皮肤在损伤早期(从30min开始)FNEDA、EDBmRNA表达的变化。结果正常人体皮肤无EDA、EDBmRNA表达;在损伤早期(≤3h)FNEDA、EDB的表达随时间的延长而呈现一种不断上升的趋势;EDA、EDBmRNA主要出现在表皮基底层细胞;EDA、EDBmRNA在标本离体后4h就不能检测到。结论FNEDA、EDB可作为早期损伤时间推断的较理想的参考指标,但原位杂交的检测方法不适用于实际应用。
关键词
纤维连接蛋白
损伤时间
反意rna探针
原位杂交技术
创伤
法医学鉴定
Keywords
fibronectin
EDA\EDB domain
early injury time estimation
insitu hybridization
分类号
R641 [医药卫生—外科学]
D919.4 [医药卫生—法医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA
姚钧
王瑞安
《中国组织化学与细胞化学杂志》
CAS
CSCD
1994
0
下载PDF
职称材料
2
不同方式标记非放射性探针原位杂交效果评价
刘宁国
赵子琴
顾云菊
陈忆九
阎祖康
廖燕萍
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2002
0
下载PDF
职称材料
3
人体皮肤切创纤维连接蛋白EDA、EDB的表达与损伤时间关系的研究
薛爱民
赵子琴
沈忆文
顾云菊
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2003
6
下载PDF
职称材料
已选择
0
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统计分析
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