针对Survivin基因的短发卡RNA诱导U251细胞凋亡

目的:观察针对Survivin基因的短发卡RNA(shRNA)对人脑胶质母细胞瘤U251细胞在体外凋亡的影响。方法:对U251细胞,稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞,以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞,分别采用相差显微镜、HE染色、Hoechst染色、TUNEL染色以及透射电镜观察各组细胞的形态学特征;采用流式细胞术(FCM)定量测定各组细胞的凋亡细胞数量。结果:相差显微镜、HE染色、Hoechst染色、TUNEL染色以及透射电镜观察显示,U251-SR凋亡细胞明显增多,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变;FCM定量分析凋亡细胞数量显示,与U251(2.1%)和U251-P(2.7%)相比,U251-SR凋亡细胞增加约6倍,达14.4%。结论:针对Survivin基因的shRNA能够在体外诱导U251细胞发生大量凋亡。

短发卡RNA特异性抑制Survivin基因在U251细胞中的表达

目的构建针对人Survivin基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其在人脑胶质母细胞瘤U251细胞中对Survivin基因表达的抑制作用。方法根据SurvivincDNA编码序列,设计并合成针对Survivin基因的特异性RNA干涉片断,将其克隆入pWH1质粒载体,构建Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1SR。通过脂质体介导将pWH1SR载体和空载体pWH1分别转染入U251细胞,经G418筛选,建立稳定转染的细胞系U251SR和U251P。采用RTPCR、Westernblot和免疫组化方法检测SurvivinmRNA和蛋白在U251、U251P和U251SR细胞中的表达水平。结果成功构建了Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1SR,经酶切鉴定证实克隆正确。获得了稳定转染pWH1SR载体和空载体pWH1的细胞系U251SR和U251P。U251SR细胞SurvivinmRNA和蛋白表达均受到明显抑制,抑制率分别达87%和91%;U251P细胞Survivin基因表达水平无明显变化。结论特异性shRNA能够明显抑制Survivin基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究Survivin在U251细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。

COS-7细胞中小发卡RNA介导的RNA干涉

利用U6启动子转录小发卡RNA介导的RNA干涉是最近发展起来的在哺乳动物细胞中特异性抑制指定基因表达的新技术 ,已有实验证明它在小鼠畸胎瘤P19等细胞系中具有强烈的抑制基因表达的作用。本文对COS 7细胞系中U6启动子转录GFP基因的小发卡RNA介导的RNA干涉现象进行了研究 ,结果表明 :U6启动子转录的小发卡RNA具有RNA干涉作用 ,即可以在COS 7细胞中特异性地抑制含有对应序列的基因GFP的表达 ,这一结果为今后在COS 7细胞系中利用RNA干涉技术研究目的基因的功能奠定了基础。

短发卡RNA抑制survivin表达并诱导CNE-2细胞凋亡

目的观察以短发卡RNA(shRNA)抑制鼻咽癌细胞survivin表达对细胞凋亡与增殖的影响。方法构建特异性survivin shRNA,转染CNE-2细胞。分组:A组为空白对照组;B组为阴性干扰组,转染pSIREN-survivin/nonsenseshRNA;C组为阳性干扰24h组,转染pSIREN-survivin/shRNA;D组为阳性干扰48h组,转染pSIREN-survivin/shRNA。以RT-PCR、Western-blot分别测定细胞survivin mRNA及蛋白,PI、TUNEL及MTT检测细胞周期、凋亡率、细胞增殖。结果转染效率约(70.90±4.76)%;C组survivin mRNA和蛋白抑制率分别为(41.58±0.63)%、(68.29±0.52)%;D组抑制率分别为(63.64±0.96)%、(70.83±0.48)%。C组凋亡率为(36.24±0.78)%,D组为(50.37±0.85)%,显著高于B组和A组;S期细胞减少,G2/M期比例增高;MTT结果提示细胞增殖受到明显抑制。结论特异性shRNA可有效干扰CNE-2内survivin的表达,诱导细胞凋亡并抑制其过度增殖。

干扰转酮醇酶的短发卡RNA表达载体的构建与筛选

目的筛选出干扰小鼠转酮醇酶(TK)的短发卡RNA(shRNA)表达载体。方法针对TK基因序列设计4条TK干扰序列:hMGFP-shRNA1、hMGFP-shRNA2、hMGFP-shRNA3、hMGFP-shRNA4,PstⅠ酶切鉴定其序列。然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6,用逆转录-聚合酶链式反应和酶活性方法检测转染TKshRNA后Hepa1-6细胞内TK mRNA和蛋白表达变化。结果经酶切凝胶电泳证实shRNA载体构建正确,质粒筛选实验表明hMGFP-shRNA1质粒对TK基因的抑制作用最强。结论成功构建表达靶向TK的shRNA重组质粒载体。

新型小发卡RNA慢病毒表达载体的构建及抗乙型肝炎病毒应用评价

目的:设计用于表达新型小发卡RNA(sh RNA)的慢病毒载体,并考察其用于抗乙型肝炎病毒(HBV)的可行性。方法:对慢病毒载体骨架SapⅠ位点进行突变,并将用于表达新型sh RNA的结构亚克隆到改造后的慢病毒载体;设计靶向HBV保守序列的sh RNA并克隆到该慢病毒载体,包装含有sh RNA序列的重组慢病毒并定量,考察单个及多个sh RNA结构串联对慢病毒滴度的影响;将重组慢病毒感染HBV稳定转染肝细胞系Hep G2.CW(MOI=3),用杀稻瘟菌素筛选稳定克隆1周后,将其重新消化,并以1×105/孔接种于24孔板,于铺板96 h后取细胞上清检测HBs Ag、HBe Ag表达水平和HBV DNA的含量。结果:构建了一种用于表达新型sh RNA的慢病毒载体,并通过设计靶向HBV保守序列的sh RNA实现了HBV复制的高效抑制;发现多个sh RNA串联效果优于单个sh RNA。结论:构建的新型sh RNA慢病毒表达载体可作为防治慢性病毒感染如HBV感染的潜在有效手段之一,值得进一步研究。

靶向Survivin基因的短发卡RNA对U251细胞生长和凋亡的影响

目的观察Survivin基因特异性短发卡RNA(shRNA)对人脑胶质母细胞瘤U251细胞体外生长和细胞凋亡的影响。方法对U251细胞,稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞,以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞,分别采用细胞计数法绘制生长曲线和平板克隆形成实验观察各组细胞的体外生长情况;采用流式细胞术(FCM)定量测定各组细胞的细胞周期和凋亡细胞数量;采用HE染色、Hoechst染色和原位末端标记(TUNEL)方法观察各组细胞形态学特征。结果与U251和U251-P细胞相比,U251-SR细胞生长明显减缓(P<0.01),细胞克隆形成明显减少(P<0.01);U251-SR细胞G1期细胞增多,S期细胞减少,凋亡细胞增加至20.9%,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变。结论靶向Survivin基因的特异性shRNA能够在体外明显抑制U251细胞的生长并诱导其发生大量凋亡。

特异性抑制人骨肉瘤细胞中EAG1基因表达的短发卡RNA筛选和鉴定

目的筛选出能高效抑制骨肉瘤细胞株MG63中人EAG1（hEAG1）基因表达的短发卡RNA（shRNA）。方法根据人EAG1信使RNA（mRNA）的序列，设计合成4对不同的且能干扰hEAG1基因表达的shRNA。利用同源重组技术构建pGeneSil—hEAG1干扰载体，经酶切及测序鉴定后体外转染MG63细胞。采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白印迹法（Westernblot）分别检测hEAG1mRNA和蛋白的表达。结果成功合成4对shRNA。细胞转染结果显示48h后实验组和对照组均有强荧光表达，转染率为70％。pGeneSil—hEAG1—2组的干扰效果最为明显，hEAG1mRNA和蛋白表达较对照组明显下调，与其他组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功筛选出的shRNA可高效阻断hEAG!的表达，可能成为骨肉瘤靶向性治疗的新策略。

小发卡RNA抗呼吸道合胞病毒效应的研究

目的为从基因水平抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的复制,针对RSV的M2-2基因构建小发卡结构状RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒,在细胞水平观察shRNA对RSV复制的影响。方法将成功构建的针对RSV M2-2基因的重组质粒pshRNA8260转染HEp-2细胞,利用光镜观察pshRNA8260对RSV致HEp-2细胞病变效应(cytopathogenic effect,CPE)的影响并计算CPE抑制率,空斑形成实验检测RSV滴度变化。结果成功构建了针对人RSV M2-2基因mRNA的pshRNA8260重组质粒,研究发现pshRNA8260能明显改善RSV所致的病变效应,降低RSV在细胞内复制的病毒滴度。结论针对RSV M2-2基因的pshRNA8260重组质粒具有明显的特异性抗RSV效应的作用。

基因特异性短发卡RNA抑制缺氧再给氧人脐静脉内皮细胞的转化生长因子-β1过表达

目的构建针对人转化生长因子（TGF）-β1基因的短发卡RNA（shRNA）表达载体并检测其对缺氧再给氧（A／R）损伤后的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）株的TGF-β1基因表达的影响。方法设计、合成并构建针对TGF-β1mRNA的shRNA表达载体，选择效果好者转染HUVEC株，再进行A／R试验，用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测TGF-β1蛋白质和mRNA的表达。结果优选出的表达载体pT12抑制率达（46．4±3．7）％。接受了A／R的T、H、L及C组，TGF-B1蛋白的A值分别为0．252±0．032、0．385±0．037、0．406±0．057及0．419±0．041，高于N组（0．103±0．008，P〈0．01），转染了pT12的T组4值又显著低于H、L和C组（P〈0．01）。A／R试验后T、H、L及C组的TGF-β1mRNA转录量也多于N组（P〈0．05），T组的TGF-β1mRNA转录量低于作为对照组的H组、L及C组（P〈0．05）。结论TGF—p1基因特异性shRNA表达载体能有效地抑制A／R损伤导致的HUVEC株TGF-β1基因过度表达。

腺相关病毒介导的趋化因子受体4短发卡RNA对非小细胞肺癌裸鼠肿瘤生长的影响

目的探讨腺相关病毒介导的趋化因子受体4（CXCR4）短发卡RNA（shRNA）对非小细胞肺癌裸鼠肿瘤生长的抑制作用。方法采用腺相关病毒介导的CXCR4 shRNA抑制人非小细胞肺癌A549细胞中CXCR4的表达，采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测A549细胞中CXCR4 mRNA的表达水平；建立人非小细胞肺癌A549的裸鼠肿瘤模型，分为空病毒组和CXCR4 shRNA组，记录两组裸鼠肿瘤体积、质量、数量和生存期，计算裸鼠生存延长率和肿瘤抑制率；取死产后裸鼠肿瘤组织，采刖Western blot法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的蛋向表达水平。结果与空病毒组（1．17±0．19）比较，重组腺病毒载体感染后的A549细胞CXCR4 mRNA表达水平（0．26±0．10）显著下调，差异有统计学意义（P=0．000）。CXCR4-shRNA组裸鼠肿瘤平均体积、平均质量和平均数量，显著低于空病毒组，差异有统计学意义（P=0．000）。CXCR4-shRNA组平均生存时间显著长于空病毒组（P=0．000）；CXCR4-shRNA组的生存延迟率和肿瘤抑制率显著高于空病毒组（P均=0．000），CXCR4-shRNA组VEGF蛋白表达水平（0．28±0．05）显著低于空病毒组（1．02±0．23），差异有统计学意义（P=0．000）。结论腺相关病毒介导的CXCR4 shRNA能够抑制非小细胞肺癌裸鼠肿瘤的生长及转移。

泛素连接酶Cbl—b基因短发卡RNA慢病毒载体构建及其对A375细胞生物学行为的影响

目的 构建人泛素连接酶Cbl-b基因短发卡RNA（shRNA）重组慢病毒载体，探讨其对人黑素瘤A375细胞生物学行为的影响。方法 设计并合成3条沉默Cbl-b 基因的特异性shRNA及1条阴性对照shRNA，构建慢病毒载体。将A375细胞分成5组，即分别用3条特异性shRNA转染的CBLB-shRNA-1组、CBLB-shRNA-2组、CBLB-shRNA-3组，阴性对照组（阴性对照shRNA转染），空白对照组（转染空载体）。应用实时荧光定量PCR和Western印迹检测转染后72 h各组A375细胞沉默效率；CCK8法检测转染后24、48、72及96 h细胞增殖能力；流式细胞仪检测转染后72 h细胞凋亡情况、细胞周期，Transwell法检测转染后72 h细胞侵袭能力。结果 成功构建3条Cbl-b shRNA慢病毒载体，Western印迹示CBLB-shRNA-3蛋白沉默效率最高。CCK8检测表明，CBLB-shRNA-3组A375细胞增殖能力在转染后72 h和96 h较阴性对照组、空白对照组明显降低（均P 〈 0.01）。流式细胞仪检测示，CBLB-shRNA-3组凋亡率［（22.73 ± 6.58）%］明显高于阴性对照组［（6.08 ± 1.35）%］和空白对照组［（6.34 ± 1.07）%，均P 〈 0.01］。CBLB-shRNA-3组G1期细胞比例明显高于阴性对照组和空白对照组（P 〈 0.01），而S期细胞比例明显低于阴性对照组和空白对照组（P 〈 0.01）。Transwell检测示，阴性对照组、空白对照组和CBLB-shRNA-3组转染后72 h时穿膜细胞数分别为76.60 ± 1.82、73.20 ± 3.83、19.60 ± 1.14，差异有统计学意义（F = 794.50，P 〈 0.01）。结论 成功构建能高效沉默Cbl-b蛋白的CBLB-shRNA-3重组shRNA慢病毒载体，其可促进A375细胞凋亡，抑制A375细胞增殖、细胞周期进程和侵袭能力。

短发卡RNA抑制低氧诱导因子-1α和人端粒酶逆转录酶的表达对人脑胶质瘤细胞U251增殖及凋亡的影响

我们设计针对低氧诱导因子（HIF）-1α，hTERT的shRNA表达质粒，转染人胶质瘤细胞U251，探讨RNA干扰治疗胶质瘤的可行性。

靶向存活素基因短发卡RNA对人脑胶质母细胞瘤U251细胞在裸鼠体内生长的影响

目的观察靶向存活素基因的特异性短发卡 RNA(shRNA)对人脑胶质母细胞瘤 U251细胞裸鼠体内肿瘤生长和血管形成的影响。方法将 U251细胞、稳定转染存活素基因 shRNA 真核表达载体 pWH1-SR 的 U251细胞(U251-SR 细胞)、稳定转染空载体 pWH1的 U251细胞(U251-P 细胞),分别接种于15只裸鼠背部皮下,每组5只,观测肿瘤生长情况。采用免疫组化 SABC 方法检测存活素、增殖细胞核抗原(PCNA)以及第八因子相关抗原(FⅧRAg)在各组肿瘤标本中的表达;采用TUNEL 方法检测凋亡细胞,分别计算各组肿瘤标本的增殖指数(PJ)、凋亡指数(AI)以及微血管密度(MVD)。结果与 U251、U251-P 组相比,U251-SR 组裸鼠肿瘤形成时间延迟,肿瘤生长缓慢,肿瘤体积及重量均明显减小(P 均<0.01);肿瘤标本存活素蛋白表达明显下调;PI 和 MVD 明显减少,AI 明显升高(P 均<0.01)。结论靶向存活素基因的 shRNA 能够在裸鼠体内明显抑制 U251细胞的肿瘤生长和血管形成。

Polo-like kinase 1短发卡RNA重组腺病毒载体构建及其生物学应用

目的构建针对人类Polo-like kinase1（Plk1）基因的短发卡RNA（shRNA）真核表达载体，并进行腺病毒包被。方法设计并合成含有小发夹结构的Plk1 shRNA对应模板序列，退火并与pYr-1．1载体重组质粒；通过LR体外同源重组将pYr-1．1-Plk1—shRNA表达框构建至pAd—DEST腺病毒表达载体上；包装重组腺病毒；感染人类胰腺癌细胞BxPC-3验证干扰效率。实验分3组：对照组（Control）、空载组[rAd-增强绿色荧光蛋白（tAd—EGFP）]、实验组（rAd—shPlk1），实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot检测Plk1基因的表达，流式细胞术检测细胞周期的变化及对细胞凋亡的影响。结果腺病毒感染BxPC-3细胞后，RT-qPCR检测Plk1 mRNA表达量：对照组1．047±0．315、空载组1．121±0．199、实验组0．119±0．050；Western blot检测Plk1蛋白表达量：对照组0．760±0．088、空载组0．743±0．101、实验组0．050±0．043，实验组较对照组及空载组Plk1 mRNA和蛋白水平均明显降低（P〈0．01）。流式细胞术检测G2期细胞比例：对照组6．077±0．056、空载组6．533±1．644、实验组33．427±7．774，实验组G：期细胞数比例显著高于空载组和对照组（P〈0．01）。感染24h后实验组的细胞凋亡率明显高于空载组和对照组（P〈0．01）。结论成功构建包被有Plk1 shRNA的腺病毒表达载体，且重组腺病毒载体可以抑制Plk1基因的表达，引起细胞周期G2／M期停滞和促进细胞凋亡。

Yes相关蛋白1短发卡RNA质粒构建及其对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的用RNA干扰技术阻断人膀胱癌T24细胞中Yes相关蛋白1（YAP1）基因的表达，观察细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。方法检测人膀胱癌T24细胞中YAP1表达水平；采用真核转录质粒pGreenPuro构建针对YAP1基因的重组转染质粒。将4种不同序列的YAP1短发卡RNA（shRNA）质粒以及含与YAP1无关序列的对照质粒（YAP1 shRNA NC）分别转染T24细胞，48 h后行实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测其YAP1表达水平，筛选YAP1基因沉默效果最好的shRNA质粒干扰T24细胞；使用噻唑蓝（MTT）检测shRNA质粒对T24细胞增殖能力的影响、划痕实验检测其对迁移能力的影响、Transwell小室体外侵袭实验检测侵袭能力的影响。结果RT-qPCR检测T24细胞阳性表达YAP1基因，用Lipofectamine 2000成功将不同YAP1 shRNA质粒转染入T24细胞；RT-qPCR检测发现YAP1 shRNA3质粒沉默T24细胞YAP1表达效果最显著（抑制率为75.5%），随后用YAP1 shRNA3质粒干扰T24细胞，MTT检测结果显示转染YAP1 shRNA3质粒组T24细胞增殖能力小于空白对照组（干扰组增殖率为空白对照组的85.9%，P＝0.000）；转染YAP1 shRNA3的T24细胞迁移能力较空白对照组低[24 h平均划痕宽度分别为（218.50±3.50） μm和（86.5±4.50） μm，P＝0.003]；转染YAP1 shRNA3的T24细胞侵袭能力较空白对照组弱（穿透Transwell小室的平均细胞数62∶345，P＝0.000）。结论用RNA靶向干扰能明显降低人膀胱癌T24细胞内的YAP1基因表达，并抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用

背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并不理想。本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用。方法:构建外源基因DsRed全长载体转染HEK293细胞。针对报告基因DsRed设计4个干扰载体,一个含有3段shRNA,另外3个分别含有此3段中1段shRNA。转染293/DsRed,荧光显微镜观察基因DsRed。应用实时定量PCR(Real-timePCR)和流式细胞仪(FACS)检测4个载体对DsRed基因在mRNA及蛋白水平干扰效应。结果:4个载体对靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有干扰效应,且含有3段shRNA载体对DsRed基因干扰效率为(89±16)%,显著高于3个只含有1段shRNA载体[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差异有显著性(P<0.05)。结论:三位点shRNA干扰载体可以提高对靶基因的干扰效率。

IQ结构域的GTP酶激活蛋白1基因短发卡RNA重组质粒的构建及表达

目的构建特异性针对人IQ结构域的GTP酶激活蛋白1(IQ-domain GTPase-activating protein 1,IQGAP1)基因短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的重组质粒,检测其在人食管癌KYSE150细胞中的表达。方法以人IQGAP1 mRNA序列为靶向设计合成含有shRNA序列的寡核苷酸,克隆至真核表达载体GV102中,构建重组质粒IQGAP1-shRNA,转化DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆测序鉴定。用脂质体2000介导IQGAP1-shRNA转染KYSE150细胞作为IQGAP1-shRNA干扰组,同时设转染载体GV102为对照组,RT-PCR及Western blot法检测IQGAP1基因的干扰效果。结果经测序鉴定,重组质粒IQGAP1-shRNA构建正确。IQGAP1-shRNA干扰组及对照组转染KYSE150细胞均可见绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),两组转染效率分别为(76±5. 780)%和(83±3. 851)%。IQGAP1-shRNA干扰组IQGAP1 mRNA转录水平和蛋白表达水平与对照组比较差异均有统计学意义(P <0. 001),表达抑制率分别为(82±2. 424)%及(77±2. 791)%。结论成功构建了IQGAP1-shRNA真核表达质粒,能特异性降低食管癌KYSE150细胞中IQGAP1基因的表达,为进一步研究IQGAP1基因在食管癌中的功能及靶向治疗作用奠定了基础。

Survivin小发卡RNA增强放射线诱导的肝癌细胞凋亡

放射线诱发癌细胞凋亡是肿瘤放疗的重要机制，但癌细胞遗传背景、细胞周期、肿瘤微环境等直接影响放射敏感性[1-2]。研究发现癌细胞高表达Survivin与其放射敏感性有关，因此检测癌细胞Survivin表达有望成为预测肿瘤放射敏感性辅助指标[3]。本研究探讨Survivin表达与放射线诱导的肝癌细胞凋亡之间关系，为临床优化治疗方案提供指导。

短发卡RNA干扰乳脂球表皮生长因子-8基因慢病毒载体构建及其对乳腺癌细胞干扰的影响

目的构建乳脂球表皮生长因子-8(MFG-E8)短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,稳定转染HCC1973细胞株,检测其在乳腺癌细胞HCC1973中的干扰效率及影响。方法通过构建PLKO.1-MFG-E8重组慢病毒载体,并将包装好的重组慢病毒感染乳腺癌细胞HCC1973,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测MFG-E8基因的表达,蛋白质印迹法(Western blot)法检测MFG-E8蛋白的表达;同时采用噻唑蓝(MTT)检测细胞的增殖能力、流式细胞技术(FCM)检测细胞的周期及凋亡变化、Transwell检测细胞的侵袭迁移能力。应用SPSS 17.0统计软件进行分析。结果成功构建的PLKO.1-MFG-E8 shRNA重组慢病毒载体可明显降低MFG-E8基因和蛋白的表达;重组载体经包装产生的慢病毒滴度为3×108 PFU/ml;经shRNA干扰后的乳腺癌细胞,细胞增殖能力显著减弱(t=4.426,P<0.05),G0/G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少(t=2.264,P<0.05),细胞侵袭、迁移能力明显降低(t=4.802,P<0.05)。结论通过shRNA干扰MFG-E8基因和蛋白的表达,能有效抑制乳腺癌细胞向恶性生物学行为的改变,表明在乳腺癌发生的过程中,MFG-E8参与介导乳腺癌的侵袭转移及凋亡。