神经生长因子受体TrkA在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓表达差异的研究

为了探讨神经生长因子 ( NGF)受体 Trk A在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓的分布状况、进而分析 NGF的作用机制 ,用免疫组化技术检测了新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓 NGF受体 Trk A的表达。结果显示 ,新生鼠脊髓前角运动神经元只有胞核 Trk A表达明显 ,胞浆及胞膜无表达 ,中间带、背角均无表达。幼鼠前角运动神经元胞浆 Trk A表达明显 ,胞核少量表达 ,胞膜无表达 ;部分中间带、背角神经元胞浆有表达。成鼠前角运动神经元胞浆及部分胞膜都有 Trk A表达 ,胞核无表达 ,中间带、背角神经元胞浆以及胶质细胞也明显表达。推论 ,新生鼠时胞核中 Trk A可与配体结合引起神经元的生物效应 ;成鼠 Trk

NGF及其受体trkA及p75NTR在子宫内膜异位症患者在位内膜中的表达及其与内异症疼痛的关系

目的:研究子宫内膜异位症(内异症)患者在位内膜神经生长因子(NGF)及其受体trkA、p75NTR的表达,探讨上述因子与内异症疼痛的关系。方法:选择就诊于北京协和医院并进行了腹腔镜手术的28例子宫内膜异位症患者作为研究组,非子宫内膜异位症患者10例作为对照组(B组),收集上述患者分泌期在位子宫内膜。根据患者有无痛经,分为内异症疼痛组(A1组,18例)及内异症非疼痛组(A2组,10例)。采用免疫组化比较各组病灶中NGF及其受体trkA、p75NTR的表达,并分析其与痛经的关系。结果:各组在位内膜腺上皮中NGF的表达显著高于间质(P<0.05);内异症疼痛组腺上皮NGF表达较非疼痛组明显升高(359.9±18.7 vs 201.3±34.3,P<0.05)。p75NTR主要在子宫内膜间质细胞中表达;内异症组明显高于非内异症组(58.8±21.1、22.5±16.1 vs 0,P<0.05);内异症疼痛组较非疼痛组p75NTR表达明显升高(58.8±21.1 vs 22.5±16.1,P<0.05)。trkA在非内异症组子宫内膜间质中表达明显高于腺上皮(P<0.05);在内异症组腺上皮中,trkA的表达较非内异症组明显增高(P<0.05);trkA的表达量与内异症患者疼痛无关。结论:p75NTR可能参与内异症的发病,NGF及其受体p75NTR在在位内膜中的表达与患者疼痛相关,表明其可能参与了内异症疼痛发病机制。

试析神经生长因子受体TrkA在卵巢上皮性肿瘤中的表达

目的 分析神经生长因子受体TrkA（酪氨酸蛋白激酶A）在卵巢上皮性肿瘤中的表达情况。 方法 选2014年3月至2016年3月本院收治的50例卵巢癌患者，均对患者行免疫组织化学方法检测组织内的TrkA蛋白表达情况，对卵巢（良性、恶性）上皮性肿瘤组织内TrkA蛋白的表达水平、病理特征。 结果 检测结果发现：TrkA蛋白于恶性卵巢上皮性肿瘤中，强阳性表达率100.00%；交界性中表达率强阳性表达率 54.55 %，弱阳性表达率45.45%；良性中仅6例（13.04%）表达呈弱阳性；各表达水平比较差异明显（ P ＜ 0.05 ）。TrkA蛋白在良性肿瘤中的浆液性表达率18.75%，与黏液性表达率14.29%相比，差异无统计学意义（ P 〉 0.05 ）；交界性浆液性表达率61.54%，与黏液性33.33%相比，有差异性（ P ＜ 0.05 ）。 结论 神经生长因子受体TrkA在卵巢上皮性肿瘤中，和肿瘤组织有关，其表达情况和恶性肿瘤发生及发展相关，为临床诊治卵巢癌提供参考依据。

寻常性银屑病患者瘙痒与无瘙痒皮损中神经生长因子及其受体TrkA的表达

瘙痒为银屑病患者中常见的症状，据报道约80％银屑病患者伴有瘙痒，为所有症状中令患者最痛苦的，占81．8％。我们通过检测瘙痒与无瘙痒的寻常性银屑病患者皮损处神经生长因子（NGF）及其高亲和力p140受体（即TrkA）表达分布情况，探讨NGF和TrkA是否在银屑病瘙痒发生过程中发挥作用。

早期干预与TrkA受体在脑损伤修复中的作用

目的:研究早期干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑功能的影响及其与神经生长因子TrkA受体表达的关系。方法:将HIBD大鼠分为干预(H1)组和非干预(H0)组,用跳台试验检测各组大鼠学习记忆能力,并用酶免疫组织化学技术检测TrkA受体的表达情况。结果:H0组错误反应潜伏期较正常对照组明显缩短,而H1组的学习记忆能力则明显提高。同时,H1组额皮质和海马CA3区TrkA受体阳性神经元数目明显多于H0组。结论:早期干预方法可提高HIBD大鼠学习记忆能力,其促进脑功能修复的机制与提高脑神经细胞TrkA受体表达有关。

辣木叶发酵物通过NGF/TrkA通路调控LC3、Beclin-1表达改善血管性痴呆小鼠学习记忆能力和神经功能

目的探究辣木叶发酵物通过神经生长因子(NGF)/神经营养因子受体A型(TrkA)通路调控微管相关蛋白1A/1B-轻链(LC)3、Beclin-1表达改善血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆能力和神经功能。方法150只BALB/c小鼠随机分为5组:对照组,VD组,辣木叶发酵物低、中、高剂量组(辣木叶发酵物100、200、400 mg/kg灌胃干预),各30只。通过Himori法制备VD小鼠模型。28 d后进行水迷宫实验分析学习记忆功能。比较各组海马体损伤、LC3、Beclin-1、NGF、TrkA mRNA和蛋白表达水平。结果VD组目标象限停留时间、穿越平台次数、NGF、TrkA mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组,而海马组织损伤及海马组织中LC3、Beclin-1 mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。辣木叶发酵物干预后,目标象限停留时间、穿越平台次数、NGF、TrkA mRNA和蛋白表达水平显著升高,其中辣木叶发酵物高剂量组>辣木叶发酵物中剂量组>辣木叶发酵物低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05);海马组织损伤及海马组织中LC3、Beclin-1 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),其中辣木叶发酵物高剂量组<辣木叶发酵物中剂量组<辣木叶发酵物低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论辣木叶发酵物能够保护VD小鼠学习记忆功能,促进海马神经元中NGF/TrkA通路并抑制自噬。

神经生长因子及其受体在人胚胎结肠神经系统中的表达与分布

目的:研究人胚胎结肠神经系统的发育过程中神经生长因子(NGF)与其两个受体TrkA、P75NTR在结肠神经系统中的分布及与结肠神经系统发育的关系。方法:采用一抗为PGP9.5、NGF、TrkA、P75NTR的免疫组织化学技术,显示结肠神经系统中的神经元。结果:随着胚胎结肠神经系统的发育,P75NTR表达水平不断下降,而NGF、TrkA表达水平不断上升,P75NTR与NGF、TrkA的比例在不断变化。结论:NGF、TrkA、P75NTR参与了结肠神经系统的发育。

甲状腺激素通过NGF及TrKA调节中枢胆碱能神经元发育

目的探索甲状腺激素通过神经生长因子(NGF)及其受体TrKA对大鼠顶叶皮层、海马部位中枢胆碱能神经元发育的作用。方法将Wistar大鼠分为3组:①甲状腺功能减退(甲减)组:从母鼠妊娠5～6d起饲以含0.02%的他巴唑饮用水;②甲状腺功能亢进(甲亢)组:仔鼠出生即日起,按体质量腹腔注射T4(0.4μg/g);③对照组:饲以普通饲料及饮用水。于出生后第14、21、28天,免疫组化法检测大鼠顶叶皮层、海马中胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞,原位杂交法测定NGF、TrkA mRNA的表达。结果①出生后第21、28天顶叶皮层、海马中,甲减组(159.42±5.26、162.37±4.67,98.60±7.67、101.50±4.39)ChAT阳性细胞数较对照组(174.80±5.10、171.40±3.87,213.40±16.93、274.60±6.69)明显减少(P<0.05或<0.01),甲亢组(312.50±3.75、296.30±6.13,324.60±15.72、319.10±8.85)ChAT阳性细胞数较对照组明显增加(P<0.01);②对照组顶叶皮层、海马中,ChAT阳性细胞数、NGF、TrkA mRNA表达高峰期分别为第28、21、28天,甲亢组未见高峰期改变,而甲减组除TrkA mRNA表达高峰期未改变,仍为第28天外,ChAT阳性细胞数、NGF mRNA表达高峰期分别变为第21、28天;③在顶叶皮层、海马中,第14、21、28天NGF、TrkA mRNA表达甲减组均低于对照组(P<0.05或<0.01);第14、21天甲亢组与对照组相比,NGF mRNA明显升高(P<0.05或<0.01),TrkA mRNA各时点两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论胆碱能神经元在脑发育期内对甲状腺激素失衡十分敏感,NGF、TrkA mRNA在发育过程中的变化对中枢胆碱能神经元的存活、发育可能起一定的调节作用,甲状腺激素可能通过NGF及其受体TrkA调节海马及顶叶皮层中枢胆碱能神经元的发育。

针刺抗脑缺血再灌注损伤中TRkA对PSD-95表达的调节作用

目的在肯定针刺抗缺血性神经元凋亡的基础上,进一步探讨电针对大鼠局灶性脑缺血脑内PSD-95表达的影响。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞为局灶性脑缺血模型,以针刺穴位为治疗手段,用免疫组化SABC技术DAB显色的方法显示PSD-95受体。结果缺血组大鼠丘脑网状核阳性神经元的表达高于正常组的表达。电针组的表达低于缺血组。针刺对缺血侧神经元PSD-95表达的下调作用可以被TRKA的拮抗剂LY所抑制。结论针刺对缺血侧神经元PSD-95表达的下调作用与TRKA有关。

神经生长因子及其受体在卵巢癌中的作用

神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是神经营养因子家族的一种多肽激素,除能促进神经纤维的生长外,还可以通过自分泌和旁分泌的方式作用于某些特定类型的肿瘤组织,影响其发生、发展和转移。在卵巢癌中,NGF通过与其受体TrkA和p75NTR结合而促进肿瘤供给血管的生成,影响细胞因子的水平,在卵巢癌的发生、发展、侵袭和转移中发挥着不可忽略的作用。充分认识NGF的作用机制,将为其在肿瘤早期诊断、治疗及判定预后方面开辟新领域。

NGF/TrkA轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨神经生长因子(NGF)/原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养正常宫颈上皮细胞HUCEC和宫颈癌细胞SiHa,将SiHa细胞分为对照组(正常培养)、L-NGF组(50μg/L重组人NGF蛋白)、H-NGF组(100μg/L重组人NGF蛋白)、H-NGF+L-K252a组(100μg/L重组人NGF蛋白+50μg/L K252a)、H-NGF+H-K252a组(100μg/L重组人NGF蛋白+100μg/L K252a)。Western blot检测NGF、TrkA、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达;CCK-8法检测SiHa细胞增殖情况;流式细胞术检测SiHa细胞凋亡;划痕愈合实验测定细胞迁移;Transwell试验测定细胞侵袭。结果SiHa细胞较HUCEC细胞NGF、TrkA水平升高(P<0.01)。与对照组相比,L-NGF组、H-NGF组NGF、TrkA水平,增殖活力,迁移率,侵袭细胞数量以及N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著增加,凋亡率、E-cadherin蛋白水平显著下降(P<0.05),且H-NGF组较L-NGF组以上指标差异更显著(P<0.05);与H-NGF组相比,H-NGF+L-K252a组、H-NGF+H-K252a组NGF、TrkA水平,增殖活力,迁移率,侵袭细胞数量以及N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著降低,凋亡率、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),且H-NGF+H-K252a组较H-NGF+L-K252a组以上指标差异更显著(P<0.05)。结论下调NGF/TrkA轴可以抑制宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭,促进其凋亡。

神经生长因子-TrkA信号通路在疼痛中的作用机制及TrkA抑制剂的研究进展

TrkA是神经生长因子(NGF)的受体酪氨酸激酶,选择性结合NGF,除了在神经系统多种神经元的生长发育、分化和轴突形成过程中起关键作用外,神经生长因子及其功能性受体TrkA在疼痛的产生及维持过程中也起了重要作用。研究证明,阻断NGF-TrkA信号可有效抑制疼痛及痛觉过敏。对于疼痛的治疗,目前主要有3种针对NGF-TrkA信号的药理学方法:隔绝或消除内源性NGF、拮抗TrkA受体以阻止其与NGF结合、阻断TrkA激酶活性。以TrkA受体为靶点,应用TrkA抑制剂阻断TrkA信号可为更好治疗疼痛提供新方法。本文就TrkA受体在疼痛中的作用以及TrkA抑制剂的研究进展作一综述。

Snapin与TrkA相互作用对神经递质释放影响的研究

神经营养素能够影响脊椎动物神经元的增殖、分化、凋亡、存活等生命过程，但其功能的发挥则需要Trk和p75NTR两种膜受体的存在。TrkA受体是一种酪氨酸激酶受体，同其它酪氨酸激酶受体一样，其受体膜内区的酪氨酸磷酸化后，可以被其它信号分子识别，为信号的传导提供有关蛋白的募集位点。肝细胞生长因子的受体Met也是一种酪氨酸激酶受体，它的酪氨酸激酶区同TrkA相比具有37％的同源性，有报道发现Met与神经递质释放和内分泌过程中的一个关键调节蛋白——Snapin有相互作用，且Trk受体可以调节突触囊泡的胞吞和胞吐的过程，影响神经递质受体的活性，所以我们推测Snapin和TrkA之间也可能存在相互作用。在此前提下我们开展了一系列实验并且取得了初步的实验结果，通过酵母双杂交实验验证了TrkA的功能区TrkAICD、TrkA—ATP、TrkA-775、TrkA-790均能够与Snapin相互作用，免疫共沉淀实验也证明了TrkAICD与Snapin能够相互作用。

NGF与子宫内膜异位症痛经相关性的研究进展

继发性痛经是子宫内膜异位症的典型症状之一,严重影响妇女的生活质量和身心健康,但其机制至今尚未明确。近年研究发现,神经生长因子(NGF)在子宫内膜异位症病灶中异常表达与痛经的产生有一定相关性。现就NGF与痛经的相关机制进行文献综述。

蛴螬对激光损伤兔血-视网膜屏障后视网膜TekA、p75NTR表达的影响

目的:探讨蛴螬促进激光损伤兔血-视网膜屏障后的修复作用及机理。方法:30只成年健康有色家兔随机分为正常对照组、模型对照组、蛴螬组。采用激光损伤血-视网膜屏障动物模型,在屏障损伤后1周及2周2个时相,观察蛴螬对兔血-视网膜屏障损伤修复情况、血-视网膜屏障组织形态结构及神经营养因子受体TrkA、p75NTR表达及影响。结果:蛴螬能促进损伤的血-视网膜屏障修复,减轻激光导致的视网膜组织及细胞形态学损伤,促进TrkA、p75NTR的表达,抑制视网膜细胞增殖与变性,从而改善视网膜功能。结论:蛴螬可能通过改善视网膜组织能量代谢,清除氧自由基,促进神经营养因子受体的表达,抑制视细胞增殖,从而起到保护血-视网膜屏障组织结构,促进损伤后功能恢复的作用。

连续小剂量吗啡腹腔注射对CCI大鼠抗伤害效应的实验研究

目的观察坐骨神经慢性收缩损伤(CCI)后小剂量吗啡连续腹腔注射对大鼠痛敏的影响,以及脊髓背角c-fos基因及TrkA受体表达,探讨吗啡耐受的可能机制.方法选择雌性SD大鼠40只,随机分为4组,A组:假手术组,B组:CCI组,C组:CCI+生理盐水组,D组:CCI+吗啡组[5 mg/(kg·d)],分别于术前2 d,术后7、14 d进行热痛阈测试,免疫组织化学方法检测术后7、14 d c-fos基因及TrkA受体的表达.结果 A组术后术侧热痛阈轻度下降,与术前相比差异无显著性意义.B、C、D组术后术侧呈现不同程度热痛阈下降,以术后14 d为著,B、C组与A组相比,差异均有极显著性意义(均P<0.01),D组与A组相比,差异有显著性意义(P<0.05).CCI术后14 d脊髓c-fos基因、TrkA受体的表达较术后7 d明显增加,c-fos基因的表达主要集中于脊髓背角表层Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ层的中间内侧部,TrkA受体分布于Ⅱ～Ⅴ层.c-fos基因、TrkA受体的表达在B、C、D 3组与A组相比,差异具有显著性意义(P<0.05);D组与B组相比,差异无显著性意义(P>0.05).结论小剂量吗啡连续腹腔注射不能有效抑制坐骨神经损伤后热痛觉过敏及脊髓背角c-fos基因、TrkA受体的表达,可能与长时间使用吗啡导致脊髓背角神经元兴奋性进一步升高,发生中枢可塑性改变,以及脊髓背角神经元μ-阿片受体脱敏感有关.

非伤害性触摸刺激对慢性坐骨神经痛大鼠脊髓背角c-fos与TrkA受体表达的影响

本研究拟观察非伤害性触摸刺激对慢性坐骨神经损伤(CCI)大鼠脊髓背角c-fos及TrkA受体表达的影响,探讨脊髓在慢性神经痛产生和维持中的作用.

基于神经生长因子探讨温经活血汤治疗寒凝血瘀证原发性痛经的作用机制

目的基于神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及酪氨酸激酶受体A(TrkA)、p75营养因子受体(p75NTR)揭示原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的发病机理,探讨温经活血汤治疗原发性痛经的作用机制。方法将48只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为正常组(8只)和模型复制组(40只)。采用寒冷刺激联合苯甲酸雌二醇和缩宫素复制寒凝血瘀证痛经模型,模型复制成功后将大鼠随机分为模型组、西药布洛芬组(0.06 g·kg^(-1))和温经活血汤低、中、高剂量组(6.55、13.09、26.18 g·kg^(-1)),每组各8只。自模型复制第7天起所有大鼠分别给予温经活血汤、布洛芬和蒸馏水灌胃处理,每天1次,连续6 d。观察大鼠注射缩宫素后的扭体潜伏时间和30 min内扭体次数。提取大鼠子宫组织,蛋白质免疫印迹(Western Blot)法检测大鼠子宫组织中NGF、TrkA和p75NTR的蛋白水平;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测大鼠子宫组织中NGF、TrkA和p75NTR的mRNA表达。结果与正常组比较,模型组NGF、TrkA、p75NTR蛋白水平及mRNA表达均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠扭体潜伏时间均有所延长,但差异无统计学意义(P>0.05),扭体次数明显减少(P<0.01),NGF、TrkA、p75NTR蛋白水平及NGF、TrkA mRNA表达均明显降低(P<0.01),西药布洛芬组和温经活血汤中、高剂量组p75NTR mRNA表达降低(P<0.01)。结论温经活血汤治疗寒凝血瘀证原发性痛经的作用机制可能与其下调NGF、TrkA、p75NTR的表达有关。

trkA受体与中枢神经系统损伤

受体酪氨酸激酶A(trk A)与中枢神经细胞的再生和分化密切相关;不同原因引起的中枢神经系统损伤时trk A受体及其配基神经生长因子(NGF)表达增加。trk A受体表达增加对于中枢神经细胞损伤后存活及突触重建,形成神经环路和改善脑功能具有重要意义。