非标记型p53抑癌基因电化学DNA生物传感器的研究

基于发夹型核酸探针的高特异性识别能力以及电活性物质与DNA磷酸骨架间的静电作用,以发夹型核酸作为分子识别探针,电活性物质六氨合钌（RuHex）作为杂交指示剂,构建了一种非标记型检测p53抑癌基因的电化学DNA生物传感器。实验结果表明,在10μmol/L RuHex溶液中,该传感器对目标DNA具有灵敏的电化学响应,电化学信号与目标DNA浓度在2.5~10 nmol/L范围内呈线性关系,检出限达2.5 nmol/L。根据电化学信号的差异可区别完全互补目标DNA、单碱基突变DNA和随机DNA分子。考察了单碱基突变位点不同的目标DNA分子与发夹型核酸探针的杂交效率,结果表明突变位点不同会影响发夹型核酸探针与目标DNA的杂交效率。该传感器具有选择性好、无需标记、简单等优点。

非标记型p53抑癌基因的荧光DNA生物传感器

基于发夹型核酸探针的高特异性识别能力以及结晶紫与单、双链DNA结合后荧光强度的差异,以发夹型核酸作为探针,构建了一种非标记型检测p53抑癌基因的荧光DNA生物传感器.此传感器不但能够区分完全互补、单碱基突变和随机目标DNA序列,而且还能识别不同突变位点的单碱基突变序列.在0.05～5.00μmol/L范围内,完全互补目标DNA的浓度与体系的荧光增强效率呈线性关系,检出限为5×10-8mol/L.该方法已应用于检测正常和单碱基突变的p53基因.