端粒酶反转录功能区基因的表达和纯化

通过PCR技术扩增出hTRT的目的片段,克隆至表达载体pET28 b中并转化至BL21(DE3),经IPTG诱导后在52kDa处发现有外源基因的表达,密度扫描显示表达蛋白含量为20%。目标蛋白以包含体形式存在,含8mol/L尿素和10mmol/LDTT的裂解缓冲液溶解的包含体采用金属螯合层析有效分离出目标蛋白。免疫印迹实验表明:诱导出的融合蛋白是端粒酶反转录功能区基因所编码的蛋白质。