止麻消痰活血汤对老年心肌梗死大鼠神经调节蛋白-1/受体酪氨酸蛋白激酶erbB3通路及心室重构的影响

目的 探讨止麻消痰活血汤对老年心肌梗死大鼠神经调节蛋白-1(NRG-1)/受体酪氨酸蛋白激酶erbB3(ErbB3)通路及心室重构的影响。方法 研究起止时间为2019年2—10月,大鼠来源于上海邦耀生物公司。制备老年心肌梗死模型大鼠,以随机数字表法分为模型组、止麻消痰活血汤低中高剂量组(10 mL/kg、20 mL/kg、30 mL/kg)、地尔硫‰组(2.61 mg/kg),每组12只,另取12只SD老年大鼠设为假手术组,分组处理后,测定各组大鼠左心室质量指数;苏木精-伊红(HE)、马松(Mosson)染色分别检测大鼠心肌病理形态变化及心室纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白质印迹法检测大鼠心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心肌纤维扭曲、断裂,心肌细胞肥大、坏死,可见炎性细胞浸润等病理损伤,且胶原纤维显著增多,纤维化严重,血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平、左心室质量指数[(23.27±1.84)‰比(12.23±0.85)‰]显著升高(P<0.05),心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白NRG-1[(0.30±0.04)比(2.16±0.37)]、p-ErbB3/ErbB3[(0.09±0.02)比(1.02±0.20)]显著降低(P<0.05);与模型组比较,止麻消痰活血汤低、中、高剂量组、地尔硫‰组大鼠病理损伤及纤维化症状得到改善,血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平、左心室质量指数[(19.92±1.47)‰、(16.36±1.06)‰、(12.89±0.87)‰、(12.84±0.86)‰比(23.27±1.84)‰]降低(P<0.05),心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白NRG-1[(0.94±0.18)、(1.27±0.23)、(2.09±0.31)、(2.11±0.33)比(0.30±0.04)]、p-ErbB3/ErbB3[(0.27±0.04)、(0.51±0.08)、(0.92±0.16)、(0.94±0.18)比(0.09±0.02)]升高(P<0.05),且止麻消痰活血汤组间有剂量依赖性(P<0.05);与地尔硫‰组相比,止麻消痰活血汤高剂量组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 止麻消痰活血汤可激活NRG-1/ErbB3通路,减轻心肌梗死大鼠炎症,缓解其心肌组织病理损伤及纤维化变性,改善大鼠心室重构症状。

奥氮平介导环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体B通路对精神分裂模型大鼠的神经修复作用

目的 探讨奥氮平通过对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)通路的影响对精神分裂模型大鼠的神经修复作用。方法 将60只大鼠纳入对照组、模型组、奥氮平低、中、高剂量组,各组均10只。模型组、奥氮平低、中、高剂量组大鼠进行MK-801腹腔注射0.2 mg/(kg·d),对照组注射等量生理盐水。模型建立成功24 h后,奥氮平低、中、高剂量组分别以0.5、1.0、1.5 mg/(kg·d)奥氮平溶液灌胃,对照组、模型组同剂量生理盐水灌胃。按照共济失调和刻板行为标准对大鼠行为学进行评分;Morris水迷宫实验评定大鼠认知功能及学习能力;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;观察海马组织病理学变化;检测海马区细胞凋亡及CREB/BDNF/TrkB通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠共济失调、刻板行为评分、TNF-α、IL-6表达、细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠跨越平台次数、目标象限停留时间、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)、磷酸化TrkB(p-TrkB)、TrkB、BDNF蛋白相对表达极显著减少(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著减少(P<0.05)。与模型组比较,奥氮平低、中剂量组跨越平台次数、目标象限停留时间显著增加(P<0.05),奥氮平高剂量组极显著增加(P<0.01)。模型组以及奥氮平低剂量组中海马细胞肿大明显、细胞核破碎分裂、固缩,组织排列杂乱;奥氮平中、高剂量组大鼠海马细胞中少见破碎分裂以及核固缩现象,整体组织与对照组大鼠相似。结论 奥氮平对精神分裂症模型大鼠的神经修复作用机制涉及到改善大鼠认知功能受损、保护大鼠海马神经细胞以及激活CREB/BDNF/TrkB信号通路的表达。

受体酪氨酸蛋白激酶Tyro3在大鼠脑的表达及定位分析(英文)

目的:分析受体酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)亚家族TAM(Tyro3、Axl和Mer)在大鼠脑中的表达模式及细胞定位,并进一步探讨TAM在脑中表达的意义。方法:分别提取出生后3、9、15、30及52 d龄SD大鼠脑组织总RNA和总蛋白,实时定量PCR(real time quantitative PCR)检测TAM mRNA水平的表达,Westernblotting检测TAM蛋白水平的表达,免疫组织化学染色检测Tyro3蛋白在大鼠脑中的定位。结果:Tyro3 mRNA在脑的表达水平显著高于Axl及Mer,从生后15 d龄开始有明显表达,随后呈现明显上调趋势,至生后52 d龄Tyro3mRNA的表达量达到15 d的3.2倍。Tyro3蛋白的表达水平也呈明显上调趋势,从生后15 d龄开始到52 d龄,Ty-ro3蛋白的表达量显著增高,生后52 d龄Tyro3蛋白的表达量是15 d龄的1.3倍;免疫组织化学染色结果显示Ty-ro3蛋白主要分布于皮层细胞,梨状皮层和海马区细胞内有Tyro3蛋白的强阳性着色;在亚细胞水平,Tyro3蛋白存在于锥体神经元的胞质和树突部分。结论:TAM受体酪氨酸蛋白激酶家族Tyro3基因及其编码产物在大鼠脑组织发育过程中呈阶段性上调表达,并且Tyro3蛋白在海马神经元胞体及轴突有显著高表达,提示Tyro3蛋白可能通过受体酪氨酸蛋白激酶信号转导途径参与了脑突触功能的调控。

美金刚联合丰富环境对快速衰老小鼠海马脑源性神经营养因子、酪氨酸蛋白激酶受体B表达及学习记忆能力的影响

目的探讨美金刚联合丰富环境对快速衰老小鼠（SAMP8）海马脑源性神经营养因子（BDNF）、酪氨酸蛋白激酶受体B（TrkB）表达及学习记忆能力的影响。方法24只雄性SAMP8小鼠随机分为对照组、丰富环境治疗组（丰富环境组）、美金刚治疗组（美金刚组）和美金刚联合丰富环境组（联合治疗组），每组6只小鼠。治疗8周后，采用Morris水迷宫试验检测小鼠空间学习记忆能力，免疫印记法和实时定量PCR法检测小鼠海马组织中BDNF、TrkB的表达水平。结果与对照组比较，丰富环境组、美金刚组小鼠在试验第3d起寻找到平台的潜伏期明显缩短，联合治疗组小鼠在试验第2d起的逃避潜伏期明显缩短（P〈0．05～0．01）；且联合治疗组小鼠在试验第4d时的逃避潜伏期明显短于丰富环境组和美金刚组（均P〈0．05）。与对照组比较，其余3组小鼠穿越平台次数明显增多（P〈0．05～0．01）；且联合治疗组小鼠穿越平台次数明显多于丰富环境组和美金刚组（均P〈0．01）。与对照组比较，其余3组小鼠海马BDNFmRNA、BDNF蛋白和TrkB蛋白的表达均明显升高（P〈0．05～0．01），其中联合治疗组明显高于丰富环境组与美金刚组（P〈0．05～0．01）。各组小鼠海马TrkBmRNA表达的差异无统计学意义。结论美金刚和丰富环境治疗能够有效地改善SAMP8小鼠学习记忆能力并增加海马BDNF和TrkB的表达，二者联合治疗时效果更显著。

酪氨酸蛋白激酶在不同α_1肾上腺素受体亚型Ca^(2+)调控中的作用

目的 了解酪氨酸蛋白激酶信号途径在不同α1肾上腺素受体亚型Ca2 +调控中的作用。方法 用Fura 2荧光探针双波长测定细胞胞浆游Ca2 +浓度 ([Ca2 +]i)的方法 ,在分别转染了α1A、α1B和α1D肾上腺素受体cDNA的HEK2 93细胞 ,观察酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein和磷脂酶C抑制剂U7312 2 对激动不同α1肾上腺素受体亚型引起的 [Ca2 +]i 变化的影响。结果 预先用U7312 2 (0 1,10 ,5 0 μmol·L-1)与细胞共同孵育 10min ;用Genistein(10 ,10 0 ,2 0 0 μmol·L-1)与细胞共同孵育 1h。在分别转染了α1A、α1B和α1DcDNA的HEK2 93细胞 ,U73 12 2 和Genistein均能浓度依赖性地抑制肾上腺 (10 μmol·L-1)引起的双相 [Ca2 +]i 的升高。在上述细胞 ,U7312 2 (5 0 μmol·L-1)能完全抑制肾上腺素引起的[Ca2 +]i 升高 ;而用最大有效浓度 10 0 μmol·L-1的Genistein只能部分抑制肾上腺素升高 [Ca2 +]i 的作用。结论 在HEK 2 93细胞 ,不同α1肾上腺素受体亚型 (α1A α1B和α1D)激动均能部分通过酪氨酸蛋白激酶信号途径引起Ca2 +释放和Ca2 +内流。

受体酪氨酸蛋白激酶的研究

酪氨酸蛋白激酶是细胞信号转导的主要信号酶之一,对细胞的生长、发育与功能调控起着重要的作用。受体型酪氨酸蛋白激酶是细胞内段具有酪氨酸激酶活性跨膜结构的酶蛋白受体,其胞外区与生长因子配体结合,然后激活胞内段的酶活性区启动信号转导,参与细胞的生长、增殖、转化及胚胎发育和肿瘤形成。主要介绍受体型酪氨酸蛋白激酶的结构、分类及其信号转导途径。

二甲双胍对慢性暴露于高糖及高游离脂肪酸的HIT-T15细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性的影响

目的观察二甲双胍(MF)对慢性高糖和高脂处理后的HIT-T15细胞(β细胞系)胰岛素受体(IRc)酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性的影响,探讨MF对β细胞糖脂毒性,即β细胞胰岛素抵抗的改善作用机制。方法实验分为对照组、对照+MF组、高糖组、高糖+MF组、高脂组、高脂+MF组。将HIT-T15细胞分别接种于含有5.5mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖(G)及0.5 mmol/L软脂酸的培养液中,培养48 h后,加入2.5μg/mL MF干预24h。用放射性酶分析法测定β细胞IRc TPK活性。结果高糖〔(52.5±18.6)pmol/(min.μg)〕和高脂组〔(54.6±14.0)pmol/(min.μg)〕HIT-T15细胞IRc TPK活性分别较对照组〔(119.4±29.1)pmol/(min.μg)〕降低(P<0.01);予2.5μg/mL MF干预24 h后,高糖和高脂组IRc TPK活性较干预前增高〔(113.0±29.8)vs(52.5±18.6)pmol/(min.μg),P<0.01;(98.6±26.1)vs(54.6±14.0)pmol/(min.μg),P<0.01〕,且与对照组相比差异无统计学意义。MF对对照组HIT-T15细胞IRc TPK活性无明显影响。结论高糖和高脂可抑制β细胞IRcTPK活性。MF能明显改善受高糖及高脂所抑制的HIT-T15细胞IRc TPK活性,且恢复到接近正常水平。提示MF对糖脂毒性所致β细胞胰岛素抵抗的改善作用可能与增加IRc TPK活性有关。

酪氨酸蛋白激酶受体B在人卵泡中的表达及意义

目的探讨酪氨酸蛋白激酶受体B(tyrosine kinase receptor B, TrkB)在人卵泡中的表达及意义。方法用免疫细胞化学方法检测TrkB在超促排卵妇女壁层颗粒细胞、卵丘颗粒细胞、未受精或未成熟卵母细胞中的表达,并用Western免疫印迹方法检测TrkB在壁层颗粒细胞、卵丘颗粒细胞中的表达水平。结果壁层颗粒细胞、卵丘颗粒细胞、卵母细胞均有TrkB表达。壁层颗粒细胞表达量高于卵丘颗粒细胞。结论脑源性神经营养因子在人卵巢可能通过与TrkB结合,参与颗粒细胞功能的完成和卵母细胞发育的调控。

加味温胆汤对脑缺血再灌注损伤大鼠酪氨酸蛋白激酶2与信号转导子和转录激活子3蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的探讨加味温胆汤对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)与信号转导子和转录激活子3(STAT3)蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法选用健康雄性SD大鼠120只,随机分为4组,每组30只。正常对照组无任何干预;假手术组仅切开颈部皮肤,暴露左侧颈总动脉;脑缺血再灌注模型组、加味温胆汤治疗组均采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型,然后分别给予蒸馏水灌胃和加味温胆汤灌胃。分别于缺血再灌注后3、12、24、48、72 h对各组大鼠进行神经功能Zea Longa评分并检测脑组织JAK2、STAT3蛋白表达及神经细胞凋亡情况。结果 (1)正常对照组及假手术组大鼠无神经功能缺损表现;脑缺血再灌注模型组、加味温胆汤治疗组大鼠均出现神经功能缺损,Zea Longa评分均高于正常对照组及假手术组(P<0.05)。(2)与正常对照组、假手术组大鼠相比,各时间点脑缺血再灌注模型组、温胆汤加味治疗组大鼠磷酸化JAK2、磷酸化STAT3灰度值明显降低(P<0.05),缺血再灌注后24 h温胆汤加味治疗组磷酸化JAK2、磷酸化STAT3灰度值表达高于脑缺血再灌注模型组(P<0.05)。(3)与正常对照组及假手术组大鼠比较,各时间点脑缺血再灌注模型组、加味温胆汤治疗组大鼠脑细胞凋亡率明显升高(P<0.05),而缺血再灌注后24 h加味温胆汤治疗组大鼠脑细胞凋亡率低于脑缺血再灌注模型组(P<0.05)。结论脑缺血再灌注引发JAK2、STAT3通路激活加重神经细胞损伤和凋亡,加味温胆汤可通过抑制JAK2/STAT3通路活化减少神经细胞凋亡,从而减轻CIRI。

人红细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性的测定

目的:建立红细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶(IRTK)的活性测定法。方法:应用IRTK催化的聚(谷,酪)4:1的磷酸化产物作为抗原,抗磷酸酪氨酸抗体作为第一抗体,羊抗兔lgG-HRP作为第二抗体,建立酶联免疫吸附测定法。结果:批内变异系数为7.8%,批间变异系数为8.6%。20例健康人的红细胞IRTK活性值为(0.184±0.026)nmolPY/(min.mg受体蛋白),36例2型糖尿病患者中有5例活性低于正常范围。胰岛素在10^(-6)mol/L时对IRTK的激活达到最大限度,Mn^(2+)是IRTK的激活剂。结论:此法灵敏、定量、准确、简便,是深入研究糖尿病及其它胰岛素抵抗综合征病因及治疗的一个极有用的检测方法。

神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体AmRNA在创伤咬合犬牙周组织中的表达

目的研究咬合创伤时犬牙周组织中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其酪氨酸蛋白激酶受体A(tyrosine ki-nase A,trkA)mRNA表达水平的变化,探讨咬合创伤致口面痛的可能机制.方法高出咬合面1.5 mm的镍铬合金嵌体黏固于18只杂种犬右侧上颌第一、二磨牙咬合面的Ⅰ类洞形内,造成对(牙合)牙的创伤.黏固嵌体后3、7、14、30、60 d时拔除双侧上下颌磨牙并立即刮取牙周膜组织.用逆转录(RT)-PCR检测牙周膜组织中NGF及trkA mRNAs表达水平并与无咬合创伤的对照组作比较.结果①咬合创伤3 d起,创伤侧牙周组织内NGF mRNA急剧升高,14～30d时表达水平最高,30d时NGF mRNA是对照侧及对照组的3.0倍,60d时表达量下降.3～7d对照侧牙周组织NGF mRNA也上调(P＜0.05).②trkA mRNA表达水平的变化规律同NGF mRNA,trkA mRNA在30 d时表达水平最高.③观测时间内,创伤侧NGF和trkA mRNAs的表达水平高于对侧(P＜0.01),分别从咬合创伤3 d和7 d起高于对照组(P＜0.05).结论咬合创伤能导致牙周膜内NGF及trkA mRNA表达水平上调.单侧咬合创伤能导致双侧牙周组织NGF、trkA mRNA表达水平的改变.

酪氨酸蛋白激酶EphB_2受体在几种癌组织中的表达

目的:检测酪氨酸蛋白激酶EphB2受体在不同癌组织中的表达情况,探讨其与恶性肿瘤形成的关系。方法:从各组织中提取总RNA,设计目的基因引物和内参照GAPD引物。采用RT-PCR方法,分别检测胃癌、结肠癌、肺癌、肝癌、肾癌、脾癌、腹壁癌7种肿瘤组织及相应邻近正常组织中EphB2受体的表达,应用Bio-RAD凝胶成像系统及在QuantityOne软件辅助下分析测定表达结果。结果:EphB2在7种癌组织中均有表达,以胃癌组织中表达最高,其余依次为结肠癌、肺癌、肝癌、肾癌、脾癌、腹壁癌。在正常组织中未见表达。结论:酪氨酸蛋白激酶EphB2受体在恶性肿瘤的发生中扮演重要角色。

Eph/Ephrin-B1通过Src酪氨酸激酶/丝裂原活化蛋白激酶信号抑制睫状神经节神经元的尼古丁乙酰胆碱受体电流

本研究旨在探讨Eph/Ephrin-B1信号对急性分离的鸡胚睫状神经节(ciliary ganglion,CG)神经元上α3-尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,α3-nAChRs)和α7-尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,α7-nAChRs)电流的影响及可能机制。用膜片钳技术在急性分离的CG神经元上分别记录α3-nAChRs和α7-nAChRs全细胞电流。为检测Ephrin-B1对细胞nAChRs电流的影响,细胞被随机分为:对照组、Ephrin-B1Fc处理组(用Ephrin-B1与IgG重组后形成的Ephrin-B1Fc刺激细胞)、IgG处理组(用与Ephrin-B1Fc处理组重组所需的相同浓度的IgG刺激细胞)和Ephrin-B1处理组(用与Ephrin-B1Fc处理组重组所需的相同浓度的Ephrin-B1刺激细胞)。为探讨Ephrin-B1调节细胞nAChRs电流的机制,分别用Src信号抑制剂PP2和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号抑制剂PD98095预处理细胞后,再用Ephrin-B1Fc处理细胞,观察α3-nAChRs和α7-nAChRs电流的变化,细胞被随机分为:对照组、Ephrin-B1Fc处理组、PP2或PD98095(PP2/PD)处理组、Ephrin-B1Fc+PP2或PD98095处理组。结果显示:对照组、IgG处理组和Ephrin-B1处理组之间α3-nAChRs和α7-nAChRs电流无显著差异,而Ephrin-B1Fc处理组可显著抑制α3-nAChRs和α7-nAChRs电流,与对照组比较有显著差异(P=0.002、P=0.003);此外,PP2可部分恢复被Ephrin-B1Fc所抑制的α7-nAChRs电流,PD98095则可部分恢复被Ephrin-B1Fc所抑制的α3-nAChRs电流。以上结果提示,Eph/Ephrin-B1信号可能分别通过MAPK和Src信号途径抑制急性分离的CG神经元上α3-nAChRs和α7-nAChRs的电流,表明Eph/Ephrin-B1可能参与交感神经系统功能的调控。

子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体A7和星形胶质细胞上调基因-1的表达及相关性

目的应用免疫组化方法检测子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体(Eph)A7和星形胶质细胞上调基因(AEG)-1的表达特征,探讨二者与临床病理特征的关系。方法观察组为57例确诊为子宫内膜样腺癌并行手术根治的患者,对照组1为子宫内膜复杂性增生伴不典型增生21例,对照组2为子宫内膜复杂性增生不伴不典型增生21例,对照组3为子宫脱垂后行子宫全切后15例,均留取术后子宫内膜的蜡块组织,Eph A7和AEG-1的表达均应用免疫组化SP法检测。结果 4组Eph A7和AEG-1表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。观察组Eph A7和AEG-1表达与肿瘤增殖指数、肿瘤最大径相关;AEG-1表达与肿瘤浸润深度密切相关。二者均与年龄、肿瘤分化程度及淋巴结转移无明显相关性。相关分析显示观察组Eph A7和AEG-1表达呈正相关。结论 Eph A7和AEG-1在子宫内膜样腺癌中的表达升高,二者具有正向协同作用,共同促进肿瘤的形成和进展。

TNFα对小鼠骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活力影响

目的观察肿瘤坏死因子α(TNFα)对KM小鼠骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力的影响。方法80只清洁级KM小鼠随机分为TNFα高剂量连续注射组(TH组,n=20)、TNFα低剂量连续注射组(TL组,n=20)、TNFα高剂量一次注射组(T1组,n=20)和正常对照组(C组,n=20)。密度梯度离心分离组织细胞膜,麦胚凝集素(WGA)亲和柱层析纯化膜胰岛素受体,外源聚谷-酪多肽底物同位素32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力,观察各组胰岛素刺激前后的离体骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化。结果1)TH和TL组基础(无胰岛素刺激)骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力均明显低于C组,且TH组明显低于TL组(P均<0.01);2)TH组和TL组胰岛素刺激的骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化值均明显低于C组,且TH组明显低于TL组,(P均<0.01);3)T1组无论基础还是胰岛素刺激的骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化值均与C组无显著差别(P>0.05)。结论TNFα可抑制组织细胞膜胰岛素受体TPK活力,在组织细胞膜胰岛素受体信号转导障碍中发挥重要作用。TNFα抑制组织细胞膜胰岛素受体TPK活力,需连续刺激,一次刺激作用效果不明显。

酪氨酸蛋白激酶在β受体激动增加eNOS活性信号通路中的作用

体外培养人脐静脉内皮细胞;采用同位素两步色谱法检测eNOS活性,观察PTK特异性阻断剂Ty-phostin23(T23,1×10-4mol/L)及其无活性衍生物Typhostin1(T1,1×10-4mol/L)与人脐静脉内皮细胞孵育10min,再与异丙肾上腺素(ISO,1×10-6mol/L)孵育30 min后eNOS活性变化。结果ISO与人脐静脉内皮细胞孵育30 min后eNOS活性明显增加(30.7±3.9)%,P<0.001;Typhostin23阻断PTK后,ISO诱导的eNOS活性增加受到明显抑制,P<0.001,而Typhostin1不影响ISO激活eNOS的程度(28.9±3.75)%,P>0.05。证实酪氨酸蛋白激酶参与了ISO激活eNOS活性的过程。

丝/酪氨酸蛋白激酶PIM3在小鼠眼部组织的表达及分布

目的探讨丝/酪氨酸蛋白激酶PIM3在小鼠眼部组织中的表达。方法应用逆转录-聚合酶链反应及免疫组化检测PIM3在小鼠眼部组织中的表达。结果逆转录-聚合酶链反应可在正常C57/BL小鼠全眼球及角膜中检测到PIM3 mRNA的表达。免疫组化染色显示在小鼠眼部角膜上皮细胞、视网膜及眼外肌中有PIM3蛋白的表达。结论正常小鼠眼部有PIM3基因及蛋白水平的表达,提示PIM3可能在眼部具有一定的功能。