霍乱弧菌山梨醇发酵相关基因序列特征分析

目的比较霍乱弧菌流行株与非流行株山梨醇发酵相关基因的差异,为采用分子生物学方法快速区分两类菌株提供理论依据。方法采用基因测序的方法,分别对42株霍乱弧菌(O1群埃尔托型33株、O139群9株)流行株和非流行株的糖发酵激活蛋白、外周质麦芽糖结合蛋白、外周质磷酸盐结合蛋白和外周质氨基酸结合蛋白编码基因进行序列比较。结果糖发酵激活蛋白编码基因在霍乱弧菌流行株与非流行株共发现三个位置有单个碱基的差异,即第106、150和378位核苷酸(在流行株分别为A、A和T,而在非流行株分别为G、G和C)。第106位碱基的差异导致了氨基酸的不同(编码蛋白的第36个氨基酸在流行株和非流行株分别为苏氨酸和丙氨酸)。外周质麦芽糖结合蛋白和外周质磷酸盐结合蛋白编码基因各发现两个碱基的规律变化,外周质氨基酸结合蛋白编码基因未发现一致性碱基改变。结论在这些基因中存在着多个单核苷酸多态性,可能会成为快速区分两类菌株的重要依据。糖发酵激活蛋白第36位氨基酸的改变,可能会引起该蛋白活性的改变。

从冻鸡中分离出山梨醇发酵阳性大肠杆菌O157的报告

大肠杆菌(E.coli)O157属于大肠杆菌的一个血清型,是引起出血性肠炎的主要病原体。山梨醇不发酵是目前进行E.coli O157筛选时的重要依据。本实验室用免疫法从冻鸡腿中分离出三株山梨醇发酵阳性的 E.coli O157,提示选用免疫法代替山梨醇发酵特征来进行 E.coli O157检测的必要性。

能力验证试验中大肠杆菌O157:H7的分离与鉴定

在2007年CNAS组织的肉制品中大肠杆菌O157:H7检测能力验证试验中,对比对样品(含肉粉的冻干粉)先用BP肉汤进行前增菌,并利用大肠杆菌O157:H7不发酵山梨醇的特性,在山梨醇麦康凯琼脂平板上初步进行分离,再用传统方法和mini VIDAS快速初筛,与API、VITEK生化鉴定系统结合起来,进行检测,结果表明,B320号样品未检出O157:H7,B057号样品检出O157:H7。CNAS对该实验室检测样品能力验证实验结果的结论为满意。