生防链霉菌17-7菌株发酵配方优化及发酵滤液稳定性研究

为了提升链霉菌17-7菌株的抑菌活性,合理利用菌株的代谢产物,本研究以橡胶树褐根病菌为靶标菌,采用正交试验和单因子试验相结合,在原培养基的基础上对链霉菌17-7菌株的发酵培养基配方进一步优化,获得该菌株最适宜产活性物质的配方为:大豆粉25 g/L、玉米粉10 g/L、葡萄糖10 g/L、酵母粉2 g/L、K2HPO41 g/L、NaCl 0.5 g/L、CaCO30.5 g/L。发酵滤液稀释500倍后对橡胶树褐根病菌的相对抑菌活性为51.37%,较优化前提高了17.66%,并且具有广谱的抑菌活性。在此基础上测定了温度、紫外线辐射、蛋白酶、酸碱度和贮存条件对17-7菌株发酵滤液抗真菌物质稳定性的影响。结果表明:17-7菌株发酵滤液对高温不敏感;紫外线照射1 h后发酵滤液的抑菌活性开始显著下降,长时间紫外照射并不会丧失抑菌活性;17-7菌株发酵滤液还具有较好的酸碱耐受性,pH为3~10时其发酵滤液均能发挥较好的抑菌活性;并且对胰蛋白酶和胃蛋白酶不敏感;菌株发酵滤液在低温(4℃)和室温(25℃)条件下贮存120 d仍能保持较强生物活性。对17-7菌株无菌发酵滤液稳定性和贮存条件的研究可为后续该菌株的开发利用提供理论依据和数据支持。

纳他霉素高产诱变株发酵培养基的优化

纳他霉素生产菌的亚硝基胍诱变株Streptomyces natalansis PM4—18,通过发酵培养基多次优化后,其生产能力累积提高,最终确定的新发酵配方是诱变前发酵配方的2倍左右,新发酵配方用于大罐生产,其生产水平稳定。

均匀设计对大肠杆菌产谷氨酸脱羧酶培养基优化的应用

为提高大肠杆菌单位发酵液中谷氨酸脱羧酶的产量,采用均匀设计,对培养基组成与发酵条件等9因素进行优化,后续分析以逐步线性回归、偏最小二乘回归建模并推论最优组合,结果表明:1)基于逐步线性回归模型,最优组合酶活性预测值(1.611)高于实测值(1.263),表明各因素与酶活性间更多地呈现非线性关系.2)基于二次多项式偏最小二乘回归和二次多项式偏最小二乘回归(考虑互作项)获得的最优组合相同,但酶活性预测值(2.090)高于实测值(0.927);基于二次多项式偏最小二乘回归(考虑平方项)获得的最优组合预测值(1.920)与实测值(1.933)接近.显示各因素与酶活性更多地呈现二次曲线关系,但各因素间的交互作用并不明显.3)基于均匀设计和二次多项式偏最小二乘回归(考虑平方项),仅经2轮共23次试验,即高效筛选得一满意组合:牛肉膏8g/L,蛋白胨15g/L,NaCl2.79g/L,谷氨酸0.5g/L,葡萄糖3g/L,磷酸二氢钾4g/L,硫酸镁0.56g/L,pH6.87,发酵时间18h;实测酶活性1.933,高于初始组合的酶活性(1.528).