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鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用
被引量:
3
1
作者
黄艳艳
高丹丹
+6 位作者
许传田
朱曼玲
杨少华
黄庆华
张琳
张秀美
吴家强
《动物医学进展》
北大核心
2016年第4期12-17,共6页
为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复...
为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明,所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫SPF鸡后上述基因表达的变化,发现免疫后6h各基因的表达水平达到峰值,表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法,可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。
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关键词
鸡
天然免疫
受体与配体
检测
实时荧光定量PCR
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职称材料
CHO细胞表达人源μ型阿片受体及其活性分析
被引量:
1
2
作者
刘威
段海清
+2 位作者
李淑琴
刘秀丽
张兆山
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期463-466,共4页
μ型阿片受体在阿片类药物镇痛与成瘾中发挥重要作用 .从人脑组织总RNA通过一次反转录和两次PCR法扩增获得 μ型阿片受体的cDNA ,将其克隆至pcDNA3 1 (+)中 ,转染CHO细胞后 ,筛选单克隆细胞株并制备膜受体 ,检测重组细胞株表达的 μ型...
μ型阿片受体在阿片类药物镇痛与成瘾中发挥重要作用 .从人脑组织总RNA通过一次反转录和两次PCR法扩增获得 μ型阿片受体的cDNA ,将其克隆至pcDNA3 1 (+)中 ,转染CHO细胞后 ,筛选单克隆细胞株并制备膜受体 ,检测重组细胞株表达的 μ型阿片受体与特异性配体的结合能力 .通过饱和性结合和竞争性结合试验证实 ,重组细胞株表达的 μ型阿片受体与天然的 μ型阿片受体具有基本一致的生物学特性 。
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关键词
μ型阿片
受体
受体与配体
结合
活性分析
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职称材料
题名
鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用
被引量:
3
1
作者
黄艳艳
高丹丹
许传田
朱曼玲
杨少华
黄庆华
张琳
张秀美
吴家强
机构
山东省农业科学院畜牧兽医研究所
山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室
山东农业大学动物科技学院
出处
《动物医学进展》
北大核心
2016年第4期12-17,共6页
基金
山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室主任基金项目(2015SYSZR04)
十二五国家科技支撑计划项目(2015BAD12B03)
+1 种基金
公益性行业(农业)科研专项(201303033)
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-42-Z12)
文摘
为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明,所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫SPF鸡后上述基因表达的变化,发现免疫后6h各基因的表达水平达到峰值,表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法,可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。
关键词
鸡
天然免疫
受体与配体
检测
实时荧光定量PCR
Keywords
chicken
innate immunity
receptor and ligand
detection
quantitative PCR
分类号
S852.42 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
CHO细胞表达人源μ型阿片受体及其活性分析
被引量:
1
2
作者
刘威
段海清
李淑琴
刘秀丽
张兆山
机构
北京生物工程研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期463-466,共4页
文摘
μ型阿片受体在阿片类药物镇痛与成瘾中发挥重要作用 .从人脑组织总RNA通过一次反转录和两次PCR法扩增获得 μ型阿片受体的cDNA ,将其克隆至pcDNA3 1 (+)中 ,转染CHO细胞后 ,筛选单克隆细胞株并制备膜受体 ,检测重组细胞株表达的 μ型阿片受体与特异性配体的结合能力 .通过饱和性结合和竞争性结合试验证实 ,重组细胞株表达的 μ型阿片受体与天然的 μ型阿片受体具有基本一致的生物学特性 。
关键词
μ型阿片
受体
受体与配体
结合
活性分析
Keywords
opioid receptor,binding of receptor and ligand,activily analysis
分类号
Q5 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用
黄艳艳
高丹丹
许传田
朱曼玲
杨少华
黄庆华
张琳
张秀美
吴家强
《动物医学进展》
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
2
CHO细胞表达人源μ型阿片受体及其活性分析
刘威
段海清
李淑琴
刘秀丽
张兆山
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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职称材料
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参考文献
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