中国人群IgE高亲和力受体β链(FcεRIβ)基因-6843G/A多态性位点与哮喘易感性关系的Meta分析

目的探讨中国人群IgE高亲和力受体β链（FcεRIβ）基因-6843G/A多态性与哮喘易感性的关系。方法检索PubMed、Embase、中国学术期刊网全文数据库（CNKI）、万方数据检索系统及维普数据库,收集研究中国人群FcεRIβ基因-6843G/A多态性与哮喘易感性关系的文献进行Meta分析,末次检索时间为2009年10月1日。病例组和对照组基因型分布的比值比（OR）及95%CI为效应指标,应用RevMan 4.2.8软件对各研究原始数据进行统计学分析并检验异质性,采用STATA10.0软件检验发表偏倚。结果根据纳入排除标准,共有9篇文献研究-6843G/A多态性位点,G携带者（GG＋GA）的哮喘发病风险较AA野生型纯合子（AA）增加49%（OR=1.49,95%CI1.01~2.22）。亚组分析显示,G携带者成年发病的风险明显增高（OR=1.83,95%CI1.32~2.52）,而儿童发病风险无显著性差异（OR=1.19,95%CI0.68~2.08）。结论中国人群FcεRIβ基因-6843G/A多态性与哮喘易感性密切相关,突变子G携带者的哮喘发病风险较高。

多发性硬化患者外周血T淋巴细胞受体β链可变区多态性研究

目的探讨多发性硬化(MS)不同阶段外周血T淋巴细胞受体β链可变区(TCRVβ)多态性的特点。方法收集首都医科大学宣武医院神经内科临床孤立综合征(CIS)患者30例、复发-缓解型多发性硬化(RRMS)患者40例、继发-进展型多发性硬化(SPMS)患者10例、健康对照者30名,经TCRVβ单克隆抗体标记后采用流式细胞仪分析各组外周血TCRVβ扩增程度以及TCRVβ24个亚家族扩增患者百分比、扩增片段所占百分比的差异。结果 CIS、RRMS及SPMS组TCRVβ存在扩增患者比例、扩增个数和扩增分数均高于对照组(P<0.01),而CIS、RRMS及SPMS组间比较无统计学差异(P>0.05)。CIS、RRMS及SPMS组CD4+TCRVβ2扩增频率均高于对照组(P<0.008),CIS组、RRMS及SPMS组CD8+TCRVβ11表达水平均低于对照组(P<0.05),SPMS组CD4+TCRVβ21.3表达水平低于CIS组(P<0.05)。ROC曲线分析提示CD8+TCRVβ11的扩增片段所占百分比对MS诊断具有一定价值,对MS分型无诊断价值;CD4+TCRVβ21.3的扩增片段所占百分比对SPMS诊断具有一定价值。结论可通过检测部分TCRVβ片段对MS及SPMS的早期诊断提供相关依据。

牙鲆T细胞抗原受体(TCR)β链同源cDNA的克隆

从牙鲆外周血淋巴细胞cDNA文库中克隆TCRβ1319bp同源cDNA序列并对其基因结构进行生物信息学分析。RT-PCR其编码区为942bp,编码314个氨基酸,编码区包括V、D、J和C区4个基因片段。TCRVβ片段主要包括从21～115位氨基酸残基的95个氨基酸序列,Jβ区与哺乳动物的Jβ区高度保守,在位于Vβ和Jβ之间的Dβ区中没有发现8碱基保守序列(GGACAGGG),CDR3β氨基酸序列为GTRILYE。牙鲆TCRCβ片段共有179个氨基酸残基,缺失位于Cβ细胞外区和临近区域的2个5～9氨基酸弹性区域。牙鲆TCRCβ片段的铰链区有6个氨基酸残基,缺少半胱氨酸位点,含Lys271保守位点。经RT-PCR检测,在脾、外周血和前肾中都发现TCRβ的表达,肌肉和肝中均未克隆到目的片段。

IgE高亲和力受体β链基因多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性的研究

目的 探讨 Ig E高亲和力受体 β链 (high- affinity Ig E receptorβ gene,Fcε RIβ)基因启动子 - 10 9位 C/ T和编码区 Glu2 37Gly基因多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性及血浆总 Ig E的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性技术检测 FcεRIβ基因启动子区 - 10 9位和编码区Glu2 37Gly两位点多态性 ,采用病例 -对照法研究了 2 16例变应性哮喘患者和 198名对照。结果 (1)湖北汉族人变应性哮喘患者 Fcε RIβ基因启动子区 - 10 9位 T/ T、T/ C和 C/ C基因型频率是 0 .4 0 3、0 .4 91和0 .10 6 ;与对照相比差异无显著性 (χ2 =0 .384 ,P>0 .0 5 ) ,但变应性哮喘组 T/ T基因型患者血浆总 Ig E对数值 (2 .5 39± 0 .832 5 )与 T/ C基因型的对数值 (2 .2 78± 1.0 89)和 C/ C基因型的对数值 (2 .32 3± 0 .785 2 )相比差异具有显著性。(2 )变应性哮喘患者 FcεRIβ基因 Glu2 37Gly位点 Glu/ Glu、Glu/ Gly和 Gly/ Gly基因型频率为 0 .5 79、0 .370和 0 .0 5 1,与正常对照相比差异具有显著性 (χ2 =13.6 2 ,P<0 .0 1) ,变应性哮喘患者Gly/ Gly基因型血浆总 Ig E对数值为 (2 .6 2 2± 0 .9374 ) ,与 Glu/ Glu和 Glu/ Gly相比差异具有显著性。结论 Fcε RIβ基因启动子区 - 10 9位 T/ T?

乳腺癌患者CD4＋ CD25＋CD127dim/-调节性T细胞受体β链CDR3谱型漂移特征

白细胞介素（IL）-7受体α链（IL-7Rα） CD127是CD4＋ CD25＋ Tregs细胞重要的鉴定指标[1].T细胞受体（TCR）是T细胞发挥免疫作用的关键环节,它能够识别抗原.T细胞在发育过程中形成抗原互补决定区（CDR1、CDR2、CDR3）,＂CDR3区＂最具有多样性.不同的T细胞具有不同的CDR3序列和长度,测定CDR3序列可以反映T细胞功能[2].我们利用毛细吸管电泳技术在筛选出单/寡克隆性增生的TCR β链的T细胞受体β链区域（TRBV）家族并进行测序.

胎膜早破时母血可溶性白细胞介素—6受体及其β链的监测

目的：探讨可溶性白细胞－6受体（SIL－6R）及其β链（Sgp130)在监测胎膜早破中的作用。方法：采用酶联免疫吸附法检测32例胎膜早破孕妇血清SIL－6R，Sgp130水平，并以正常足月妊娠孕妇20例作对照组，结果：胎膜早破孕妇血清SIL－6R，Sgp130水平较正常妊娠组高，差异显著（P＜0．01），随着破膜时间的延长孕妇血清ISL－6R，Sgp130水平有增加趋势，绒毛羊膜炎孕妇血清SIL－6R，Sgp130水平明显高于非绒毛羊膜炎孕妇（P＜0．01），结论：测定孕妇血清SIL－6R，Sgp13水平可作为胎膜早破和绒毛羊膜炎的一个预测指标。

湿邪致病大鼠相关T淋巴细胞受体β链可变区基因谱系的研究

目的:采用实时荧光定量PCR方法检测湿邪致病大鼠(TCRVβ)亚家族基因表达谱,从免疫识别的角度探讨湿邪致病"蒙蔽性"特点。方法:将32只SD大鼠按随机数字表随机分为正常对照组、内湿大鼠模型组、外湿大鼠模型组和内外湿大鼠模型组4组,造模20d后,各组按随机数字表选3只大鼠,检测其TCRVβ亚家族表达水平。结果:与正常对照组比较,外湿大鼠模型组的TCRVβ1、TCRVβ7、TCRVβ9、TCRVβ13表达升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。与正常对照组比较,内湿大鼠模型组的TCRVβ8、TCRVβ14、TCRVβ18表达降低(P<0.05,P<0.01),内外湿大鼠模型组的TCRVβ8、TCRVβ18表达也降低(P<0.05,P<0.01)。结论:在外湿大鼠模型组部分TCRVβ亚家族比正常对照组表达升高,而在内湿大鼠模型组及内外湿大鼠模型组中部分TCRVβ比正常对照组表达低下,提示内湿之邪可能具有"蒙蔽性"有关,在内湿的环境中,机体可能对外在相关抗原相对不敏感,进而导致湿邪致病大鼠免疫功能障碍而死亡率升高,其机制值得进一步研究。

噬菌体肽库筛选血小板衍生生长因子受体β链(PDGF-Rβ)亲和短肽及其抗肝纤维化实验研究

目的:从噬菌体随机肽库中筛选血小板衍生生长因子受体β链(PDGF-Rβ)的亲和短肽并探讨其对CCl4诱导的肝纤维化模型中的抗肝纤维化作用。方法:以重组可溶性人PDGF-Rβ作为靶标,应用噬菌体随机十二肽库进行筛选,经过3轮淘选,提取阳性噬菌体克隆ssDNA,测序并进行序列分析,选择其中出现频率高的展示肽,并根据其氨基酸序列人工合成亲和短肽,应用亲和短肽实施抗肝纤维化试验,设亲和短肽C1组亲和短肽C2组,秋水仙碱组,模型组,空白组,造模五周后处死采血,通过分析肝脏中的HPY水平并对肝脏进行病理组织学检查,检测其抗肝纤维化的作用。结果:人工合成的亲和肽PDGF-RβC1用于抗肝纤维化治疗能减轻炎症,减少胶原纤维形成,ALT羟脯氨酸与肝纤维化小鼠模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:通过噬菌体肽库技术能筛选出与PDGF-Rβ结合的噬菌体展示肽可以改善实验性肝纤维化小鼠的肝脏组织结构和肝功能。

成人急性T淋巴细胞白血病T淋巴细胞受体β链基因重排的特点及其在微小残留病定量检测中的意义

目的 建立以TCR β基因重排为分子标志,基于ASO引物的RQ-PCR方法,检测成人T-ALL患者的TCR β基因重排,以利于动态监测患者的MRD.方法 20例成人T-ALL患者的初诊DNA标本经多重PCR检测方法设计38条引物,分成3管,分别扩增TCR β基因完全重排和不完全重排,克隆产物经电泳和双色基因扫描鉴定.对其中4例患者进行基因测序和序列比对分析,根据克隆特异性序列信息,利用软件设计4条ASO引物,作为RQ-PCR检测的上游引物,合成通用的Jβ下游引物和TaqMan探针,对患者的随访标本定量监测MRD.结果 20例患者中有17例可检测到克隆性TCR β基因重排,克隆检出率为85.0%（17/20）.其中16例可检测到至少1个Vβ-Jβ完全重排（94.1%,16/17）,7例患者有Dβ-Jβ的不完全重排（41.2%,7/17）,完全Vβ-Jβ和不完全Dβ-Jβ重排之间的比例约为2∶1.双色基因扫描分析显示Jβ2家族的使用频率为73%,Jβ1家族的使用频率为27%,Jβ2家族的使用频率明显高于Jβ1家族.4例患者使用ASO引物RQ-PCR扩增TCR β重排靶基因的标准曲线的斜率为-3.60～-3.27,相关系数＞0.99,敏感性达4×10-5μg/μl,荧光背景信号不显示或较低.监测4例T-ALL患者在疾病治疗各随访时间点的TCR β重排靶基因水平,包括诱导完全缓解、巩固治疗等时间点,RQ-PCR显示其MRD水平随病情的缓解呈逐渐下降的趋势.结论 以克隆性TCR β基因重排为靶分子的特异性寡核苷酸引物RQ-PCR方法可对T淋巴细胞系统的恶性克隆进行准确定量,适用于成人T-ALL患者MRD的随访监测.

儿童急性T淋巴细胞性白血病T细胞受体β链基因重排的特点及其在微小残留病定量检测中的意义

目的建立以T细胞受体β链（TCRβ）基因重排为分子标志定量检测儿童急性T淋巴细胞性白血病（T—ALL）微小残留病（MRD）的实时定量聚合酶链反应（RQ—PCR）检测体系。方法应用BIOMED-2欧洲协作组设计的PCR检测体系，检测26例初发T—ALL患儿的TCRβ基因重排，并进行序列分析与比对。对其中6例患儿根据基因重排后连接区序列设计等位基因特异性寡核苷酸（ASO）引物，结合胚系TaqMan探针与引物，建立RQ—PCR检测方法，行缓解期标本MRD定量追踪检测。结果92．3％的T—ALL患儿可检测到克隆性TCRβ基因重排[84．6％具有Vβ-（Dβ）-Jβ完全重排，50％具有Dβ-Jβ不完全重排]。通过序列分析，V片段使用频率最高的家族为BV5、BV6，J区使用频率最高的家族为Jβ2．7，J1．3、J2．4、J2．6未被使用。6例患儿ASO标准曲线的斜率为-3．54-3．37，截距为19．35-20．51，相关系数〉0．98。定量范围均达到10^-4。对随访期标本MRD检测发现，复发患儿的MRD水平在复发前显著升高。结论以TCRβ基因重排为分子标志对T—ALL患儿行MRD定量检测，具有较高的敏感度和特异性，动态追踪检测随访期标本MRD水平具有重要的临床价值。

同卵、异卵、非双胞胎外周血TCRβ链假基因和功能性CDR3受体库前后5年动态变化分析

目的:初步探讨个体遗传因素对V(D)J重组过程中的偏向性影响和TCR的MHC-自身肽耐受的选择效应。方法:采用高通量测序技术分析同卵双胞胎(MZ)、异卵双胞胎(DZ)和非双胞胎(NT)外周血中TCRβ链假基因CDR3受体库与功能性CDR3受体库前后5年的动态变化。结果:TRBV基因取用,V-J配对,核苷酸的插入和删除前后5年的动态变化在MZ之间更为一致;而CDR3区TRBJ基因取用、AA取用、AA长度分布和Overlap前后5年的动态变化在MZ、DZ和NT之间无显著差异。结论:本实验提示遗传因素可能对外周血总T细胞CDR3受体库的偏向性产生影响。

单倍型骨髓移植小鼠移植物抗宿主病模型的建立及移植物抗宿主病靶器官T细胞受体克隆检测

目的:建立单倍型骨髓移植小鼠模型,观察单倍型骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)靶器官的组织病理表现及器官特异性T细胞受体克隆表达。方法:建立单倍型异基因移植小鼠GVHD模型,进行移植前后GVHD靶器官的病理分析,同时应用RT-PCR扩增小鼠肝脏、皮肤、结肠、肾脏等组织移植前、后T细胞受体β链可变区(TCRBV)20个家族的基因序列,通过基因扫描判断TCRBV家族的克隆表达和CDR3克隆的性质。结果:单倍型骨髓移植小鼠在移植后14d临床开始出现典型的GVHD表现。移植后24d受鼠肝脏、皮肤、远端回肠等均出现典型的GVHD病理表现,在其T细胞受体谱型图上出现了分属TCRBV家族的单克隆或寡克隆增生的T细胞,而肾脏等非GVHD靶器官中浸润的淋巴细胞为多克隆的T细胞增生。结论:单倍型骨髓移植小鼠在移植后14d出现典型的GVHD表现,GVHD靶器官出现的T细胞单克隆及寡克隆增生可能与GVHD的发生相关。

肝硬化患者血清中白细胞介素-6及其受体的检测及意义

应用酶联免疫吸附法检测41例肝硬化患者、13例原发性肝癌和15例健康对照组血清中IL-6s、IL-6R和sgpl 30水平。观察肝硬化患者血清中白细胞介素6(IL-6)及其受体(可溶性白细胞介素6受体sIL-6R和可溶性白细胞介素6受体β链sgp1 30)变化。结果:肝硬化患者血清中IL-6、sIL-6Rs、gp1 30水平高于健康对照组,但较原发性肝癌组低;肝硬化患者血清中IL-6s、IL-6Rs、gp1 30水平随着Child分级逐渐升高而增加,各组间差异有显著性(P<0.01)。提示血清中IL-6s、IL-6Rs、gp130水平与肝硬化的发生、发展有关。

单倍体相合骨髓移植小鼠GVHD靶器官的器官特异性T细胞受体克隆谱型的分子特征

本课题通过单倍体相合骨髓移植小鼠模型,研究GVHD靶器官的器官特异性T细胞受体谱型特点,以及GVHD靶器官克隆性T细胞的TCRBVCDR3分子特征。建立单倍体相合异基因移植小鼠GVHD模型,应用RT-PCR扩增小鼠肝脏、皮肤、回肠等组织移植前后TCRBV20个家族的基因序列,通过基因扫描判断TCRBV家族的克隆表达、CDR3克隆性质。对于寡克隆表达的TCRBV家族在长泳道测序胶上电泳,对部分单克隆条带测序,得到一组肝脏、皮肤、回肠在移植后不同时间与GVHD相关的TCRBV CDR3的分子。结果表明:单倍体相合骨髓移植小鼠在移植后14天临床开始出现典型的GVHD表现。移植后受鼠肝脏、皮肤、远端回肠等均出现典型的GVHD病理表现,在其T细胞受体谱型图上出现了分属TCRBV家族的单克隆或寡克隆增生的T细胞。肝脏、皮肤、回肠等GVHD的靶器官中部分克隆性增生的T细胞TCRBVCDR3分子存在一些C′末端保守的CDR3氨基酸基序(motif)。结论:单倍体相合异基因移植后发生GVHD的组织可出现T细胞单克隆及寡克隆增生,GVHD相关T细胞克隆共用一些保守的TCRBVCDR3基序,识别类似的抗原。

TRBC1作为潜在靶点治疗T细胞来源肿瘤的研究进展

T细胞来源肿瘤具有侵袭性、易耐药且预后不良的特点,常规治疗后复发率高,目前对于其的治疗不存在特效药。若能改进早期诊断和治疗手段,将有效改善患者的预后。细胞免疫治疗对B细胞来源的血液系统肿瘤获得较高的治愈率。却因为缺乏合适的靶点对治疗T细胞来源血液系统肿瘤的免疫治疗效果不佳。最新发现的T细胞受体β链恒定结构域1(TRBC1)作为一个潜在的治疗靶点,给T细胞来源肿瘤的诊断和治疗带来希望。本文将对TRBC1在当前的疾病诊断和细胞免疫治疗中研究进展进行综述。

胰蛋白酶原基因与T淋巴受体Vβ7.2片段之间的间隔序列分析

目的鉴定人类T淋巴细胞受体β链基因(Tcell receptor beta-chain,TCRβ)上两个毗邻基因,即胰蛋白酶原基因(cationictrypsinogen,PRSS1)与TCR Vβ7.2片段之间的间隔序列在胰腺炎和健康人群中的分布情况。方法对来自3位胰腺炎患者及2位健康体检者的DNA样本利用特异引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,产物经电泳、纯化后直接测序,并分析该序列的碱基在胰腺炎组和正常人群中的组成情况。结果利用自行设计的引物在2份胰腺炎患者外周血DNA样本中扩增出片段长度约为2.6 kb的条带,DNA测序结果显示两个毗邻基因之间的片段在健康人群和胰腺炎人群中均不是稳定组成。结论TCRβ序列中胰蛋白酶原基因(PRSS1)与TCR Vβ7.2基因之间间隔序列存在不稳定性。

T淋巴细胞受体与多发性硬化

免疫性T淋巴细胞在多发性硬化(MS)的发病中有重要地位,国外关于MS患者T淋巴细胞受体β链可变区的研究显示MS患者T淋巴细胞受体β链可变区的某些区段会有克隆性扩增,并且与临床类型、病程、MRI表现、扩展残疾状态评分有一定关系。本文就MS患者T淋巴细胞受体β链可变区的表现进行综述。

FcεRⅠ β基因多态性与湖北地区儿童变应性哮喘的关系

目的 探讨IgE高亲和力受体 β链基因 (FcεRⅠβ)启动子 - 10 9位和编码区Glu2 37Gly基因多态性与湖北儿童变应性哮喘及血浆总IgE的关系。方法 采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性技术检测 110例儿童变应性哮喘患者和 92例相匹配对照者FcεRⅠ β基因启动子区 - 10 9位和编码区Glu2 37Gly两位点多态性。结果 ①儿童变应性哮喘患者FcεRⅠ β基因启动子区 - 10 9位T/T、T/C和C/C基因型频率是 0 391、 0 4 91和 0 118;与对照相比差异无显著性意义 (χ2 =0 0 2 34,P >0 0 5 ) ,但儿童变应性哮喘组T/T基因型患者血浆总IgE对数值为 2 4 78± 0 94 4 ,与T/C基因型的 2 2 87± 1 114和C/C基因型的 2 315± 0 86 6相比差异具有显著性意义 (F =4 336 ,P <0 0 1)。②FcεRⅠ βGlu2 37Gly位点Glu/Glu、Glu/Gly和Gly/Gly型频率为 0 5 91、 0 36 4和 0 0 4 5 ,与正常对照相比差异具有显著性意义 (χ2=6 5 86 ,P <0 0 5 ) ,Gly/Gly型血浆总IgE对数值为 2 6 2 3± 0 96 2 ,与Glu/Glu的 2 30 6± 0 915和Glu/Gly的 2 4 18±0 894相比差异具有显著性意义 (F =6 6 5 4 ,P <0 0 1)。结论 IgE高亲和力受体 β链启动区 - 10 9位T/T型与血浆总IgE相关 ,编码区 2 37位Gly/Gly型与儿童变应性?

支气管哮喘相关基因研究进展

哮喘是一种多个基因座位和一些环境因子相互作用导致的复杂疾病。本文重点综述国内外研究几个哮喘相关基因如IgE高亲和力受体 β链 (FcεRIBG)、β2肾上腺素受体、IL 4和IL 4受体α链、HLA和T细胞受体等基因 ;对ADAM 33和Tim 1/ 3这些新基因也作了一些介绍。

急性淋巴细胞白血病患儿化疗结束后T淋巴细胞克隆谱系分析

目的了解急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿化疗结束后T淋巴细胞免疫重建情况。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)高压变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测8例正常对照及44例化疗结束后的ALL患儿外周血T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)第三互补决定区(CDR3)的克隆谱系。结果白血病化疗结束至48个月TCRBV家族仍可见表达增高或降低(P均<0.05)。化疗结束后TCRBVCDR3谱型多态性基本恢复,但寡克隆增生情况仍明显高于正常对照组(P均<0.05),小于6个月组差异最明显(P均<0.05)。16例普通B细胞急淋(c-ALL)BV8、BV5.1、BV5.2和BV12发生克隆性增生的频率较高,9例前B细胞急淋(pre-B)BV6家族发生克隆性增生较多。结论白血病患儿化疗结束至48个月T细胞免疫尚未完全恢复;T细胞克隆谱系异常以寡克隆增生为主。