外源反-10,顺-12共轭亚油酸对体外培养牛乳腺上皮细胞SREBP-1基因表达和蛋白质合成的影响

【目的】旨在观察反-10,顺-12,共轭亚油酸(t10c12 CLA)对牛乳腺上皮细胞中甾醇调控元件结合蛋白(SREBP-1)基因的表达和蛋白质加工的影响。【方法】本试验使用组织块培养法获得奶牛乳腺上皮细胞,使用不同浓度t10c12 CLA处理乳腺上皮细胞后,用油红染色法检测胞质内的脂滴分布,Trizol法提取细胞总RNA,荧光定量PCR法测定相关基因的表达量,试剂盒法提取细胞总蛋白,进行Western blotting。【结果】随t10c12 CLA添加量的增加,细胞质内甘油三酯的含量逐渐降低。与对照组相比,75、112.5和150μmol.L-1 t10c12 CLA均对胞质内甘油三酯的积累有显著抑制作用(P<0.05)。t10c12 CLA的添加对SREBP-1基因和参与SREBP-1蛋白加工调节基因的表达均无显著性影响(P>0.05)。根据蛋白质电泳结果推测,t10c12 CLA对SREBP-1前体蛋白的合成并无影响,可能对SREBP-1的加工活化产生抑制作用或对其分解产生促进作用。【结论】t10c12 CLA能抑制胞质内甘油三酯的积累,对SREBP-1基因的表达、蛋白质翻译均无影响,可能影响其加工活化过程和活性蛋白的降解过程。

共轭亚麻酸的异构体-十八碳-顺8,反10,顺12-三烯酸中的反-10,顺-12二烯体并不具有降低体脂的特性

共轭亚麻酸(CLNA)是一组包含多种位置和构象的顺式和反式异构体。本试验旨在研究高脂肪日粮条件下,十八碳-顺8,反10,顺12-三烯酸作为CLNA的一种异构体在降低老鼠体脂和激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα和PPARγ)的潜能。研究结果表明,CLNA并不改变脂肪组织重量,也不影响脂蛋白酯酶、乙酰基辅酶A氧化酶和肉碱棕榈-Ⅰa的基因表达,但降低了PPARα和PPARγ的表达,且CLNA并不能够激活这些转录因子。因此,尽管十八碳三烯酸中存在二烯体反-10,顺-12,但它并不具有降低体脂的特性,有可能是因为第一个顺式双键位于第八碳原子上。而且不像CLNA的其他异构体,比如石榴油酸和α-桐酸,十八碳-顺8,反10,顺12-三烯酸并不能够激活PPARα和PPARγ。

含油酸培养基培养对重组解脂耶氏酵母全细胞催化合成反10,顺12-共轭亚油酸的影响

亚油酸异构酶(PAI)在解脂耶氏酵母细胞内成功表达,以添加外源c9,c12-亚油酸(c9,c12-LA)为底物,全细胞催化合成反10,顺12-共轭亚油酸(trans10,cis12-conjugated linoleic acid,t10,c12-CLA)。解脂耶氏酵母在分别含0.0(对照组)、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 g/L油酸的培养基中生长,收集菌体转移至磷酸盐缓液中进行全细胞催化,比较各组菌体的t10,c12-CLA产率,含5.0 g/L油酸组产物产率最高,达到1.34 g/g,是不含油酸组的1.4倍左右。通过PAI酶活分析及Western blot检测PAI表达量,结果表明,培养基中油酸含量越高,重组解脂耶氏酵母的PAI表达量越低;对比不含油酸组和含5.0 g/L油酸组全细胞催化不同时间的t10,c12-CLA产量,含5.0 g/L油酸组t10,c12-CLA产量最高点的时间比不含油酸组提前约20 h;透射电子显微镜观察2组的菌体状态,含5.0 g/L油酸组细胞壁和细胞膜间隙扩大,该变化可能增加了全细胞催化过程中底物和产物进出细胞的速率,从而提高t10,c12-CLA的转化效率。

云杉球果小卷蛾对性信息素的林间反应试验研究

在分析和鉴定我国云杉球果小卷蛾种群性信息素的基础上,利用林间生测技术,对其可能的人工合成性信息素的生物活性进行了研究。结果表明:我国云杉球果小卷蛾种群性信息素的组分与瑞典种群不同,其性信息素组分仅为单一的组分反,顺-8,10-十二碳烯醇乙酸酯,而瑞典的种群是反8,反10-十二碳烯醇乙酸酯和反8,顺10-十二碳烯醇乙酸酯;具有触角电位活性的十二碳烯醇两种不同异构体在林间没有生物活性,不是其性信息素的组分。建议进一步开展应用技术研究,为其综合治理应用奠定基础。

蜂王浆中脂肪酸标志物检测方法的研究进展

蜂王浆是青年工蜂咽下腺和上颚腺分泌的乳白色、淡黄色或浅橙色浆状物质,脂肪酸是蜂王浆的主要活性成分之一,主要包括反式-10-羟基-2-癸烯酸、10-羟基癸酸、3,10-二羟基-癸酸、8-羟基辛酸、癸二酸等,具有抗炎、抗菌和抗肿瘤等多种生物活性。在国家标准中,蜂王浆脂肪酸是评价蜂王浆质量的重要指标,因此脂肪酸的检测对蜂王浆的质量控制具有十分重要的作用。本文综述了目前蜂王浆脂肪酸的检测方法,简要介绍了检测方法的基本原理,同时对不同检测技术和应用特点进行比较,并对今后检测发展的趋势进行了探讨,为进一步开发高效的脂肪酸检测方法及蜂王浆的质量控制提供一定的理论参考。

大豆油对瘤胃培养液中共轭亚油酸及氢化中间产物累积规律的影响

试验采用批次培养法研究了体外条件下添加大豆油对山羊瘤胃培养液中共轭亚油酸及氢化中间产物累积规律的影响,大豆油的添加量为0和100 mg/瓶。结果表明大豆油组cis-9,trans-11 CLA含量始终显著高于对照组(P<0.05),且在培养8 h时含量达到最高,为6.05 mg/g干物质;大豆油组trans-10,cis-12 CLA含量显著高于对照组(P<0.05),其含量随培养时间的延长而逐渐升高;在培养16 h时,大豆油组总共轭亚油酸含量达到最大,为11.61 mg/g干物质;大豆油组的trans-10C18∶1和trans-11C18∶1含量显著高于对照组(P<0.05),在培养过程中,二者含量始终增加。大豆油组总反式C18∶1脂肪酸含量随着培养时间的延长而逐渐增加,而总顺式C18∶1脂肪酸含量随着培养时间的延长而逐渐下降。

氮源对解脂耶氏酵母合成共轭亚油酸的影响

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株合成反-10,顺-12-共轭亚油酸的产量,以YNBDSa为发酵培养基进行摇瓶发酵,研究氮限制策略及氮源种类对菌株合成脂肪酶Lip2、亚油酸异构酶PAI及反-10,顺-12-共轭亚油酸产量的影响。结果表明:高氮培养基更利于菌体生长以及产物的合成,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量达到4.3 g/L,是低氮培养基对应结果的8.6倍;采用有机氮为氮源时,Lip2酶活及PAI表达量显著高于无机氮的结果,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量最高达到4.6 g/L,是无机氮结果的46倍。

外源底物亚油酸对解脂耶氏酵母重组菌株合成共轭亚油酸的影响

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株的反-10,顺-12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)产量,采用YNBDL培养基进行摇瓶发酵,考察了在培养基中添加不同纯度的亚油酸对解脂耶氏酵母合成t10,c12-CLA的影响。结果表明:亚油酸纯度的提高对菌株的生长和产脂未产生影响,且t10,c12-CLA的产量随亚油酸纯度的增加而提高,最高产量可达3.7 g/L;用大豆油替代培养基中的亚油酸,t10,c12-CLA的转化率从20%提高至25%,菌株生长、产脂及t10,c12-CLA产量与添加纯度为65%亚油酸的结果相近。实验证明解脂耶氏酵母重组菌株能够高效转化富含亚油酸的植物油合成t10,c12-CLA。

中药敷贴对哮喘豚鼠肺组织IL-5 mRNA和IL-10 mRNA表达的影响

目的:探讨中药敷贴治疗哮喘的作用机制。方法:45只豚鼠随机分为正常组、模型组、对照组、治疗组,采用卵白蛋白复制豚鼠哮喘模型。治疗组诱喘后用中药敷贴30min,对照组采用0.9%氯化钠注射液浸润纱布敷贴30min,隔日1次。比较各组豚鼠诱喘潜伏期,及肺组织IL-5mRNA、IL-10mRNA表达的变化。结果:治疗组治疗后豚鼠诱喘潜伏期显著延长(P<0.05),肺组织IL-5mRNA表达下调(P<0.05),IL-10mRNA表达上调(P<0.05)。结论:中药敷贴能够通过调节细胞因子IL-5mRNA、IL-10mRNA的表达以治疗哮喘。

过瘤胃保护共轭亚油酸对妊娠后期及泌乳早期奶牛乳成分、乳产量、血液代谢和肝脏基因表达的影响

共轭亚油酸（CLA）是一类含有共轭双键的十八碳二烯酸所有异构体的统称。本试验旨在研究日粮中添加CLA是否会影响泌乳早期奶牛的乳成分及相关代谢参数。选取饲喂CLA的初产奶牛（试验组）和未饲喂CLA的初产奶牛（处理组）各5头。2周预饲期间CLA的添加量为7.5g/d（50%顺-9,反-11CLA和50%反-10,顺-12 CLA）。试验期（1~28 d）CLA的添加量为20 g/d。试验中奶牛CLA的摄入量仅为添加量的61.5%,试验组奶牛乳脂中出现添加的CLA,处理组奶牛乳脂中顺-9,反-11 CLA和反-10,顺-12CLA的含量高于对照组,且处理组奶牛乳脂中饱和脂肪酸的含量有所降低,单不饱和脂肪酸和反式脂肪酸的含量升高。添加顺-9,-反11 CLA和反-10,顺-12 CLA对乳产量、乳成分及血液代谢指标无显著影响;添加CLA不会影响过氧化物酶体受体蛋白PPARα、PPARγ的表达,但可抑制固醇调节蛋白和肝脏组织中肿瘤坏死因子α的表达。试验结果表明,产犊后1周饲喂顺-9,反-11 CLA和反-10,顺-12CLA不会影响血液代谢指标和乳成分;添加CLA会改变乳中脂肪酸的成分（尤其是外源脂肪酸异构体的含量升高）,乳脂中高含量的长链脂肪酸说明泌乳早期添加CLA不会引起脂肪肝的发生。

棉大卷叶螟求偶行为节律和性信息素鉴定

【目的】观察棉大卷叶螟Sylepta derogata雌蛾的求偶行为及其动态节律,并鉴定该虫的性信息素组分,为开发该虫的性诱剂并应用于种群测报和绿色防控提供依据。【方法】将棉大卷叶螟处女雌蛾单头放入塑料杯中,从暗期开始前0.5 h到暗期结束后0.5 h,每隔0.5 h观察并记录1次雌蛾的求偶情况;在棉大卷叶螟雌蛾求偶高峰期采用正己烷作为溶剂对雌蛾性信息素腺体进行浸提;利用气相色谱-触角电位联用仪(GC-EAD)确定性信息素腺体浸提液中活性组分所对应的色谱峰;利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)获得性腺浸提液中活性组分的化学结构信息。【结果】棉大卷叶螟雌蛾求偶高峰期在暗期4-7.5 h之间,3-4日龄雌蛾求偶行为最为活跃;求偶时触角左右摆动,双翅快速振动,产卵器持续外伸。GC-EAD分析结果表明,雌蛾性信息素腺体浸提液中有两种组分可引起雄蛾较强的EAG反应;GC-MS分析结果表明,其中含量较高的组分为双键位于第10和12位的十六碳烯不饱和醛(10,12-16∶Ald),通过比对性信息素浸提液与含10,12-16∶Ald 4种同分异构体的标准品混合溶液的GC分析图谱进一步确定为E10,Z12-16∶Ald。进一步的触角电位测定结果显示雄蛾触角对E10,Z12-16∶Ald有显著的电位反应,且呈现一定的剂量效应。【结论】棉大卷叶螟3-4日龄雌蛾求偶最为活跃,求偶高峰期为暗期4-7.5 h之间,推测性信息素主组分为E10,Z12-16∶Ald,有待田间诱捕试验进行验证。

蜂王酸及其人工合成进展

１０羟基－反－２－癸烯酸是蜂王浆中特有成分，具有高度牛物活性。本文介绍了对蜂王酸的认识过程及其人工合成进展。

珍珠峰皇浆质量控制方法研究

介绍采用薄层层析法对珍珠蜂皇浆中的主要成份反式－10－羟基－2－癸烯酸进行鉴别。同时，采用直接滴定法对制剂进行总氮量的测定。该方法简便，结果难确，经统计学分析，与药典方法无显著性差异（P＞0．05），可作为该制剂的质量控制方法。