混合型离子交换反相吸附固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定水中23种非甾体抗炎药的残留

非甾体抗炎药(NSAIDs)作为一种新型有机污染物,在环境水体中普遍检出,对生态系统及人体健康造成潜在的威胁,开发准确、可靠的测定水中痕量非甾体抗炎药的检测方法至为重要.本文采用Oasis MCX固相萃取柱对水样进行富集,建立测定水中23种非甾体抗炎药的超高效液相色谱-三重四极杆质谱分析方法.采用酸性条件(pH=4)萃取水样,上样的流速为2 mL·min^(−1),用4 mL甲醇-4 mL5%氨水甲醇进行洗脱,浓缩定容后用ACQUITY UPLCTM BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以2 mmol·L^(−1)乙酸铵+0.05%(V/V)甲酸水溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,多反应选择离子监测(MRM)模式进行检测,内标法定量.23种NSAIDs在相关线性范围内线性良好(r=0.9951—0.9992),回收率为80.2%—120%,相对标准偏差为0.4%—12.5%,方法检出限为0.20—4.84 ng·L^(−1).将该方法应用于10份地表水的检测,结果显示有10种NSAIDs检出,质量浓度在ND—83.5 ng·L^(−1)之间.该方法简单、灵敏、高效,可应用于环境水体中NSAIDs的检测.

反相离子对-高效液相色谱法测定河豚毒素

目的 :建立了反相离子对 -高效液相色谱法测定河豚毒素含量的方法。方法 :选用 SHIMADZU ODS色谱柱 (15 0× 6 mm5 μm) ,以 0 .2 % (v/v)醋酸液为流动相 ,流速为 1.2 m L/m in,检测波长为 2 30 nm。结果 :河豚毒素线性范围 2 0～ 10 0 μg/m L,r= 0 .996 0 (n=5 ) ;回收率为 93.32 % ,RSD=5 .41% (n=5 ) ;日内精密度为 6 .10 % ,日间精密度为 7.42 % (n=5 ) :最低检测限5 0 ng。结论 :方法准确、快速、简便 。

离子对反相高效液相色谱法同时测定尿液中复方α-酮酸片的5种有效成分

建立了同时测定尿液中复方α-酮酸片5种有效成分（消旋羟蛋氨酸钙（HMACa）、酮缬氨酸钙（KVCa）、消旋酮异亮氨酸钙（KILCa）、酮亮氨酸钙（KLCa）和酮苯丙氨酸钙（KPACa））的离子对反相高效液相色谱法。分别考察了离子对试剂浓度、缓冲盐浓度和流动相pH值等参数对分离情况的影响。最终采用Waters SymmetryC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；以乙腈和含15mmol／L四丁基氢氧化铵的20mmol／L磷酸盐缓冲液（pH7．0）为流动相进行梯度洗脱，流速为1．0mL／min；柱温为35℃；检测波长为210nm。在上述条件下，5种有效成分得到很好的分离，并且不受尿液中内源性基质的干扰，在20～200mg／L范围内线性关系良好（r≥0．9990）；HMACa、KV-Ca、KILCa、KLCa和KPACa的检出限（S/N=3）分别为3．0、5．0、3．6、5．7和2．5mg／L；定量限（S/N=10）分别为9．6、16．7、12．0、19．0和8．3mg／L；日间、日内精密度均小于7％；平均回收率在85．79％～112，00％之间，RSD小于9％（n=5）。该方法准确，灵敏度高，重现性好，适用于尿液中这5种有效成分的检测。

离子对-反相高效液相色谱法同时测定解磷注射液中氯磷定、盐酸苯那辛、硫酸阿托品的含量

研究建立了离子对 -反相高效液相色谱法 ( IP- HPLC)同时测定解磷注射液中氯磷定、硫酸阿托品、盐酸苯那辛含量的分析方法及其有关物质和降解产物检查法。采用 ZORBAXSB C18色谱柱 ,流动相 :甲醇 -乙腈 - 1mol· L-1磷酸 (用三乙胺调 p H=3.0 ) - 0 .2 mol· L-1磷酸二氢钠 (用磷酸调 p H=3.0 ) - 0 .9%十二烷基硫酸钠水溶液 ( 2 0 0∶ 4 0 0∶ 10∶ 90∶ 30 0 ) ,在流速 1.0 m L· min-1下 ,检测波长 2 2 0 nm处 ,测定氯磷定、硫酸阿托品、盐酸苯那辛 ,其回收率分别为 10 0 .36% ( RSD 0 .90 % )、99.4 4 % ( RSD 1.0 9% )、99.82 %( RSD 1.2 3% )。该方法简便、快速 。

离子液体基磁性固相萃取-高效液相色谱法测定饮料中的合成色素

国家对合成色素使用量有严格限量标准,有效萃取和测定食品中合成色素对保障食品安全有重要意义。采用红外光谱、透射电镜和振动样品磁强计等对合成的聚合离子液体修饰的磁性纳米材料的结构、形貌和磁性进行了表征,将此磁性纳米材料作为磁性固相萃取(magnetic solid-phase extraction,MSPE)吸附剂,研究了其对4种合成色素(柠檬黄、日落黄、诱惑红和亮蓝)的萃取性能,结合MSPE与高效液相色谱技术,对影响萃取效率的吸附剂用量、吸附时间、解吸时间和盐的含量等参数进行了优化。研究结果表明:根据吸附剂对典型阴/阳离子型染料的吸附结果,推断4种合成色素的有效萃取归因于吸附剂与分析物之间存在的强静电引力以及π-π和疏水作用等多重作用;在吸附剂用量为10 mg、吸附时间为20 min、解吸剂为1 mL乙腈/盐酸(体积比9∶1)和解吸时间为10 s的优化萃取条件下,4种色素具有良好的线性(决定系数为0.9922~0.9975),检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为1~3μg/L和2.5~10μg/L;该方法能成功用于碳酸饮料健力宝和菠萝啤中合成色素的测定,3个质量浓度下(日落黄、诱惑红和亮蓝均为25、100、250μg/L,柠檬黄为50、200、500μg/L)的加标回收率为71.4%~113.0%,相对标准偏差小于10.9%(n=3)。本研究为食品中合成色素的分析提供了一种很有前景的样品前处理方法。

柱后衍生-离子对反相高效液相色谱法测定不同基质中亚硫酸盐

应用离子对反相高效液相色谱法测定了不同基质样品中亚硫酸盐的含量。不同样品中的亚硫酸根先后用稀盐酸及山梨醇的混合溶液和乙酸钠及山梨醇的混合溶液提取，并离心分离，所得上清液中的亚硫酸根与甲醛反应生成羟甲基磺酸盐（HMS）而使之固定。用VenusilMPC18柱作固定相，并用三乙基辛烷膦酸铵（pH5．O）溶液与甲醇以9比1（体积比）混合所得溶液作流动相对试液进行离子对色谱分离。在柱后衍生系统中，分出的HMs先与氢氧化钾作用而重新释出亚硫酸根阴离子，再与5，5-二巯基-2，2-二硝基苯甲酸进行衍生反应，生成5-巯基-2-硝基-苯甲酸，对此产物在450nm波长处进行分光光度检测，方法的检出限（3S／N）为0．15mg·L-1。用标准加入法进行回收试验，测得回收率在85．9％～105．2％之间。

反相离子对高效液相色谱法分离金属配合物{Fe[3-(2-吡啶基)-5,6-二苯基-1,2,4-三嗪]_(3)}^(2+)几何异构体

采用反相离子对高效液相色谱法分离测定了金属配合物{Fe[3-(2-吡啶基)-5,6-二苯基-1,2,4-三嗪]_(3)}^(2+)([Fe(PDT)_(3)]^(2+))的两种几何异构体,研究了流动相中有机改性剂(乙腈、甲醇)的含量、不同种类和浓度的离子对试剂(高氯酸钠和十二烷基硫酸钠(SDS))对色谱分离的影响。并在不同的试验条件下,对所获得的色谱参数(保留因子(k)、分离度、选择性因子等)进行了探讨。在不同种类及浓度的离子对试剂条件下,二元流动相中乙腈的含量与两种几何异构体的lnk之间均呈显著的线性关系。研究进一步发现SDS的浓度变化对异构体的保留因子影响程度更为显著。在上述实验的基础上,引入更能灵活调节洗脱强度和分离度的三元流动相(乙腈/甲醇/水),优化选择了三元流动相中有机改性剂的比例以及离子对试剂的种类和浓度,使得异构体的色谱分离得到了满意的结果。实验结果表明,异构体的峰面积(A)和浓度(C)之间的线性关系良好,面式和经式异构体的检测限分别为4.28和3.44ng/mL(S/N=3)。

离子对-反相高效液相色谱法测定布洛伪麻分散片的溶出度

目的:建立离子对-反相高效液相色谱法(IP-RPHPLC)测定布洛伪麻分散片溶出度的方法。方法:采用溶出度第三法(小杯法),以醋酸盐冲液(pH=7.2)为溶出介质。色谱柱为KromasilC18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为醋酸-醋酸钠缓冲液-乙腈(4∶6),每1000mL流动相溶解十二烷基硫酸钠1.0g;检测波长为257nm。以外标法测定布洛伪麻分散片溶出液中布洛芬和盐酸伪麻黄碱的浓度,并计算相应时间内的累积溶出百分率。结果:布洛芬和盐酸伪麻黄碱分别在0.15～1.5mg/mL和0.025～0.25mg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999和0.9993),平均回收率分别为100.1%(RSD=0.7%,n=9)和100.6%(RSD=0.8%,n=9)。结论:IP-RPHPLC法简便,重现性好。

离子对-反相高效液相色谱法测定布洛伪麻分散片的含量

目的:建立布洛伪麻分散片含量的测定方法。方法:色谱柱为KromasilC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为醋酸-醋酸钠缓冲液∶乙腈(4∶6),每1000mL流动相溶解十二烷基硫酸钠1.0g;检测波长为257nm。结果:布洛芬和盐酸伪麻黄碱含量测定的线性范围分别为0.8～8mg/mL(r=0.9998)和0.12～1.2mg/mL(r=0.9999),平均回收率分别为101.7%(RSD=0.53%,n=9)和100.2%(RSD=0.8%,n=9)。结论:该方法简便、重现性好,适用于布洛伪麻分散片的质量控制。

反相离子对高效液相色谱法测定水中NO_2^--N与NO_3^--N含量

目的:采用反相离子对高效液相色谱法测定水中NO2--N与NO3--N含量。方法:选择四丁基溴化铵(TBA.B r)为离子对试剂,与亚硝酸根、硝酸根阴离子形成中性缔合物,在甲醇-1.25 mmol/L混合磷酸盐流动相中,被非极性键合相柱(ODS)分离并定量检出。结果:本法测定波长为220 nm,亚硝酸盐、硝酸盐在0.01~60.00 mg/L范围内成线性关系,相关系数大于0.9998,检出限为0.003 mg/L,测定下限为0.01 mg/L,两者的相对标准差小于3.11%,回收率在95.7%~105.9%之间,水中常见的9种阴离子不构成干扰。结论:本方法准确、灵敏,操作简便,耗时短,很适用于水质测定。

离子对-反相高效液相色谱法测定人胎盘和羊水中利凡诺

目的:运用离子对-反相高效液相色谱法测定人胎盘和羊水中利凡诺的含量。方法:采用 Spherisorb C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;流动相:甲醇-乙腈-0.05%十二烷基磺酸钠溶液(35:35:30,pH=3);流速:1.0 mL·min^(-1);荧光检测器:激发波长360 nm,发射波长505 nm。结果:人胎盘、羊水样品分别在10 ng·g^(-1)～1μg·g^(-1)、10 ng·mL^(-1)～1μg·mL^(-1)浓度范围内,均呈现良好线性,检测限分别为3 ng·g^(-1)、3 ng·mL^(-1),准确度和精密度好。结论:本方法操作简便,结果准确可靠。

复合离子液体修饰硅胶嵌套海绵材料固相萃取-超高效液相色谱法测定环境水中黄曲霉毒素B1的含量

将功能化离子液体制备的复合离子液体用于修饰硅胶嵌套海绵材料,采用场发射扫描电子显微镜和傅里叶变换红外光谱仪对该复合材料的性能进行表征。将复合材料装填于一次性使用无菌注射器制备固相萃取柱,并考察了其吸附容量。水样经除杂、过滤后,取续滤液1.5 L,以3 mL·min^(-1)流量过上述制备好的固相萃取柱,用5 mL水淋洗,3 mL体积比1∶5的丙酮-2 mol·L^(-1)盐酸溶液的混合液洗脱,收集洗脱液,过0.45μm有机系滤膜,滤液按照色谱条件测定。以Eclipse Plus C18色谱柱作固定相,体积比68∶32的水和体积比1∶1的乙腈-甲醇溶液的混合溶液作流动相进行等度洗脱,荧光检测器测定黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量。结果显示:合成的复合材料中具有六圆环网状结构的海绵骨架和离子液体修饰的硅胶大颗粒物质相互嵌套,形成了类似于钢筋混凝土的结构,兼具离子液体的良好选择性和海绵的机械柔性;制备的固相萃取柱对AFB1的吸附容量为26.48 mg·g^(-1),显著高于文献报道的用于吸附黄曲霉毒素吸附材料的(0.460~4.289 mg·g^(-1));AFB1的质量浓度在0.1~40μg·L^(-1)内和峰面积呈线性关系,测定下限为0.2 ng·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,回收率为75.2%~95.3%,测定值的相对标准偏差(n=6)为6.9%~8.4%。

柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量及营养价值评价

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以0.1 mol/L无水乙酸钠-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长为254 nm,测定氨基酸含量;通过氨基酸比值、氨基酸比值系数、氨基酸比值系数分等评价其营养价值,并采用系统聚类和主成分分析对其进行分类分析。结果表明,15种氨基酸线性关系良好,相关系数r≥0.9996。16份巴戟天氨基酸总含量为17.87~102.15 mg/g,均检测到15种氨基酸,其中包含6种必需氨基酸,占总氨基酸含量的14.15%~32.06%;8种药用氨基酸,占总氨基酸含量的45.20%~56.31%。限制氨基酸为苏氨酸和亮氨酸,氨基酸比值系数分为33.87~61.31。不同巴戟天样品氨基酸组成相关性显著;主成分分析提取2个主成分,累计方差贡献率为97.085%,可将16批巴戟天分为三类。该实验测定方法简单有效,可同时分离测定15种氨基酸,精密度与重复性良好,有较高的药用价值,可为巴戟天的品质分析和资源开发利用提供参考。

离子对反相高效液相色谱法考察糖浆口服液中核黄素-5-磷酸钠稳定性

建立了离子对反相高效液相色谱分析方法考察复方制剂诺平糖浆口服液的稳定性。以核黄素-5-磷酸钠为指标组分,采用 Hypersil C_(18)色谱柱,流动相为:0.01mol/L K_2HPO_4(含50mmol/L PIC-B_7):乙腈(90:10),检测波长为254um,流速:1.0mL/min。结果表明,核黄素-5-磷酸钠在8.0～320μg/mL范围内呈良好的线性,降解产物不干扰测定;方法准确、灵敏、操作简单、重现性好,可对复方制剂中核黄素-5-磷酸钠的降解产物进行有效监控。

反相高效液相色谱法测定食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量的研究

分析和探讨反相高效液相色谱法在食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量测定中的应用。利用反相高效液相色谱法对食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量及回收率进行检测,分析其精密度和准确度。经过氨水溶液的提取,样品通过C18反相色谱柱进行分离。使用磷酸氢二钾(0.2%)-甲醇为流动相,以恒定比例进行洗脱。通过在280nm的波长下进行检测,并通过外标法进行定量分析。结果表明:食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙的添加量为3000~5000μg/g时,加标回收率为96.65%~98.65%。本方法操作简便、准确、回收率高,重复性好,验证了方法的合理性,为食品复配营养强化剂中6S-5-甲基四氢叶酸钙含量测定提供科学参考。

离子对反相高效液相色谱法测定7-氨基头孢菌烷酸及7-氨基头孢烯三嗪酸的含量

目的:用离子对反相高效液相色谱法测定7-氨基头孢菌烷酸及7-氨基头孢烯三嗪酸的含量。方法:用磷酸氢二钠试剂,在 C_(18)色谱柱上测定7-氨基头孢菌烷酸原料及7-氨基头孢烯三嗪酸中间体的含量。流动相为乙腈-PH5.5磷酸盐缓冲液(3:22),检测波长263nm。结果:7-氨基头孢菌烷酸浓度在9.36—234μg/mL,7-氨基头孢烯三嗪酸浓度在10.4—260μg/mL 的范围均存在的线性良好关系,回收率分别在99.7%～99.9%、99.5%～99.8%。结论:本方法测定速度快,用样量少,结果准确,重现性好。

高效液相色谱法测定β-内酰胺抗生素中残留乙酸的含量

目的建立测定β-内酰胺类抗生素原料中乙酸残留量的HPLC方法。方法采用多因素组内设计方法,确定色谱流动相的组成、比例和pH值。参考ICH Q2,从专属性、检出限和定量限、线性、准确度、精密度和耐用性等6个方面对方法进行验证。用所建立的方法对19种β-内酰胺类抗生素原料进行了测定。结果采用C_(18)色谱柱,流动相:甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾,梯度洗脱;柱温25℃;检测波长220 nm。供试品、溶剂和流动相对乙酸测定没有明显干扰;乙酸的最低检出限约为0.029μg,最低定量限约0.12μg;从定量限到限度2倍浓度范围内,方法的线性关系良好,拟合直线方程为y=388866.7186x-177.5720,r2=0.9999;低中高浓度加样回收率平均分别为93%,96%和99%;方法的重复性和中间精密度分别为2.37%和2.11%;在3根不同C_(18)色谱柱上的耐用性良好。19种β-内酰胺抗生素原料中有3种筛查出残留乙酸。结论所建方法可以实现对β-内酰胺类抗生素原料中残留乙酸的准确定量,为该类原料的生产过程控制和标准物质研制提供了依据。

基于反相高效液相色谱法的面团黏性与小麦醇溶蛋白组成关系研究

以74份不同黏性等级的小麦品种(系)为研究材料,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离不同黏性小麦品种的醇溶蛋白特征图谱,并进行面团黏性、醇溶蛋白组分含量与小麦面粉品质性状的相关性分析,以期建立采用少样本量快速准确识别面团黏性的方法。结果表明,经RP-HPLC分离后,ω-、α/β-和γ-醇溶蛋白3个组分在图谱上清晰可见;不同黏性等级小麦材料的醇溶蛋白得到了不同的特征图谱,黏性较大的小麦ω-醇溶蛋白的组分峰数较多,总峰面积较大;ω-醇溶蛋白在不同黏性等级小麦材料间存在显著差异。相关性分析结果表明,面团黏性与ω-醇溶蛋白相对含量呈极显著正相关,与α/β-和γ-醇溶蛋白相对含量相关性不显著;ω-醇溶蛋白相对含量与沉淀值、形成时间、稳定时间、能量、拉伸阻力和最大拉伸阻力均呈极显著负相关,与蛋白质、湿面筋含量均呈显著正相关,与弱化度呈极显著正相关;ɑ/β-醇溶蛋白相对含量与蛋白质、湿面筋含量均呈极显著正相关;γ-醇溶蛋白相对含量与小麦各品质性状均无显著相关性。可见,面团黏性主要与ω-醇溶蛋白相对含量有关,ω-醇溶蛋白对面团质量有弱化作用。

高效液相色谱法测定化妆品中苯氧乙醇、4-羟基苯甲酸甲酯和4-羟基苯甲酸丙酯

目的建立化妆品中苯氧乙醇、4-羟基苯甲酸甲酯和4-羟基苯甲酸丙酯的高效液相色谱测定法。方法样品经甲醇超声提取,0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤,使用ZORBAX SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,甲醇、乙腈和0.02 mol/L乙酸铵(pH=4.0)为流动相梯度洗脱,通过二极管阵列检测器进行检测。结果苯氧乙醇、4-羟基苯甲酸甲酯和4-羟基苯甲酸丙酯分别在242~20000 mg/kg、14.6~4000 mg/kg和6.6~4000 mg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,回收率为90.4%~104%,日内、日间精密度小于9.2%,方法应用于化妆品中防腐剂含量测定能力验证实验并获得满意结果。结论该方法简便、快速、准确、稳定,适用于同时定量测定化妆品中的苯氧乙醇、4-羟基苯甲酸甲酯和4-羟基苯甲酸丙酯含量。

离子对-反相高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星胶囊的含量

目的:研究盐酸左氧氟沙星胶囊的离子对-反相高效液相色谱测定法。方法:以AlltimaC184.6mm×150mm5μm为分析柱,以0.1mol/L醋酸钠溶液内含0.005mol/L四丁基溴化铵,用冰醋酸调pH至4.0-甲醇55∶45为流动相,流速为1.0mL/min,紫外检测波长为294nm。结果:盐酸左氧氟沙星浓度在6～32μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.9999,平均回收率为99.8%,RSD=0.5%n=5,日内、日间误差RSD分别为0.6%n=5和1.0%n=4。结论:方法快速、简便、准确,可用于该制剂的稳定性考察及成品质量控制。