血凝素的糖基化模式对G57基因型H9N2亚型禽流感病毒的稳定性和受体亲和性影响

G57基因型H9N2亚型禽流感病毒自2007年以来逐渐成为我国禽群中的优势基因型。序列分析显示,G57基因型病毒的血凝素主要存在5种糖基化模式。本研究利用反向遗传技术拯救了5株具有不同HA糖基化模式的病毒,分别命名为reHA7、reHA6、reHA5、reHA4、reHA3。稳定性试验结果显示,reHA6的热稳定性与酸稳定性最好,reHA7、reHA5次之,而reHA4、reHA3最弱。红细胞洗脱试验和红细胞凝集试验结果显示,reHA7的受体亲和性最强,reHA6、reHA5次之,而reHA4、reHA3最弱。固相结合试验结果显示,5株病毒均可与人型和禽型受体结合,并且reHA7与2种类型受体的亲和性最强,reHA6、reHA5次之,而reHA4、reHA3最弱。结果表明,血凝素糖基化模式影响H9N2亚型禽流感病毒的稳定性和受体亲和性,并以210位和305位糖基化位点的效应最为显著。本研究结果为深入理解H9N2亚型禽流感病毒的适应性进化提供了新的理论基础。

猪H3N2亚型流感病毒受体亲和性鉴定

利用固相酶联方法对分离自吉林省猪群中的3株H3N2亚型流感病毒进行了受体亲和性鉴定。结果显示,这3株病毒与SAα2,3和SAα2,6受体都能结合,并且偏嗜SAα2,6受体,暗示它们具有感染人的潜能。因此应该加强猪流感的流行病学调查,及时发现那些具有引发人流感流行潜能的病毒,为防控人间流感提前做好准备。

H9N2亚型流感病毒血凝素受体结合区定点突变株拯救及其受体亲和性鉴定

利用重叠PCR技术对H9N2亚型流感病毒Y280亚系毒株A/Chicken/Jilin/DH102/2012(H9N2)的血凝素受体结合区220-loop中相对保守的226位和227位进行了氨基酸置换,并通过反向遗传技术拯救了定点突变病毒。固相酶联试验结果显示:226位为L时,病毒偏嗜结合人型受体;226位为Q时,病毒偏嗜结合禽型受体;226位为M时,病毒同时具有与2种类型受体结合的能力,但偏嗜结合人型受体;227位为Q或M时,病毒均偏嗜结合人型受体。因此,相比于227位,Q226L突变足以改变病毒的受体偏嗜性。由于近年来90%以上的H9N2病毒分离株HA226位氨基酸都是L,推测226L是H9N2病毒感染哺乳动物的重要位点。

低亲和性神经营养素受体p75在人胚胎视网膜中的表达

p75神经营养素受体在视网膜的发育以及再生过程中发挥着重要的作用 ,而在人类视网膜中的分布状况尚未被研究 .利用免疫组织化学方法 ,在光镜水平下确定了 p75在人胚胎发育 5、 6和 7个月的视网膜中的分布情况 .在视网膜神经节细胞层出现最强的p75免疫阳性反应 ,在其他各层也有较弱的免疫阳性反应 .在胚胎 6、 7月的视网膜中 ,主要由M櫣ｌｌｅｒ细胞的终足构成的内界膜上出现了比较强的 p75表达 .p75在人胚胎视网膜中的分布情况与大鼠视网膜中很类似 ,主要表达在M櫣ｌｌｅｒ细胞 ,在神经节细胞上也可能有表达 .

流感病毒受体特异性间接ELISA检测方法的建立

本研究采用过碘酸钠法对去唾液酸胎球蛋白进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,然后通过两种不同类型的唾液酸转移酶对HRP去唾液酸胎球蛋白进行唾液酸标记,使其成为只含有单一受体的载体。利用MAA和SNA以及已知受体特性的两株流感病毒对唾液酸标记的HRP去唾液酸胎球蛋白进行受体结合特异性鉴定。结果表明,该方法可以快速准确的鉴定流感病毒的受体特异性。

多种类杂环化合物的药理和毒理活性系数构效关系（英文）

杂环类化合物在卫生保健和药物分子设计领域发挥关键作用,在西药中占有重要地位.本工作针对扩展距离矩阵提出了一组范数指数,基于扩展距离矩阵的范数指数构建了一个新的构效关系模型,并对杂环类化合物二苯并呋喃的芳烃受体亲和性(pEC50)以及芳香和杂环芳香胺的诱导有机体变异力(lnR)进行了计算预测.结果表明,基于扩展距离矩阵范数指数建立的构效关系模型可以很好地预测pEC50和lnR.其中,pEC50预测结果的平均绝对误差(AAD)为0.403,相关性系数r2=0.876,lnR预测结果的AAD为0.702,r2=0.779.与其他预测方法的对比结果表明,本工作不仅能够利用一个完全相同的数学表达模型同时对pEC50和lnR进行预测,而且预测结果在准确性和稳定性上都有显著改善.

多巴胺D_3受体配体研究现状

综述了现有多巴胺D3受体配体(主要是氨基四氢萘满类)的分子结构、受体亲和性和受体选择性进行了比较,并对多巴胺D3受体配体的研究进行了展望。

急性髓细胞白血病患者NGF及p75NTR测定的临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)患者神经生长因子(NGF)及其低亲和性NGF受体(p75NTR)表达及临床意义。方法运用ELISA测定24例AML患者血清NGF水平,流式细胞术测定骨髓白血病细胞群p75NTR的表达水平;同时选择15例健康者作为对照组。结果①AML患者血清NGF水平与对照组比较明显升高(P<0.05),骨髓白血病细胞群表面p75NTR表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。②AML完全缓解(CR)者化疗前p75NTR较未缓解(NR)者明显高表达(P<0.05),NGF变化不明显(P>0.05)。NR者化疗后NGF和p75NTR表达水平与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),且p75NTR较CR者明显低表达(P<0.05)。③AML患者NGF以及p75NTR高表达和低表达3年总体生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AML患者血清NGF高水平以及骨髓白血病细胞群p75NTR低表达可能参与AML发生发展,且可能是判断近期疗效的有效指标。

急性B淋巴系白血病细胞CD271表达和血清神经生长因子水平的临床意义

本研究检测急性B淋巴系白血病(B-ALL)患者血清神经生长因子(NGF)水平及骨髓白血病细胞群表面NGF低亲和性受体CD271的表达,并探讨两者的临床意义。应用酶标记免疫吸附分析法测定B-ALL患者血清NGF水平,应用流式细胞术测定患者骨髓白血病细胞群表面CD271的表达水平。结果表明,病例组患者NGF水平与对照组比较明显升高(t=4.191,p<0.05),而白血病细胞表面CD271表达与对照组比较明显降低(t=4.898,p<0.05)。25例初治B-ALL患者经CVAD方案化疗1个周期后完全缓解(CR)率为64%(16/25)。未缓解(NR)组患者化疗后NGF水平和CD271表达与对照组比较差异均有统计学意义(t=3.976,p<0.05和t=5.052,p<0.05),而CR组化疗后NGF水平和CD271表达与对照组比较差异均无统计学意义(t=1.102,p>0.05和t=1.150,p>0.05)。CR组和NR组患者化疗前CD271表达比较差异有统计学意义(t=3.889,p<0.05),但NGF水平比较差异无统计学意义(t=0.476,p>0.05)。CR组和NR组患者化疗后NGF水平及CD271表达比较差异均有统计学意义(t=3.751,p<0.05和t=4.678,p<0.05)。50%(8/16)例患者在随访过程中复发,复发患者NGF水平和CD271表达分别为(168.00±61.66)pg/ml和(52.29±13.00)%,与对照组比较差异均有统计学意义(t=5.284,p<0.05和t=6.073,p<0.05),余8例患者在缓解期NGF水平和CD271表达分别为(81.13±25.32)pg/ml和(78.45±7.12)%,与对照组比较差异无统计学意义(t=1.228,p>0.05和t=1.144,p>0.05)。B-ALL患者NGF高水平组和低水平组生存时间比较差异无统计学意义(p=0.750),同时CD271高表达组和低表达组生存时间比较差异无统计学意义(p=0.170)。结论:B-ALL患者血清NGF水平升高和骨髓白血病细胞CD271表达降低与白血病发生发展有关,这两项指标可能对疗效和预后判断具有一定的参考价值。

H3亚型禽流感病毒的分离与鉴定

为了解广西H3亚型禽流感病毒在家禽中的流行情况,对2009~2014年采集的活禽棉拭子样品进行了分离与初步鉴定,共分离纯化出14株H3亚型AIV,通过对HA和NA基因克隆、序列测定,进一步确定11株为H3N2亚型,2株为H3N6亚型,1株为H3N8亚型AIV。对分离株进行鸡胚半数致死量、半数感染量（EID50）的测定与受体亲和性试验,结果显示14株分离株均具有优先结合SA唾液酸α-2,3-Gal受体的能力,属于禽源流感病毒毒株,不具备感染人的潜能。

白血病患者NGF和CD271测定的临床意义

目的:观察初治白血病患者神经生长因子(NGF)及其低亲和性受体CD271的表达水平变化及其临床意义。方法:运用酶标记免疫吸附分析(ELISA)测定40例急/慢性白血病患者(病例组)血清NGF水平以及流式细胞术(FCM)测定白血病细胞群CD271阳性表达率,同时选择35例健康体检者为对照组。结果:病例组患者血清NGF水平较对照组有明显升高(P<0.01),但急性髓细胞性白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)和慢性粒细胞性白血病(CML)患者间比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例组患者白血病细胞群表面CD271表达水平与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),但不同免疫分型间比较差异无统计学意义(P>0.05)。经两个化疗周期后,总体缓解率为60.00%(21/35),未缓解组NGF和CD271表达水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),缓解组NGF和CD271表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:白血病患者血清NGF高表达以及白血病细胞CD271低表达可能参与白血病发生发展,且可能是判断近期疗效的有效指标。

1株H9N2亚型禽流感变异株HA基因遗传演化分析及反向遗传操作系统的建立

为了解2018年江苏养殖场分离的1株H9N2亚型禽流感病毒A/chicken/Jiangsu/76/2018 (JS/76)的遗传变异情况,对其HA基因进行了测序和遗传演化分析,并且成功构建JS/76的反向遗传操作系统。HA基因演化分析结果显示,JS/76毒株的HA基因裂解位点为PSRSSR↓GLF,是典型低致病性禽流感病毒(LPAIV)的特征序列。其216位氨基酸为亮氨酸(L),具有哺乳动物α-2, 6唾液酸受体结合特征,并且在127位氨基酸额外增加了一个潜在糖基化NGT。随后,基于流感病毒的"12质粒系统"成功拯救该病毒,命名为r-JS/76,测定其血凝价为1∶1 024。结果显示,r-JS/76在EID_(50)和TCID_(50)等方面保持了与亲本毒株相似的滴度。体外试验证明,拯救毒株与野生毒株在SPF鸡胚和MDCK细胞上的复制能力保持一致,受体结合试验表明拯救病毒与亲本病毒均具有人源受体结合特征,可能已获得感染哺乳动物和人的能力。本研究对H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传演化进行分析并成功建立其反向遗传操作技术平台,为今后探索H9N2流感病毒致病机理、传播机制与基因功能等研究奠定了基础。