基于反相高效液相色谱法的面团黏性与小麦醇溶蛋白组成关系研究

以74份不同黏性等级的小麦品种(系)为研究材料,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离不同黏性小麦品种的醇溶蛋白特征图谱,并进行面团黏性、醇溶蛋白组分含量与小麦面粉品质性状的相关性分析,以期建立采用少样本量快速准确识别面团黏性的方法。结果表明,经RP-HPLC分离后,ω-、α/β-和γ-醇溶蛋白3个组分在图谱上清晰可见;不同黏性等级小麦材料的醇溶蛋白得到了不同的特征图谱,黏性较大的小麦ω-醇溶蛋白的组分峰数较多,总峰面积较大;ω-醇溶蛋白在不同黏性等级小麦材料间存在显著差异。相关性分析结果表明,面团黏性与ω-醇溶蛋白相对含量呈极显著正相关,与α/β-和γ-醇溶蛋白相对含量相关性不显著;ω-醇溶蛋白相对含量与沉淀值、形成时间、稳定时间、能量、拉伸阻力和最大拉伸阻力均呈极显著负相关,与蛋白质、湿面筋含量均呈显著正相关,与弱化度呈极显著正相关;ɑ/β-醇溶蛋白相对含量与蛋白质、湿面筋含量均呈极显著正相关;γ-醇溶蛋白相对含量与小麦各品质性状均无显著相关性。可见,面团黏性主要与ω-醇溶蛋白相对含量有关,ω-醇溶蛋白对面团质量有弱化作用。

反相高效液相色谱法同时测定五味香连丸中10种成分含量

目的建立同时测定五味香连丸中盐酸小檗碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、木香烃内酯、去氢木香内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、芍药苷10种成分含量的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为Waters SunFire C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为含0.02%三乙胺的0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至3.5)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为225 nm,进样量为10µL。结果盐酸小檗碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、木香烃内酯、去氢木香内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、芍药苷的质量浓度分别在6.852~51.39µg/mL、2.956~22.17µg/mL、2.918~21.88µg/mL、4.643~34.82µg/mL、4.871~36.53µg/mL、4.007~30.05µg/mL、4.519~33.89µg/mL、4.482~33.62µg/mL、2.724~20.43µg/mL、2.809~21.07µg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9992,n=6);定量限分别为0.66,0.31,0.29,0.45,0.48,0.41,0.42,0.46,0.27,0.28µg/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%(n=6);回收率分别为100.36%,98.74%,98.71%,99.67%,99.86%,99.59%,98.70%,98.38%,98.25%,98.72%,RSD分别为0.89%,1.02%,1.04%,1.17%,0.84%,1.15%,1.33%,1.20%,1.07%,1.23%(n=6)。3批样品中上述成分的平均含量分别为1.165~1.192 mg/g、0.5231~0.5276 mg/g、0.4997~0.5011 mg/g、0.6814~0.6889 mg/g、0.6977~0.7002 mg/g、0.6068~0.6134 mg/g、0.5801~0.5837 mg/g、0.4277~0.4422 mg/g、0.4101~0.4165 mg/g、0.4002~0.4013 mg/g(n=2)。结论所建立的方法简便可行、结果准确可靠、稳定性好,可用于同时测定五味香连丸中10种成分的含量。

鹰嘴豆黄酮类化合物反相高效液相色谱法的建立及其体外药效评价

【目的】建立鹰嘴豆黄酮类化合物有效成分的反相高效液相色谱方法,并通过抑菌试验评价鹰嘴豆和鹰嘴豆总黄酮的体外药效。【方法】运用反相高效液相色谱分析方法,采用Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×150.0 mm,5μm)色谱柱,流动相A(甲醇)∶B(0.5%磷酸溶液)=45∶55,以0.8 mL/min流速进行等度洗脱,柱温30℃,利用高效液相色谱仪对精密度、稳定性、重复性及加样回收率进行验证。通过滤纸片扩散法、牛津杯法、微量肉汤稀释法评价鹰嘴豆(100 mg/mL)和鹰嘴豆总黄酮(20 mg/mL)的抑菌效果。【结果】等度洗脱后,共分离出芦丁、柚皮苷二氢查尔酮、槲皮素3种黄酮成分,其色谱峰在30 min内均分离度良好,线性范围为0.00375~0.06000 mg/mL(R^(2)为0.996~0.999);稳定性和重复性试验结果表明,芦丁含量为0.032 mg/g,柚皮苷二氢查尔酮含量为0.052 mg/g,槲皮素未检出。抑菌效果试验表明,滤纸片扩散法和牛津杯法检测鹰嘴豆和鹰嘴豆总黄酮均未出现抑菌圈,微量肉汤稀释法的孔板均浑浊。【结论】本试验选用的反相高效液相色谱法具有一定可靠性,适用于鹰嘴豆中芦丁和柚皮苷二氢查尔酮2种黄酮类化合物的分离测定;通过3种抑菌方法验证,鹰嘴豆和鹰嘴豆总黄酮均未出现抑菌作用。

基于反相高效液相色谱法测定复方苯甲酸软膏中苯甲酸和水杨酸含量

目的建立复方苯甲酸软膏中苯甲酸和水杨酸含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法对复方苯甲酸软膏中苯甲酸和水杨酸进行含量测定。采用Shimadzu-C18色谱柱(4.5 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸(50∶50),等度洗脱;流速为1.0 ml/min;检测波长为240 nm。结果苯甲酸在30.48~182.88μg/ml内线性关系良好,回归方程为Y=30181X+88709(r=0.9999);平均加样回收率为103.24%,RSD值为0.5%。水杨酸在15.52~93.11μg/ml内线性关系良好,回归方程为Y=32186X+2656.9(r=0.9999);平均加样回收率为101.11%,RSD值为1.19%。苯甲酸和水杨酸含量均在标示量范围内。结论本研究建立的方法可用于复方苯甲酸软膏中苯甲酸和水杨酸的含量测定。

反相高效液相色谱法同时测定清脑降压片中黄芩苷、阿魏酸和藁本内酯的含量

目的:建立测定清脑降压片中黄芩苷、阿魏酸和藁本内酯含量的反相高效液相色谱法。方法:色谱柱采用ODS-C 18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%磷酸水梯度洗脱;黄芩苷、阿魏酸、藁本内酯检测波长为326 nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温35℃。结果:黄芩苷在221.62~3324.30 ng范围内与峰面积线性关系良好(Y=0.0654X-0.0021,γ=1.0000)。平均加样回收率为98.6%,RSD为1.42%(n=6),阿魏酸在20.07~401.40 ng范围内与峰面积线性关系良好(Y=1.0469X-0.9536,γ=1.0000)。平均加样回收率为97.8%,RSD为1.05%(n=6)。藁本内酯在20.13~402.60 ng范围内与峰面积线性关系良好(Y=0.6333X-0.6877,γ=1.0000)。平均加样回收率为98.2%,RSD为1.42%(n=6)。结论:本方法可行、准确、重复性好,可作为清脑降压片中黄芩苷、阿魏酸和藁本内酯的质量控制方法。

反相高效液相色谱法测定彩妆新型防腐剂BIT的研究

本文研究并建立采用反相高效液相色谱法测定彩妆行业新型防腐剂:1,2-苯并异噻唑啉-3-酮(BIT)的方法。BIT采用色谱纯甲醇常温超声萃取,色谱分离柱为SHIMADZU Shim-pack GIST C18分析柱(4.6 mm*250 mm*5μm),以色谱纯甲醇∶水=70%∶30%为流动相等度洗脱测定。紫外检测波长λ1=225 nm(定量波长)/λ2=319 nm(辅助定性波长),CTO柱温箱温度设置为30℃。标准曲线线性范围0.5μg/mL~100.0μg/mL,线性方程A=13323.8C-3505.69,相关系数R=0.9998550,最低检出限0.36μg/mL,平均回收率99.3%,相对标准偏差RSD%为0.19%(n=10)。该方法简单、灵敏、准确、快速,为我司彩妆类多款产品新型防腐剂BIT的检测及质量控制提供了一个实用便捷的分析方法。

反相高效液相色谱法测定乳酸左氧氟沙星滴眼液含量及其降解产物

采用反相高效液相色谱法测定乳酸左氧氟沙星滴眼液含量及其降解产物。色谱条件:色谱柱为C_(18)柱;流动相为0.05mol/L柠檬酸溶液-甲醇-乙腈(65:30:5);检测波长294nm;流量为1ml/min;室温。回收率为100.5％(n=6),RSD为0.60％。本色谱条件可用于本品含量测定和降解产物检查。

反相高效液相色谱法测定食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量的研究

分析和探讨反相高效液相色谱法在食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量测定中的应用。利用反相高效液相色谱法对食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量及回收率进行检测,分析其精密度和准确度。经过氨水溶液的提取,样品通过C18反相色谱柱进行分离。使用磷酸氢二钾(0.2%)-甲醇为流动相,以恒定比例进行洗脱。通过在280nm的波长下进行检测,并通过外标法进行定量分析。结果表明:食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙的添加量为3000~5000μg/g时,加标回收率为96.65%~98.65%。本方法操作简便、准确、回收率高,重复性好,验证了方法的合理性,为食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量测定提供科学参考。

有机酸类化合物的反相高效液相色谱法的分离条件研究

研究了在用RP HPLC法测定有机酸时如何对流动相的酸度进行控制 ,给出了流动相最佳pH的选择通式 :色谱柱允许的最低 pH值≤pH≤pKa- 2 ;研究了流动相中甲醇、乙腈存在时对此通式的影响。用研究得出的结论选择了测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸和丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸时的色谱条件 ,并且研究了每种酸在各自浓度范围内测定的线性关系、回归方程、相关系数以及相对标准偏差。实验显示 ,在选定的色谱条件下进行分析测试时 ,各种酸的线性相关系数r >0 9995 ,相对标准偏差RSD <0 90 %。

反相高效液相色谱法快速测定长春花中4种生物碱

采用反相高效液相色谱法同时分离测定 4种长春花吲哚类生物碱。以水∶二乙胺 =986∶14,用磷酸调节pH=7. 2(溶液A),甲醇∶乙腈 =4∶1(溶液B), 380mLA和 620mLB混合作为流动相,流速 2mL/min,进样量 10μL, 220nm下检测,以恒流洗脱方式在 25min内分离了长春碱等 4种成分。同时还研究了流动相组成、pH值等对分离效果的影响。对实际样品分析,取得了较好结果。

反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定啤酒中有机酸

建立了一种利用反相高效液相色谱法同时测定啤酒中 9种有机酸的方法。应用反相C18色谱柱Nucleosil 10 0C18 2 5 0× 4 0mm ,以 0 1mol/LKH2 PO4(用H3 PO4调 pH3 0 )为流动相 ,紫外检测 2 15nm ,将啤酒中草酸、丙酮酸、苹果酸、α 酮戊二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸、琥珀酸一次性分离。除柠檬酸外各种有机酸的回收率在 85 %以上 ,变异系数 <5 %。该方法简便、快速、准确。此外 ,对影响有机酸分离的因素进行了研究 。

反相高效液相色谱法测定果汁中11种有机酸条件的优化

提出了一种利用高效液相色谱同时分析果汁中11种有机酸的优化的方法。在Prontosil12010C18H(10μm,4.6mmi.d.×250mm)色谱柱上,3%CH3OH0.01mol/LK2HPO4(pH2.55)溶液做流动相,流速为0.5mL/min,柱温为30℃,紫外检测波长为210nm时,可以较好地分离和测定果汁中常见的11种有机酸。该方法相对标准偏差0.31%～1.59%,回收率96.8%～102.0%,各种酸的线性相关系数r>0.9996,具有较高的准确度和精确度,方法简便,可应用于果汁中有机酸的检测。

反相高效液相色谱法测定女贞子中红景天苷的含量

目的 测定女贞子中红景天苷的含量。方法 用反相高效液相色谱法 ,流动相为甲醇 水 (7.5∶92 .5 ) ,紫外检测波长2 78nm ,流速 1.6mL·min-1。结果 红景天苷对照品在 7～ 45 6mg·L-1浓度内线性关系良好 ,r=0 .9997。平均加样回收率97.2 % ,RSD为 3.4%。结论 该法简便 ,分离完全 ,结果可靠 ,适用于女贞子中红景天苷的测定。

反相高效液相色谱法测定枳实、枳壳中橙皮甙和柚皮甙的含量

采用高效液相色谱法测定了枳实和枳壳中的橙皮甙和柚皮甙含量。色谱柱为HypersilODS1柱(250mm×4 6mmi d ),流动相为乙腈 0 5%乙酸溶液(体积比为22∶78),流速为1 0mL/min,检测波长为283nm。柚皮甙和橙皮甙的线性范围分别为0 060g/L～0 604g/L和0 0125g/L～0 125g/L,柚皮甙和橙皮甙的平均回收率分别为97 1%和95 3%。该方法具有操作简便、分析快速、准确等优点。

反相高效液相色谱法同时测定姜黄药材中3个组分的含量

建立了一种反相高效液相色谱方法,同时测定中药材姜黄块根中3组分的含量。采用KromasilTMC18柱(5μm,200mm×4.6mm),以磷酸水溶液(pH=2.5)和乙腈溶剂为流动相,梯度洗脱,流速0.9mL/min,柱温40℃,检测波长为425nm,10min内即可将3种组分分离测定。该方法快速、简便、准确,可为评价不同产地的姜黄质量提供依据。

反相高效液相色谱法测定产琥珀酸放线杆菌发酵液中的有机酸

提出了一种利用高效液相色谱法分析产琥珀酸放线杆菌发酵液中有机酸的方法。在EclipseXDB C8(4 .6mmi.d .× 1 5 0mm ,5 μm)色谱柱上 ,以 0 .0 0 5mol L硫酸溶液 (pH 2 .5 )作流动相 ,流速为 1mL min ,紫外检测波长 2 1 0nm。 7min内可以把 6种混合酸标样完全分离定量。发酵液经离心后直接进样分离定量 ,其中的琥珀酸、乳酸的回收率大于 97%。经多次实验结果证明 :本方法是测定琥珀酸发酵液中各有机酸的快速、有效的定量测定方法。

固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定饲料中的角黄素和虾青素

建立了一种同时测定饲料中角黄素和虾青素的固相萃取-高效液相色谱法（HPLC）。样品由乙腈提取,经LC-NH2固相萃取小柱净化,洗脱剂为乙腈-甲苯（体积比为3∶1）,洗脱液被浓缩后进行HPLC分析,色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-甲醇（体积比为95∶5）,流速1.0mL/min,采用二极管阵列检测器检测,检测波长为474nm;外标法定量。角黄素和虾青素的线性范围分别为1.0～30.0mg/L和1.0～20.0mg/L,相关系数分别为0.9990和0.9991,回收率为90%～101%,相对标准偏差为0.62%～3.68%,检出限分别为0.84和0.60mg/L。该方法简便、快速、准确,可用于饲料中角黄素和虾青素的同时测定。

反相高效液相色谱法测定青钱柳中黄酮化合物含量

用反相高效液相色谱法 ,对我国特有保健食品资源青钱柳中的异槲皮甙、槲皮素和山柰酚的含量进行了测定。色谱条件为AlltimaC18柱 ( 5μm ,150mm× 4 .6mm) ,流动相A为H2 O∶HOAc=98∶2 (V/V) ,流动相B为CH3CN。洗脱程序为 :8%B→ 3 0min→ 50 %B→ 5min→ 50 %B→ 5min→8%B。检测波长为 3 60nm ,流速为 0 .6mL/min。该方法的平均回收率和RSD为 98.6%和 1.57%。测得 :青钱柳甲醇提取物中黄酮含量为异槲皮甙 0 .543 % ,槲皮素 0 .0 615% ,山柰酚 0 .0 3 87% ;水提取物中异槲皮甙 0 .4 64 % ,槲皮素 0 .0 60 3 % ,山柰酚 0 .0 3 3 7%。

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸

先用乙醇提取烟叶中的游离氨基酸 ,提取液经阳离子交换树脂纯化后 ,再用邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯 (FMCF)联合柱前衍生化和反相高效液相色谱法测定了烟叶中 17种带伯氨基和 /或仲氨基的游离氨基酸。方法的重复性为 :天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸 (Glu)和组氨酸 (His)的相对标准偏差 (RSD)分别为 8.0 %、8.6 %和 9.0 % ,其它氨基酸的RSD均在 3%～ 7%范围内 ;回收率 ,除苏氨酸 (Thr)的为 6 8.0 %较低外 ,其它氨基酸的在 81.0 %～ 110 .5 %范围内 ,平均为 93.9%。用该方法测定了不同等级烟叶中的游离氨基酸。