基于锁核酸探针的传感器用于BCR/ABL融合基因检测的研究

依据慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因的碱基序列,设计了一种新型发夹结构锁核酸(locked nu-cleic acids,LNA)探针,将该探针借助Au—S键固定在金电极表面构建了特异的生物传感器.LNA探针与目标链DNA杂交,以本实验室合成的苯甲酸二聚铜配合物([Cu2(C7H5O2)4(C2H6O)2],简称[Cu(R)2]2+)为杂交指示剂,应用差示脉冲伏安法进行检测,表现出良好的响应信号.该新型锁核酸传感器能较好的区分完全互补链DNA、单碱基错配链DNA.互补链DNA检测的线性范围为1.0×10-8～1.0×10-6 mol.L-1,检出限2.0×10-9mol.L-1.

苯甲酸二聚铜配合物与DNA相互作用的电化学研究及应用

采用电化学法对自行合成的苯甲酸二聚铜配合物[Cu(R)2]与鲑鱼精DNA的相互作用进行了研究。配合物在0.197 V和0.162 V处有一对氧化还原峰。加入双链DNA(dsDNA)后,氧化还原峰电流明显降低且式量电位正移,说明苯甲酸二聚铜配合物与DNA以嵌入方式生成一种非电活性超分子复合物,导致苯甲酸二聚铜配合物的峰电流降低,峰电流在一定范围内与鲑鱼精dsDNA质量浓度呈线性关系,线性范围为3.0×10-2~4.5×10-3mg/L,检出限为3.5×10-4mg/L。同时,以[Cu(R)2]作杂交指示剂,把一种新型发夹结构锁核酸探针(LNA)固定在金电极表面制备了电化学生物传感器,将该修饰电极与人工合成的慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因片段进行杂交,用差示伏安法进行检测,该铜配合物能够较好地区分探针序列、单碱基错配序列和互补链序列。