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刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达
被引量:
3
1
作者
黄敏君
薛峰
+3 位作者
洪彩玲
孙岚
甘绍伯
谷俊朝
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2013年第12期1093-1095,1112,共4页
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)...
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
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关键词
刚地弓形虫
致密颗粒蛋白GRA2
反转录基因克隆
原核表达
原文传递
弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达
被引量:
2
2
作者
洪彩玲
薛峰
+2 位作者
黄敏君
甘绍伯
谷俊朝
《中国热带医学》
CAS
2013年第9期1045-1047,1050,共4页
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)的全长基因,在大肠杆菌工程菌中重组表达GST-His-GRA7融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA7基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pL...
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)的全长基因,在大肠杆菌工程菌中重组表达GST-His-GRA7融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA7基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后采用SDS-PAGE和West ern blotting鉴定重组蛋白产物。结果构建了弓形虫GRA7全基因的重组表达质粒,诱导表达了GST-His-GRA7融合重组蛋白,分子量为62kD,与预测结果相符。结论研究获得了弓形虫GRA7全基因的重组蛋白,为进一步研究弓形虫GRA7抗原性及其与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
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关键词
刚地弓形虫
致密颗粒蛋白GRA7
反转录基因克隆
原核重组表达
原文传递
题名
刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达
被引量:
3
1
作者
黄敏君
薛峰
洪彩玲
孙岚
甘绍伯
谷俊朝
机构
首都医科大学附属北京友谊医院
热带病防治研究北京市重点实验室
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2013年第12期1093-1095,1112,共4页
基金
国家自然科学基金项目(No.81071375,81301404)
北京市自然科学基金项目(No.7132042)
+1 种基金
首都医科大学基础-临床科研合作基金项目(No.13JL16)
首都医科大学附属北京友谊医院科研启动基金项目(No.2011_30yykyqd)
文摘
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
关键词
刚地弓形虫
致密颗粒蛋白GRA2
反转录基因克隆
原核表达
Keywords
Toxoplasma gondii
GRA2gene
RT-PCR gene cloning
prokaryotic expression
分类号
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达
被引量:
2
2
作者
洪彩玲
薛峰
黄敏君
甘绍伯
谷俊朝
机构
首都医科大学附属北京友谊医院
首都医科大学附属北京友谊医院
出处
《中国热带医学》
CAS
2013年第9期1045-1047,1050,共4页
基金
国家自然科学基金面上项目(No.81071375)
北京市自然科学基金面上项目(No.7132042)
+1 种基金
首都医科大学基础-临床科研合作基金项目(No.13JL16)
首都医科大学附属北京友谊医院科研启动基金项目(No.2011_30yykyqd)
文摘
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)的全长基因,在大肠杆菌工程菌中重组表达GST-His-GRA7融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA7基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后采用SDS-PAGE和West ern blotting鉴定重组蛋白产物。结果构建了弓形虫GRA7全基因的重组表达质粒,诱导表达了GST-His-GRA7融合重组蛋白,分子量为62kD,与预测结果相符。结论研究获得了弓形虫GRA7全基因的重组蛋白,为进一步研究弓形虫GRA7抗原性及其与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
关键词
刚地弓形虫
致密颗粒蛋白GRA7
反转录基因克隆
原核重组表达
Keywords
Toxoplasma gondii
GRA7gene
RT-PCR gene cloning
Prokaryotic expression
分类号
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达
黄敏君
薛峰
洪彩玲
孙岚
甘绍伯
谷俊朝
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2013
3
原文传递
2
弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达
洪彩玲
薛峰
黄敏君
甘绍伯
谷俊朝
《中国热带医学》
CAS
2013
2
原文传递
已选择
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