SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验背景数据的建立

目的总结国家药物安全评价监测中心2013-2022年SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的正常值范围,建立SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的背景数据库,为药物胚胎-胎仔发育毒性评价提供参考。方法对本中心2013-2022年11项SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中对照组共计205只孕鼠和3037只胎鼠各项胚胎发育和胎仔生长发育指标进行统计分析,计算其平均数、标准差、变异系数和95%置信区间。指标包括孕鼠妊娠期体重和体重增长幅度、孕鼠摄食量、妊娠结局(妊娠率、平均黄体数、平均着床数、平均活胎数、活胎率、吸收胎率、死胎率)、胎仔生长发育情况(胎仔重、胎盘重、性别比)、胎仔外观异常率、内脏异常率和骨骼异常率。结果孕鼠妊娠期体重呈增长趋势,妊娠后期体重增长幅度明显增大。孕鼠摄食量随着妊娠时间的增加呈增长趋势。妊娠第20天进行剖腹产,妊娠率为93.2%,平均黄体数、着床数和活胎数分别为18.0±3.2,15.9±2.8和14.8±3.0,活胎率为93.4%,死胎率为6.6%;胎仔雄/雌性别比为0.94,平均体重为(3.6±0.3)g,胎盘平均重量为(0.6±0.3)g。胎仔外观异常发生率约为0.2%,内脏异常率约为0.8%。骨骼异常率约为1.2%,未骨化和骨化不全的发生率较高,主要发生于胸骨和舌骨等,胎仔的掌骨骨化数、跖骨骨化数和骶尾椎骨化数分别为7.0±0.7,8.0±0.1和7.4±0.5,第Ⅰ~Ⅳ胸骨骨化率较高,平均为98.6%~99.9%,第Ⅴ胸骨骨化率为(68.0±28.4)%,第Ⅵ胸骨骨化率为(82.8±23.9)%。结论初步建立了本GLP实验室SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中各指标背景数据库,为生殖毒性研究提供参考。

溴敌隆对斑马鱼胚胎/仔鱼的发育毒性效应研究

为评价第二代抗凝血类灭鼠剂溴敌隆的潜在生态毒性效应,以模式动物斑马鱼为研究对象,研究了溴敌隆对斑马鱼胚胎/仔鱼的发育毒性以及对抗氧化系统的影响。研究结果表明,当溴敌隆浓度高于0.39 mg·L^(-1)时,斑马鱼胚胎/仔鱼死亡率及畸形率显著升高,与对照组相比具有显著性差异,斑马鱼仔鱼体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量随溴敌隆浓度增大,均呈逐渐升高趋势,并在1.18 mg·L^(-1)浓度组达到最大值,具有显著差异,表明溴敌隆对斑马鱼仔鱼的抗氧化系统造成严重损伤,从而导致机体死亡。对溴敌隆暴露导致的斑马鱼胚胎/仔鱼的发育毒性以及氧化损伤的机制进行了初步探讨,为进一步研究溴敌隆对动物的发育毒性机制以及其潜在的生态危害提供了研究基础。

孕期传统和新兴真菌毒素暴露的胚胎发育毒性及其生物监测的研究现状

真菌毒素是某些真菌菌种在特定条件下产生的有毒次级代谢产物。研究发现多种真菌毒素的联合暴露可引起胎儿发育迟缓、胚胎停育甚至流产等胚胎发育毒性。目前,尚没有关于孕期真菌毒素暴露对宫内胎儿胚胎发育毒性的影响和生物监测情况的系统报道。因此,为预防和降低孕期真菌毒素暴露带来的危害,本文梳理了孕期传统真菌毒素如黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮和新兴真菌毒素如交链孢毒素、白僵菌素和恩镰孢菌素等暴露引起的胚胎发育毒性,以及以生物标志物如暴露标志物和效应标志物为基础的生物监测技术的研究现状。

基于胚胎干细胞模型的Cry1Ab蛋白发育毒性

目的:通过胚胎干细胞发育毒性评价模型研究Cry1Ab蛋白对于细胞增殖和分化能力的影响,以评估其发育毒性。方法:设置Cry1Ab蛋白7个剂量组(31.25、62.50、125.00、250.00、320.00、1 000.00、2 000.00μg/L),以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)为阳性对照,以磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS)为溶剂对照,分别处理小鼠胚胎干细胞D3(embryonic stem cell line D3,ES-D3)和小鼠成纤维细胞3T3。通过CCK-8法检测细胞活性,计算受试物对于不同细胞的增殖半抑制浓度(50%inhibition concentration of growth and viability, IC_(50))。设置Cry1Ab蛋白5个剂量组(125.00、250.00、320.00、1 000.00、2 000.00μg/L),设置溶剂对照(PBS),同时以5-FU为受试物进行模型验证,分别处理细胞后,通过拟胚胎体(embryonic bodies, EBs)培养法诱导ES-D3分化出心肌细胞;镜下观察EBs生长情况并测量其第3天和第5天的直径,观察并记录同批次EBs分化出搏动心肌细胞的比例,计算受试物的心肌分化半抑制浓度(50%inhibition concentration of differentiation, ID50),根据发育毒性判别函数对受试物的胚胎发育毒性进行分类;收集培养终点的EBs样本,进行实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative po-lymerase chain reaction, qPCR),检测心肌分化相关标志物(Oct3/4、GATA-4、Nkx2.5和β-MHC)的mRNA表达情况。结果:5-FU的IC_(50,3T3)为46.37μg/L,IC_(50,ES)为32.67μg/L,ID_(50,ES)为21.28μg/L,根据判别函数结果将5-FU分类为强胚胎毒性物质。不同浓度的Cry1Ab蛋白处理组的3T3细胞和ES-D3细胞活性与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,Cry1Ab蛋白处理组分化第3天和第5天的EBs直径差异无统计学意义(P>0.05),EBs形态也未见明显差异;不同浓度Cry1Ab蛋白处理组的心肌分化率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。5-FU使β-MHC、Nkx2.5和GATA-4的mRNA表达水平降低(P<0.05),且具有剂量依赖趋势(P<0.05),而与细胞多能性相关的标志物Oct3/4 mRNA表达水平则呈升高趋势(P<0.05);Cry1Ab蛋白处理组的成熟心肌标志物β-MHC、心肌早期分化标志物Nkx2.5和GATA-4、多能性相关标志物Oct3/4的mRNA表达水平与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:本实验模型中未观察到31.25~2 000.00μg/L的Cry1Ab蛋白具有发育毒性。

利用胚胎干细胞骨分化实验评价Cry1Ab蛋白的发育毒性

目的通过小鼠胚胎干细胞骨分化实验研究Cry1Ab蛋白对胚胎干细胞成骨分化过程的影响,以评估Cry1Ab蛋白的发育毒性。方法以Cry1Ab蛋白为受试物,设置5个剂量(125,250,320,1000,2000 ng/ml)染毒小鼠胚胎干细胞形成的拟胚胎体(embryonic body,EB),设置溶剂对照和阳性对照,同时向培养基中添加β-甘油磷酸盐(10 mmol/L)、抗坏血酸(50μg/ml)和维生素D3(500μmol/L)诱导EB向骨细胞分化,通过茜素红S染色和吸光度检测确定骨细胞钙化结节生成情况;收集EB制备细胞裂解液,通过BCA法测量细胞总蛋白浓度,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒检测细胞裂解液中ALP活性;收集EB样本提取总RNA,通过qPCR检测骨细胞分化相关标志物Runx2、SPARC和I型胶原的基因表达情况。结果与对照组相比,不同浓度Cry1Ab蛋白处理组的EB细胞团大小、钙化结节数量无统计学差异(P>0.05);Cry1Ab蛋白各浓度组的细胞总蛋白浓度和ALP活性与对照组相比无统计学差异(P>0.05);Cry1Ab蛋白各浓度组的Runx2、SPARC和I型胶原基因表达水平与对照组相比均无统计学差异(P>0.05)。结论本次试验中,未观察到Cry1Ab蛋白对小鼠胚胎干细胞成骨分化过程产生影响,125~2000 ng/ml的Cry1Ab蛋白不具有发育毒性。

麻醉剂依托咪酯诱导斑马鱼幼鱼神经发育毒性

依托咪酯(etomidate,ET)在临床上常被用作麻醉剂。ET长期高剂量地使用会导致人类意识下降和认知障碍等负面效应。但ET对鱼类的神经毒性机制尚不清楚。在本文中,2 hpf(hours post-fertilization)的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度ET(0.010、0.091、0.501、9.400、84.31和664.4μg·L^(-1))至168 hpf。通过分析ET对斑马鱼胚胎生理发育、早期行为、细胞凋亡以及多巴胺(dopamine,DA)和γ氨基丁酸(gamma aminobutyric acid,GABA)通路相关基因转录表达水平的影响,评估其对斑马鱼幼鱼神经发育毒性。结果表明,664.4μg·L^(-1)ET显著增大48 hpf和60 hpf斑马鱼胚胎孵化率。0.091μg·L^(-1)和0.501μg·L^(-1)ET诱导168 hpf幼鱼体长减少。0.010、0.091、0.501、9.400、84.31和664.4μg·L^(-1)ET增大48 hpf胚胎畸形评分。0.501、9.400、84.31和664.4μg·L^(-1)ET暴露显著增大96 hpf胚胎畸形评分。0.501、9.400和664.4μg·L^(-1)ET显著增大168 hpf胚胎畸形评分。0.010μg·L^(-1)ET促进了大脑细胞凋亡,而664.4μg·L^(-1)ET抑制了大脑细胞凋亡。行为分析显示,ET所有浓度均抑制触碰行为。0.091μg·L^(-1)ET增强幼鱼游泳行为,而664.4μg·L^(-1)ET减弱游泳行为。并且ET以浓度依赖的方式导致焦虑行为增加。qPCR分析结果表明,低浓度ET显著上调了DA和GABA通路相关基因的转录表达水平,而高浓度ET显著抑制了这些基因的转录表达水平。这些结果表明,ET对发育早期斑马鱼具有明显的神经发育毒性。

十二烷基苯磺酸钠暴露对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)胚胎发育毒性和仔鱼神经毒性的影响

该研究旨在探明十二烷基苯磺酸钠(SDBS)对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)胚胎发育毒性和仔鱼神经毒性的影响,科学评估水体中SDBS污染的环境生态风险。将受精后4 h的黄颡鱼胚胎暴露于质量浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8 mg·L^(-1)的SDBS中,观察胚胎孵化累计死亡率、畸形率;并通过检测5日龄仔鱼脑组织中乙酰胆碱酯酶活性及相关基因的转录水平、5-羟色胺及相关基因的转录水平,探讨其神经毒性的潜在机制。结果显示,与对照相比,暴露处理的黄颡鱼胚胎孵化畸形率提高4.5~14.5百分点(P<0.05),死亡率提高7.8~23.4百分点(P<0.05)。与对照相比,暴露处理正常仔鱼和畸形仔鱼的乙酰胆碱酯酶活性分别显著降低12.0%~50.5%和15.0%~53.9%(P<0.05),暴露处理仔鱼乙酰胆碱酯酶基因mRNA转录水平下降;暴露处理正常仔鱼和畸形仔鱼5-羟色胺含量分别显著降低2.6%~9.9%和3.0%~11.1%(P<0.05),暴露处理仔鱼5-羟色胺基因的转录水平降低。上述结果表明,十二烷基苯磺酸钠暴露显著提高了黄颡鱼胚胎孵化的死亡率和畸形率;SDBS通过抑制乙酰胆碱酯酶活性和5-羟色胺含量水平影响神经传导,抑制神经递质相关基因表达,从而对黄颡鱼产生胚胎发育毒性及神经毒性作用。

亲代斑马鱼暴露于BPA及其类似物对子代胚胎发育毒性的研究

目的探讨亲代斑马鱼持续暴露于双酚A(bisphenol A,BPA)及其类似物,对子代斑马鱼发育情况、行为学特征和生物钟基因表达水平的影响。方法将70条4月龄雌性斑马鱼随机分为7组(对照组、BPA、BPS和BPF浓度分别设定为0.1以及10.0μg/L暴露组),连续染毒28 d后,收集鱼卵,分析计算其子代幼鱼的死亡率、孵化率和畸形率的变化;利用体视显微镜拍摄并测量受精后72小时(hour post fertilization,hpf)幼鱼的眼睛尺寸、眼间距、体长、心率和相对血流量以及96 hpf活性氧水平;利用Zebrabox斑马鱼行为追踪分析仪记录斑马鱼幼鱼行为学活动;qPCR分析钟基因的表达水平。结果BPA、BPS和BPF暴露28 d后,与对照组相比,各染毒组的死亡率上升(P<0.05),孵化率、心率、相对血流量均降低(P<0.05),自发运动的振幅下降(P<0.05),活性氧含量及钟基因的表达水平都有所扰动。结论亲代斑马鱼暴露于BPA及其类似物可能通过钟基因的改变导致子代斑马鱼的发育异常。

兔胚胎-胎仔发育毒性实验阳性模型的建立

目的探讨兔胚胎-胎仔发育毒性实验中,经口灌胃环磷酰胺建立兔致畸实验模型的方法,为致畸实验研究提供实验室背景数据。方法取健康受孕的普通级新西兰兔66只,按动物体质量采用随机数字法分为溶酶对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)和环磷酰胺染毒组(20 mg/kg),交配成功后于孕兔GD 6~GD 18按2 mL/kg进行灌胃染毒。染毒期间观察临床表现,统计孕兔的体质量、成功受孕率、黄体数、活胎数、死胎数和吸收胎数等指标,记录胎仔的体质量、身长、外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形等指标。结果环磷酰胺组孕兔的体质量和溶酶对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);环磷酰胺组孕兔黄体数、活胎数和着床数与溶酶对照组相比均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);环磷酰胺组胎仔的重量、身长和胎盘重量与溶酶对照组相比均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);环磷酰胺组胎仔的外观、内脏和骨骼的异常发生率明显升高,与溶酶对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论环磷酰胺经口灌胃染毒,在20 mg/kg的灌胃剂量下,给药周期短,胎仔的畸形率高,畸形种类多,不引起母体毒性,可建立较好的兔胚胎-胎仔发育毒性实验模型。

三氟氯氰菊酯对鸡胚的发育毒性及雏鸡生长发育的评价

目的:探讨三氟氯氰菊酯(Lambda-cyhalothrin,LCT)对鸡胚的发育毒性及其出壳后21 d内生长发育的影响。方法:选择已孵化7胚龄的草鸡胚蛋160枚,随机分为5组,每组32枚。Ⅰ组(对照组)向每枚鸡胚的卵黄囊注射0.1 mL生理盐水,Ⅱ~Ⅴ组(处理组)分别向每枚鸡胚的卵黄囊注射0.1 mL 2.5、25、250、2500μg/mL LCT,灭菌石蜡封口,继续孵化至雏鸡出壳,期间分别测定孵化第10、18天的死胎数、生存率以及孵化率、弱雏率、出壳重与第18天胚蛋重的比值等指标;雏鸡出壳后饲喂21 d分别测定体质量、胸肌质量、腿肌质量、部分内脏器官指数、血清生化指标及肝肾氧化应激指标。结果:Ⅴ组的死胚数、死胚率、弱雏率明显高于对照组和Ⅱ~Ⅳ组;Ⅱ~Ⅳ组雏鸡21日龄的体质量、胸肌和腿肌质量低于对照组,血清CREA与UREA-N含量、AST和ALT活性,与对照组相比无显著变化;21日龄时,Ⅲ组肝组织和Ⅱ组肾组织的GSH含量明显升高(P<0.01或P<0.05),Ⅲ组肝组织MDA含量显著增加(P<0.05),各试验组肝、肾组织的SOD活性有增加趋势,但与对照组相比无显著变化(P>0.05)。结论:高剂量LCT暴露对鸡胚具有明显的发育毒性,胚胎期中低剂量LCT暴露抑制出壳后雏鸡的早期生长发育,氧化应激损伤是其毒性机制之一。

嘧菌酯与硒代蛋氨酸复合暴露对斑马鱼胚胎及仔鱼的发育毒性

为探究嘧菌酯与硒代蛋氨酸复合暴露后对水体生物早期发育的影响,采用半静态试验法,测定了等毒性配比的嘧菌酯和硒代蛋氨酸二元混合体系复合暴露对水生模式生物斑马鱼胚胎及仔鱼的发育毒性及对相关酶活性的影响。结果表明:经不同质量浓度的嘧菌酯和硒代蛋氨酸(0.1+0.2、0.25+0.5、0.5+1.0和1.0+2.0 mg/L)(其中硒代蛋氨酸按硒元素的质量计,下同)复合暴露后,胚胎出现自主运动次数减少、孵化率降低、死亡率增加及心率下降现象,同时仔鱼体长受到显著抑制,且呈现明显的时间-剂量-效应关系;与对照组相比,在嘧菌酯和硒代蛋氨酸不同质量浓度(0.0005+0.001、0.005+0.01和0.05+0.1 mg/L)复合暴露下,斑马鱼仔鱼体内过氧化氢酶(CAT)活性显著降低,且高浓度复合暴露组(0.05+0.1 mg/L)的抑制作用最显著(P<0.01),而对超氧化物歧化酶(SOD)活性则无显著影响;与对照组相比,高浓度复合暴露组显著抑制了线粒体呼吸链复合体Ⅲ的活性(P<0.05),而其余浓度复合暴露组差异不显著。研究结果表明,经嘧菌酯与硒代蛋氨酸不同质量浓度复合暴露(0.1+0.2、0.25+0.5、0.5+1.0和1.0+2.0 mg/L)后,会对斑马鱼胚胎及仔鱼发育产生毒性效应,但在目前自然水体环境实际浓度水平下,除了抑制CAT活性外,尚不会产生其他毒性效应。以上研究结果可以为水体环境中嘧菌酯和硒代蛋氨酸浓度监测及复合暴露的生态风险评估提供数据支撑。

基于C2C12细胞的2,7-二溴咔唑肌发育毒性效应

肌肉有执行机体运动和能量代谢的重要作用。据报道二噁英暴露可严重影响肌肉发育。但目前与多氯代二苯并呋喃(polychlorinated dibenzofurans,PCDFs)结构相似的卤代咔唑(polyhalogenated carbazoles,PHCZs)的肌肉发育毒性尚不明确。本研究旨在探究2,7-二溴咔唑(2,7-dibromo-9H-carbazole,27-BCZ)的肌肉发育毒性效应。应用C2C12细胞成肌分化模型,在细胞水平上通过苏木素-伊红染色法检测融合指数和单条肌管内细胞核数2个指标评价细胞形态的变化,在分子水平上通过qRT-PCR来测定肌细胞分化调节分子和分化标志物的基因表达,探究27-BCZ对肌发育的影响及其分子机制。细胞水平实验结果显示,与对照组相比,27-BCZ 10^(-7) mol·L^(-1)暴露3 d后,肌管数量减少、形态变细变短,且分布杂乱;单条肌管内细胞核数减少、参与肌管融合的细胞核比例(融合指数)降低;27-BCZ 10^(-9)~10^(-7) mol·L^(-1)暴露6 d后,虽然单条肌管内细胞核数没有显著变化,但融合指数显著降低。分子水平实验结果显示,27-BCZ 10^(-7) mol·L^(-1)在分化末期对肌纤维结构蛋白肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)的2个编码基因Myh3和Myh4的表达具有显著抑制作用。另外,27-BCZ还影响肌生成调节因子家族(myogenic regulatory factors,MRFs)基因的表达,包括显著抑制分化早期调节因子MyoD和末期调节因子Mrf4的mRNA表达,显著促进Myogenin mRNA表达。此外,27-BCZ暴露能显著促进芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)信号通路下游基因cyp1a1和cyp1b1的mRNA表达,提示27-BCZ在肌分化模型中具有类二噁英活性。总结上述结果,我们发现,在肌生成过程中,27-BCZ表现出与二噁英类似的AhR活性和肌发育干扰效应,为27-BCZ肌肉发育相关健康效应和AhR相关毒理机制研究提供了基础数据。

芩香清解口服液对4日龄大鼠的发育毒性

目的系统考察芩香清解口服液(QXQJ)对4日龄(PND_(4))大鼠生长发育的影响。方法采用交叉抚育法对PND2大鼠进行数量和性别调整,随机分为溶剂对照组及QXQJ 3.45,10.35和28.05 g·kg^(-1)组。PND_(4)起每天ig给予QXQJ,溶剂对照组给予纯水,每天1次,连续给药18 d。给药结束后恢复观察3周。实验期间对各组大鼠一般状况、体重、生长发育、体格、骨骼、血液学和凝血等指标进行检查。结果QXQJ连续给药18 d对幼龄大鼠摄食量、生长发育、神经反射、自发行为、血液学、凝血、血液生化、免疫、生长激素和组织病理等检查指标均未见明显影响。PND5起,QXQJ 10.35和28.05 g·kg^(-1)组幼龄大鼠出现黄棕色软便或稀便以及腹部膨大症状,这些症状于PND_(22)基本恢复;28.05 g·kg^(-1)组幼龄大鼠于PND7起体重、顶臀长、尾长和四肢长较溶剂对照组明显偏低(P<0.05),停药1周后恢复;28.05 g·kg^(-1)组幼龄大鼠PND_(22)骨比重和骨密度显著低于溶剂对照组(P<0.05),PND_(4)2时基本恢复。结论QXQJ可导致未断乳幼龄大鼠出现黄棕色软便或稀便及腹部膨大等消化不良症状,继而影响体格发育,停药或离乳后基本恢复;QXQJ对PND_(4)大鼠连续给药18 d发育毒性的无不良反应剂量(NOAEL)为3.45 g·kg^(-1)。

磺胺甲恶唑对斑马鱼早期生命阶段的发育毒性研究

磺胺甲恶唑(sulfamethoxazole,SMX)作为一种广谱型抗生素,由于大量使用而在各类水体中广泛存在。为研究SMX对斑马鱼(Danio rerio)早期生命阶段的发育毒性,将3 hpf(hours post fertilization,受精后小时数)内的斑马鱼胚胎在不同浓度(空白对照:0μg·L^(-1),S4:4μg·L^(-1),S40:40μg·L^(-1),S400:400μg·L^(-1))的磺胺甲恶唑溶液中暴露至120 hpf,观察统计斑马鱼胚胎的孵化率,仔鱼的死亡率、心率、体长和畸形率等发育参数,并检测斑马鱼体内生长激素(GH)、胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)含量以及GH/IGF轴相关基因转录水平的变化。结果显示,40μg·L^(-1)和400μg·L^(-1)的SMX暴露会导致斑马鱼死亡率显著升高,体长明显缩短,并且对仔鱼有明显的致畸作用(心包囊肿、脊椎弯曲和尾部畸形等)。SMX暴露对斑马鱼的孵化率未产生显著影响,但会造成胚胎/仔鱼心率下降。此外,在SMX胁迫下,仔鱼体内GH和IGF-Ⅰ水平显著升高。而基因转录分析发现,S4、S40和S400不同处理组SMX暴露下调了gh1(相对表达量:0.30倍、0.17倍和0.10倍)、ghrb(相对表达量:0.74倍、0.36倍和0.39倍)、igf1(相对表达量:0.75倍、0.23倍和0.33倍)和igf1ra(相对表达量:0.49倍、0.22倍和0.72倍)等多个GH/IGF轴相关基因的转录水平,激素水平的变化相较于基因转录水平的变化可能存在滞后性。实验结果表明,SMX暴露对斑马鱼表现出胚胎发育毒性,可能通过减缓心脏搏动以及干扰GH/IGF轴来抑制斑马鱼仔鱼的早期生长。

中药复方馥感啉口服液对不同年龄段SD大鼠发育毒性

目的采用三段式幼龄动物试验(JAS)系统考察馥感啉口服液(FGLOL)在幼龄SD大鼠长期给药后的潜在发育毒性和延迟毒性。方法第一阶段:根据1岁内婴幼儿临床拟用剂量,每天分别ig给予出生后4日龄(PND4)大鼠FGLOL 3.88,11.64和38.75 g·kg^(-1),共18 d,停药恢复3周。第二阶段:根据1~6岁儿童临床拟用剂量,分别ig给予PND15大鼠FGLOL 3.88,11.64和38.75 g·kg^(-1),共31 d,停药恢复3周。第三阶段:根据7~12岁儿童临床拟用剂量,每天分别ig给予PND40大鼠FGLOL 29.06,58.13和116.25 g·kg^(-1)共66 d,停药恢复4周。上述试验均设溶剂对照组,ig给予等体积纯水。考察FGLOL对幼龄大鼠一般状况、摄食量、体重、生长发育、神经反射发育、学习记忆功能(总运动距离,中心、角落和边缘运动距离,潜伏期,工作记忆错误和参考记忆错误)、体格发育(体长)、骨骼发育(骨密度)、血液学(白细胞数、红细胞数和血小板数)和凝血、血液生化(谷氨酸脱氢酶、尿素氮和甘油三酯)以及组织病理变化等的影响。结果三段式JAS中,ig给予FGLOL均未造成大鼠死亡。与溶剂对照组相比,FGLOL组大鼠一般状况无异常,体重、生长发育、神经反射发育、体格发育、骨骼发育、血液学和凝血、血液生化以及组织病理等变化均未见有毒理学意义差异。结论FGLOL对相当于人类<6岁年龄段幼龄大鼠的JAS试验的未见不良反应剂量(NOAEL)为38.75 g·kg^(-1),对相当于人类7~12岁年龄段幼龄大鼠JAS和重复给药毒性试验的NOAEL为116.25 g·kg^(-1)。

来曲唑对幼年动物的发育毒性及机制研究进展

第三代非甾体芳香化酶抑制剂来曲唑已被批准用于治疗乳腺癌。近年来,其被应用于儿童生长发育领域,如儿童矮小症、体质性青春期生长发育延迟及性早熟等疾病,但其对肝、肾功能,脂质代谢,生殖功能及骨代谢的长期影响尚不清楚。研究表明,来曲唑可引起睾丸形态异常、生精小管及间质组织改变;还可降低骨密度,对骨代谢的平衡造成影响。此外,还会造成认知功能损伤和神经细胞凋亡。来曲唑的生殖系统毒性机制可能与其影响睾丸细胞的发育成熟、体内性激素和促性腺激素表达以及睾丸组织中雌激素受体的表达和分布有关;骨代谢毒性机制与其增加NF-κB受体活化因子配体诱导破骨细胞增殖和分化,及增加成骨细胞凋亡、氧化应激和NF-κB活性有关;认知功能毒性机制与其调节海马经典及非经典效应、降低星形胶质细胞对谷氨酸的吸收、减少L型钙通道阻滞胱天蛋白酶3活化有关。本文以期为临床儿科安全有效地使用来曲唑提供参考。

活血消异方对子宫内膜异位症大鼠胎仔围产期发育毒性的初步研究

目的评价活血消异方对子宫内膜异位症模型大鼠胎仔—围产期发育毒性的影响。方法采用改良同种异体移植法建立子宫内膜异位症模型大鼠,设空白组、模型组及假手术组,并以低剂量(每毫升1.8 g 生药)、高剂量(每毫升3.6 g 生药)的活血消异方灌胃,妊娠第20天处死部分大鼠,观察各组胎鼠数量、体质量、身长、尾长以及畸形情况;另有部分孕鼠自然分娩后比较各组子代断乳后存活率、畸形率及离乳后子代体质量、成年后生育力等。结果孕20 d模型组大鼠平均胎鼠数量明显少于其他各组(P<0.05);活血消异方高、低剂量组平均胎鼠数明显高于模型组(P<0.05);模型组胎鼠体质量、身长、尾长与空白组、假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中药组胎鼠体质量、身长、尾长略低于空白组及模型组(P<0.05);各组胎仔骨骼均未出现缺失和畸形。离乳前各组子代大鼠体格发育正常,断乳后子代畸形率、死亡率、存活率之间无明显差异(P>0.05);中药低、高剂量组子代断乳后体质量高于空白组、假手术组、模型组(P<0.05)。结论子宫内膜异位症疾病本身对大鼠妊娠能力有一定影响,但对大鼠胎仔及围产期发育无明显毒性;活血消异方组胎鼠体质量、身长、尾长略低于空白组及模型组,可能与胎鼠数量较多有关;且中药高、低剂量组胎鼠均无外观畸形及骨骼畸形,离乳时体格发育正常,子代大鼠断乳后无明显体质量偏低,提示活血消异方对大鼠胎仔及围产期发育并无明显毒性,但仍需进一步实验验证。

氟砷染毒对大鼠生殖发育毒性的研究

为探讨氟砷染毒对生殖功能和子代发育的影响 ,采用两代一窝繁殖实验的方法 ,观察 Wistar大鼠暴露于氟 (Na F)砷 (As2 O3)后其生殖功能和子代生长发育的变化 ,以及卵巢的病理改变。结果表明 ,随着染毒剂量的增加 ,受孕率、正常分娩率、出生存活率和哺育成活率随之降低 ,如高剂量组受孕率 F0 和 F1 代分别为73.0 8%和 6 1.5 4% ,而对照组为 92 .31%和 84.6 2 % ;而体氟和体砷显著增加 ;高剂量组子代体重明显低于对照组 ,如高剂量组 F2 代出生第 30天平均体重只有 38.45 g,而对照组为 6 0 .84g。经扫描电镜观察 ,各阶段卵母细胞均发生明显的病理变化。氟砷染毒对大鼠生殖系统有明显的损害作用 ,并对子代的生长发育有明显的抑制作用。

人参皂甙Rb1对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 探讨人参皂甙Rb1对体外培养小鼠胚胎的发育毒性及其毒作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 .5日龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1的大鼠即刻离心血清中旋转培养 4 8小时 (Rb1终浓度分别为 0、5、15、30、4 0、5 0 μg ml) ,观察人参皂甙Rb1对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果 随着人参皂甙Rb1浓度的增加 ,反映胚胎生长发育的指标得分和总形态学得分均降低 ;浓度≥ 15 μg ml时 ,卵黄囊生长受抑制 ,血管分化不良 ;浓度较高时 ,可诱发胚胎畸形 ,包括脑部发育异常、体位未翻转、心包腔扩大等 ,严重者可见腹凸。结论 在较高浓度时 ,人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠胚胎有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘结构和功能的影响可能是其发育毒作用的机制之一。

全氟辛烷磺酸神经发育毒性机制研究进展

全氟辛烷磺酸(PFOS)是全氟化合物的终端降解产物,在生态环境中能够通过食物链进入生物组织并蓄积,对环境和生物存在潜在危害。动物实验研究发现,PFOS能够通过胎盘和血脑屏障,影响发育期神经系统,其持续性和严重性已引起国内外学者的广泛关注。本文通过对PFOS神经发育毒性效应及其主要机制研究进展进行综述,分析目前研究现状,并对未来PFOS神经发育毒性机制研究提出设想和展望。