受体结合法与荧光偏振免疫法测定环孢素 A 血药浓度的比较

建立了测定全血中环孢素 Ａ（ Ｃｓ Ａ） 浓度的受体结合法，并与荧光偏振免疫法（ Ｆ Ｐ Ｉ Ａ） 进行比较。用环孢素 Ａ 的重组受体亲环素 Ａ 作为结合蛋白，３ Ｈ Ｃｓ Ａ 作示踪剂，活性炭吸附分离结合的与游离的两相，测定结合相的放射性。测定了３０ 例肾移植患者 Ｃｓ Ａ 血药浓度并与 Ｆ Ｐ Ｉ Ａ 的结果进行比较。受体结合法的有效测定范围为５０１６００ ｎｇｍｌ ，变异系数批内为８ ．２ ％ （ ｎ ＝ ８） ，批间为１０ ．６ ％ （ ｎ ＝ ６） ，测定结果与 Ｆ Ｐ Ｉ Ａ 法相关（ ｒ＝ ０ ．９６ ； Ｐ＜０ ．００１） 。测定 Ｃｓ Ａ 的受体结合法灵敏、特异、重复性和稳定性好，测定结果与 Ｆ Ｐ Ｉ Ａ 法相关，适用于临床血药浓度的测定。

大鼠胃粘膜胃泌素受体的放射配基结合法

目的 建立高效、敏感的大鼠胃粘膜胃泌素受体结合模型。方法 用大鼠胃粘膜粗膜标本为组织受体，［１２５Ｉ］１５ＬｅｕＧ１７为标记配基进行受体结合反应，检测胃泌素受体结合参数。结果 胃泌素受体结合符合简单单位点受体结合模型，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析求出的胃泌素受体结合参数Ｂｍａｘ＝７－４０４×１０－１２ｍｏｌ·Ｌ－１（３－７０２ｐｍｏｌ·ｇ－１Ｐｒｏ），Ｋｄ＝１－６８６×１０－１０ｍｏｌ·Ｌ－１。单点法求出的特异结合量Ｒｓ＝２－７３４ｐｍｏｌ·ｇ－１Ｐｒｏ。粗膜标本蛋白浓度在４～１２ｇ·Ｌ－１范围内，与标记胃泌素特异性结合容量成正比。同一样本大鼠胃粘膜粗膜标本［１２５Ｉ］ＧＡＳ特异结合量测定方法变异系数为７－８０％，竞争抑制实验证明［１２５Ｉ］ＧＡＳ与大鼠胃粘膜粗膜标本结合特异性良好。结论 大鼠胃粘膜胃泌素受体的放射配基结合法符合受体结合实验方法学要求。

大鼠心房、心室M受体密度的增龄性变化

目的观察成年大鼠心房肌和心室肌M受体密度的增龄性变化.方法运用放射性配基受体结合法测定不同月龄(2～30个月)大鼠心房肌和心室肌M受体与其强阻断剂氚标记二苯羟乙酸奎宁酯(3H-QNB)的最大结合力(Bmax,可转化成密度值RT)及解离常数(Kd)值.结果①随着年龄的增长,SD大鼠心房肌M受体密度逐渐减少:从(259±9)pmol/g 蛋白下降至(174±13)pmol/g蛋白,且24个月以后的老龄鼠心房肌M受体密度减少更快.② M受体在各年龄段大鼠心室肌分布密度基本相当.③Kd值在各个年龄段大鼠心房和心室无明显差异.结论 M受体在大鼠心房的分布密度随着年龄的增长而减少,而在心室的分布密度与年龄的增长没有显著相关性,亲和活性在各个年龄段大鼠心房和心室差异不明显.

心房和心室M受体密度的种属差异性比较

目的:比较大鼠、豚鼠和家兔心房肌和心室肌M受体分布密度及与其强阻断剂氚标记二苯羟乙酸奎宁酯(3HQNB)亲和活性的种属差异性。方法:运用放射性配基受体结合法测定不同动物心房肌和心室肌M受体密度及解离常数(Kd)值。结果:①大鼠心房M受体的分布密度约为心室的3.0倍,家兔心房是心室的4.0倍,而豚鼠心房是心室的1.7倍。②M受体在不同种动物心房肌密度排序:家兔>大鼠>豚鼠。心室肌密度排序:豚鼠>大鼠>家兔。Kd值在心房、心室及种间均无统计学差异。结论:①M受体在大鼠、豚鼠和家兔心脏的分布密度不仅具有房室间差异性,而且还有种间差异性。②M受体与其阻断剂3HQNB亲和活性的种间差异性不明显。

川产姜科植物姜黄Castrin/CCk-B受体活性物质的初步研究

应用受体结合法对姜黄的125I-Gastrin受体结合抑制成分进行追踪分离,发现姜黄块根及根茎的提取部分的不同组分均有一定的125I-Gastrin受体特异结合抑制活性,提示姜黄可能含有胃泌素受体的专一性激动剂或专一性拮抗剂。

不同中医治法对帕金森病LD大鼠D_2受体变化影响的研究

目的观察不同中医治法对LD模型大鼠多巴胺D2受体活性的影响。方法用6-羟基多巴胺注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病(Parkinson,s disease,PD)模型,进一步腹腔注射左旋多巴(L-dihydroxy-phenylalanine,LD)制备LD模型。实验设立正常对照组、假手术组、PD模型对照组、LD模型组、平肝息风组、活血组、化痰组,连续治疗2,4,6周。采用放射性受体结合法测定大鼠纹状体多巴胺D2受体的最大结合容量(maximum binding capacity,Bmax)。结果正常对照组和假手术组大鼠纹状体多巴胺D2受体Bmax值在各时间段均无明显变化。LD模型组、PD模型对照组和各中药组的损毁侧在不同的时间段,多巴胺D2受体Bmax值均呈下降趋势,其中4周、6周与2周比较,差异均有显著性意义(P﹤0.01);6周与4周比较有下降趋势但差异不具有统计学意义(P﹥0.05)。LD模型大鼠健侧纹状体多巴胺D2受体Bmax值,亦有逐渐下降趋势,其中4周、6周与2周比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05或P﹤0.01)。结论不同时间段各中药组可显著改善纹状体多巴胺D2受体活性,缓解左旋多巴的毒副反应。

胆汁胆固醇对胆囊收缩素受体表达的影响

目的 :探讨胆汁胆固醇对胆囊收缩素受体 (CCK R)表达的影响。方法采用放射免疫分析法和受体放射配基结合法检测对照组、高胆固醇组、自然恢复组及治疗组豚鼠门静脉血CCK水平、胆囊CCK R的最大结合容量(Bmax)和亲和力 (Kd) ,同时观察空腹胆囊体积 (FV)、胆囊胆汁量 (FB)和餐后胆囊体积 (RV)、胆囊胆汁量 (RB)及胆囊收缩率 (E % )、胆汁胆固醇浓度的变化。结果与对照组比较 ,高胆固醇组豚鼠FV、FB增大 (P <0 .0 5 ) ,RV、RB也增大 ,胆囊收缩率下降 (P <0 .0 1) ,胆汁胆固醇浓度升高 (P <0 .0 5 ) ,门静脉血CCK水平及CCK R的Kd无改变 ,而CCK R的Bmax下降 (P <0 .0 1) ;治疗组上述各项指标正常。结论胆汁中的高胆固醇通过下调胆囊CCK R表达而导致胆囊收缩功能障碍 。

平律复方抗实验性心律失常的作用及其机理研究

目的:研究平律复方(PL)抗实验性心律失常的作用,并初步探讨其作用机理。方法:采用氯仿、氯化钙以及心肌缺血再灌注三种心律失常动物模型,监测标准Ⅱ导联心电图;测定缺血再灌注大鼠血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;放射配基受体结合法分析心肌组织血小板激活因子(plate-let activating factor,PAF)受体蛋白表达水平;RT-PCR法检测PAF受体mRNA表达水平;测定心肌脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:PL(ig,0.04、0.20、1.00 g.kg-1)对氯仿引起的小鼠心室纤颤有一定的保护作用;能减少氯化钙致大鼠室颤的发生率,降低死亡率;可显著降低心肌缺血再灌注大鼠心律失常的发生率,缩短持续时间,与模型对照组比较,PL小、中、大剂量组心肌CK和LDH分别降低了35.4%、51.8%、57.5%和22.4%、34.4%、38.4%;剂量依赖性下调心肌细胞PAF受体蛋白及mRNA表达水平,升高心肌SOD活性、降低MDA含量。结论:PL对氯仿、氯化钙以及心肌缺血再灌注诱发的心律失常均有较好的保护作用,其作用机制可能与下调心肌细胞PAF受体水平,抑制脂质过氧化有关。

许旺细胞源神经营养因子受体在外周神经组织中的分布研究

目的 探讨许旺细胞源神经营养因子 (SDNF)受体在外周神经的分布状况。 方法 应用放射性受体结合法检测外周神经组织中12 5Ⅰ SDNF的特异性结合。 结果 外周神经组织中存在许旺细胞源神经营养因子的特异性结合位点 ,且该特异性结合位点具有如下特点 :( 1)高亲和力 ,Kd为( 93 .11± 0 .5 2 ) pmol/L ;( 2 )低结合容量 ,Bmax为 ( 8 91± 0 2 6)fmol/mg ;( 3 )可饱和性 ,饱和曲线呈双曲线型 ,Scatchard分析的回归线呈直线 ;( 4 )可逆性 ,结合常数K1为 ( 3 91± 0 63 )× 10 7M 1×min 1,解离常数K 1为 ( 3 3 8± 0 5 4)× 10 3 min 1;( 5 )特异性。 结论 外周神经组织中存在许旺细胞源神经营养因子的高亲和力受体 ,故为许旺细胞源神经营养因子发挥神经营养作用的靶组织。

大豆皂苷及相关化合物的雌激素样作用

以受体结合法、基因表达法检测大豆皂苷及相关化合物的雌激素样作用。受体为人的hER α、β,受试物为大豆皂苷Ⅰ、大豆皂醇B单葡糖醛酸苷(SBMG)及大豆皂醇B。 结果与讨论:3种化合物对hERβ均显示弱的结合能,其结合能与金雀异黄苷相同。其中。

内啡素与运动

一、内啡素研究进展1971年,Goldlstein用放射受体结合法证明脑内有特异性的阿片结合.1973年,Simon Snyder Terenins三家实验室分别用高比活性的阿片配基证明了脑内阿片受体的存在.由此人们推想机体内应存在内源性的阿片物质.1975年。