参麦汤对糖耐量低减大鼠脂联素、瘦素及脂联素受体R2mRNA表达的影响

目的:观察参麦汤对糖耐量低减(Impaired Glucoseolerance,IGT)大鼠脂联素(Adiponectim)、瘦素(leptin)及脂联素受体R2mRNA表达的影响。方法:高脂高糖饲料喂养结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素溶液的方法复制糖耐量低减大鼠模型;用参麦汤治疗;实验结束后颈动脉取血,采用酶免法测血清Adiponectim及leptin,应用RT-PCR方法测定大鼠肝组织脂联素受体R2mRNA的表达。结果:和正常组比较,模型组Adiponectim浓度降低,有显著性差异(P<0.05),leptin的浓度升高,有极显著性差异(P<0.001);与模型组比较,各干预组均可提高Adiponectim浓度、降低leptin水平,其中以参麦汤加运动组为著(P<0.01),参麦汤组(P<0.05)、运动组(P<0.05)亦有明显差异;与正常组相比,模型组大鼠脂联素受体R2mRNA表达明显降低(P<0.001),各治疗组与模型组相比,参麦汤加运动组、参麦汤组大鼠脂联素受体R2mRNA表达上升显著(P<0.001),运动组(P<0.05)次之。结论:在IGT阶段已经出现leptin、Adiponectim分泌异常,参麦汤能显著地降低leptin水平,提高Adiponectim水平,促进脂代谢,上调糖耐量异常大鼠肝脂联素受体R2mRNA表达。推测参麦汤能改善机体能量的调节和维持代谢稳态。

大鼠脂联素和脂联素受体R2 mRNA表达水平和与胰岛素抵抗

目的研究脂联素及脂联素受体R2 mRNA水平与胰岛素抵抗的关系。方法普通级雄性Wistar大鼠24只,随机分为高糖高脂组(A组)、罗格列酮组(B组)和正常对照组(C组)。检测空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);应用RT-PCR方法测定大鼠肝组织脂联素受体R2 mRNA的表达;ELISA法测定血浆脂联素水平。结果与C组相比,A组脂联素及脂联素受体R2 mRNA水平均显著降低(P<0.05);B组的脂联素及其受体水平较高糖高脂组有所升高,但仅脂联素的升高差异有显著性(P<0.05);脂联素受体R2 mRNA与HOMA-IR负相关(r=-0.652,P<0.01)。结论脂联素参与胰岛素抵抗的发生,脂联素受体R2可能介导了该效应。

胆汁酸-法尼醇核受体R-肠道微生态轴在肝衰竭发生及肝再生中的作用机制

肝衰竭是常见的内科危重症,短时间内肝细胞大面积坏死而超过肝细胞再生能力导致该病病死率极高,促进有效肝再生是拮抗肝衰竭的关键。近年来发现胆汁酸、法尼醇核受体R、肠道微生态在肝衰竭和肝再生机制中发挥重要作用。现就胆汁酸、法尼醇核受体R、肠道微生态三者之间的相关性,及三者对肝衰竭和肝再生机制的作用方面进行综述,为临床肝衰竭的治疗提供新思路。

过氧化酶体增殖活化受体r及其激动剂对胰岛素抵抗和动脉粥样硬化的治疗作用：争议和时机

动脉粥样硬化仍是2型糖尿病的主要并发症。越来越多的资料显示，胰岛素抵抗和与其相关的代谢紊乱是许多患有胰岛素抵抗和(或)糖尿病并发心血管疾病的基础。这一见解也提示，采取针对胰岛素抵抗的治疗方法不仅能改善患者的代谢紊乱，而且还能限制并发症，如动脉粥样硬化和与之相关的炎症反应。噻唑烷二酮类药物是目前用于治疗2型糖尿病的一种胰岛素增敏剂。在本文中，将回顾有关噻唑烷二酮类药物对心血管系统作用的现有资料并进行评论，同时展望这类药物的前景。

基于嘌呤能受体P2X7R的痛风性关节炎病理研究

目的 观察冰水泳浴对痛风大鼠模型病理变化的影响并探究其中P2X7R的调控机制。方法 雄性SD大鼠分为正常(NORM)组和实验组,实验组包括痛风对照(GC)组、冰水泳浴(IWS)组和亮蓝G(BBG,P2X7R拮抗剂)组。实验组大鼠通过尿酸酶抑制法联合Coderre法塑造高尿酸血症合并痛风性关节炎模型。冰水泳浴组大鼠在Coderre法造模后的0 h和12 h,分别于深约0.5 m的冰水混合物中进行5 min的耐力游泳,BBG组则在造模后立即腹腔注射BBG溶液1次。公式计算踝关节肿胀指数;尿酸酶法检测大鼠血清尿酸水平;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量;HE染色观察踝关节和滑膜组织的病理变化;Western blot和免疫组化分别检测滑膜组织中P2X7R和NLRP3蛋白表达。结果 与正常组相比,实验组大鼠血清尿酸水平及踝关节肿胀指数均显著升高(P<0.05或P<0.01),且滑膜组织均存在不同程度的炎性浸润。与痛风对照组相比,冰水泳浴组踝关节肿胀指数在12 h显著升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量(P<0.01)及滑膜组织中P2X7R、NLRP3蛋白量均有显著表达(P<0.05);病理结果显示软骨表面破损,滑膜组织出现严重增生与糜烂,并伴有大量炎性细胞聚集。BBG组大鼠滑膜组织的P2X7R、NLRP3蛋白表达与病理损伤较痛风对照组无显著变化(P>0.05),而血清IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均有显著改善(P<0.01)。结论 冰水泳浴模拟的寒冷刺激和剧烈运动可加重痛风性关节炎的病理损伤,其机制可能与关节局部P2X7R的高表达有关。

高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a、胰岛素样生长因子-1受体表达水平与焦虑程度的关系

目的探讨高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a(miR-451a)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)表达水平与焦虑程度的关系。方法选取2020年2月至2022年1月在汉中市中心医院进行治疗的高血压病人160例,根据临床诊断和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估将病人分为高血压组60例、高血压合并轻度焦虑情绪组48例、高血压合并中度焦虑情绪组32例和高血压合并重度焦虑情绪组20例,收集整理所有病例的临床基础资料。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-451a表达水平、ELISA法检测血清IGF1R表达水平;比较分析高血压病人和高血压合并焦虑情绪病人的临床病理特征;采用Pearson法分析HAMA评分与血清miR-451a、IGF1R表达水平的相关性;采用logistic回归分析高血压合并焦虑的影响因素。结果高血压组、轻度焦虑、中度焦虑和重度焦虑组病人血清miR-451a水平依次降低(0.88±0.30,0.59±0.14,0.48±0.11,0.38±0.09),IGF1R水平依次升高[(2.14±0.60)μg/L,(2.66±0.62)μg/L,(3.08±0.66)μg/L,(3.51±0.74)μg/L];血清miR-451a水平与HAMA评分呈负相关(r=−0.50,P<0.05),血清IGF1R水平与HAMA评分呈正相关(r=0.43,P<0.05);高血压合并焦虑组收缩压[(142.26±18.51)mmHg,(135.29±17.84)mmHg]、舒张压[(84.25±11.30)mmHg,(78.23±10.25)mmHg]、C-反应蛋白[(4.47±0.96)mg/L,(4.16±0.91)mg/L]、IL-6水平[(36.95±6.31)μg/L,(27.48±5.49)μg/L]显著高于高血压组,IL-10水平[(12.34±3.26)ng/L,(16.24±3.91)ng/L]显著低于高血压组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,收缩压[OR 95%CI=1.33(1.06,1.67)]、舒张压[OR 95%CI=1.20(1.00,1.45)]、IL-6[OR 95%CI=1.89(1.22,2.93)]、IL-10[OR 95%CI=0.38(0.17,2.93)]、miR-451a[OR 95%CI=0.01(0.00,0.47)]、IGF1R[OR 95%CI=7.62(1.21,48.03)]水平为高血压合并焦虑的影响因素(P<0.05)。结论高血压合并焦虑病人血清中miR-451a低表达,IGF1R高表达,且与病人焦虑程度密切相关。

IP3R2及RYR2介导Ca^(2+)信号在急性一氧化碳中毒迟发性脑病小鼠模型中的表达

背景:研究发现星形胶质细胞中Ca^(2+)的表达与认知功能密切相关,目前由1,4,5-三磷酸肌醇受体(Inositol 1,4,5-trisphosphate receptors,IP3Rs)2、兰尼碱受体(ryanodine receptors,RYRs)2受体及其调控的Ca^(2+)信号通路已经成为认知障碍相关疾病研究的热点。目的:研究急性一氧化碳中毒迟发性脑病动物模型中,海马组织内星形胶质细胞和IP3R2、RYR2介导的Ca^(2+)信号的表达情况,探索急性一氧化碳中毒迟发性脑病可能的发病机制。方法:Morris水迷宫实验筛选认知功能合格的C57BL小鼠随机分为对照组、实验组,实验组小鼠采用静态吸入一氧化碳建立急性一氧化碳中毒迟发性脑病模型,对照组小鼠吸入等量空气。造模后第21天,利用Morris水迷宫、苏木精-伊红染色、Western blot、免疫荧光双标法、Ca^(2+)荧光探针检测中毒小鼠行为学及神经元改变、星形胶质细胞特异性标记物胶质纤维酸性蛋白及IP3R2、RYR2受体、星形胶质细胞内Ca^(2+)浓度变化。结果与结论:①Morris水迷宫实验发现与对照组相比,实验组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05);②苏木精-伊红染色表明实验组小鼠海马锥体细胞数减少、细胞结构紊乱、细胞核碎裂伴溶解;③免疫荧光检测表明海马区IP3R2、RYR2分别和胶质纤维酸性蛋白存在共表达,且实验组海马区IP3R2、RYR2和胶质纤维酸性蛋白表达均上调(P<0.05);④Western blot检测显示实验组海马区IP3R2、RYR2及胶质纤维酸性蛋白的蛋白表达均增多(P<0.05);⑤Ca^(2+)荧光探针法检测表明实验组小鼠海马区星形胶质细胞内Ca^(2+)浓度明显升高(P<0.05);⑥结果说明,星形胶质细胞可能通过介导IP3R2、RYR2受体影响Ca^(2+)信号,进而使一氧化碳中毒的小鼠认知功能受损,最终导致急性一氧化碳中毒迟发性脑病发生。

兔急性高眼压模型视网膜N-甲基-D-天门冬氨酸受体R1 mRNA的表达

目的 了解高眼压状态下视网膜 N-甲基 - D-天门冬氨酸受体 (N- methyl- D- aspartatereceptor,NMDAR)的功能亚单位 NMDAR1基因 m RNA表达的情况。 方法 采用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT- PCR)、β-肌动蛋白 (β- actin)作内对照对高眼压模型眼视网膜内 NMDAR1基因的 m RNA进行半定量分析。16只大白兔的 2 6只眼分成 3组。实验组 10只兔 10只眼 ,前房穿刺生理盐水高压 6 0 mm Hg(1mm Hg=0 .133k Pa)灌注 ,持续 4h。阳性对照组 10只兔 10只眼 ,为实验组的对侧眼 ,用实验组相同的方法以 2 0 mm Hg的压力前房灌注持续 4h作阳性对照。正常对照组 6只兔 6只眼 ,不作眼球灌注处理。 结果 实验组的高眼压灌注眼与阳性对照眼 NMDAR1的 m RNA的水平无明显差异 (P>0 .0 5 )。 结论 急性高眼压未改变兔视网膜 NMDAR1基因的 m RNA表达水平。

神经介素NMU2R受体激动剂的高通量筛选模型研究

目的 建立神经介素NeuromedinU 2Receptor(NMU2R)激动剂的高通量筛选模型 ,从中药中筛选NMU2R受体激动剂。方法 将人NMU2R受体基因质粒 (hNMU2R/pCDNA3 1)与报告基因质粒 (MRE/CRE/LUC)按 1∶5的比例共转染到HEK2 93细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株。利用CRE的激活剂Forskolin和NMU2R内源激动剂NeuromedinU探索和优化荧光素酶表达时间、每孔细胞数目、荧光素酶底物浓度等筛选条件 ,建立可靠的筛选方法 ,并对部分中药水提液进行筛选。结果 已建立了一个稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株和可靠的筛选方法 ,其Z′ 因子为 0 75 ,荧光素酶表达时间为 6～ 8h ,细胞密度为每孔 4× 10 4～ 8× 10 4个。结论 该系统能够有效地应用于NMU2R受体激动剂的高通量筛选 ,能从中药中筛选出NMU2R受体的激动剂。

黑素皮质素受体1(MC1R)在不同毛色羊驼皮肤组织中的表达与定位研究

旨在通过研究黑素皮质素受体1(MC1R)在羊驼皮肤组织中的定位与表达,探讨其在羊驼毛色形成中的作用机制及与毛色的相关性。选用成年白色羊驼与棕色羊驼为研究对象,采用免疫组织化学方法及免疫印迹法(Western blotting),对MC1R在羊驼皮肤中的表达进行定位和定量分析。结果,(1)免疫组化结果显示,MC1R蛋白在白色和棕色羊驼皮肤表皮、毛囊周围外根鞘组织、毛乳头以及毛球周围都呈阳性着色。在棕色羊驼,阳性表达部位主要分布于毛球顶部及表皮,呈强阳性着色。在白色羊驼,阳性表达部位主要在外根鞘及表皮,毛球部表达呈弱阳性。MC1R在棕色羊驼皮肤组织中极显著表达(P<0.01)。(2)Western blotting结果显示,羊驼皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约35ku与兔抗MC1R多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,且棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼,差异极显著(P<0.01)。MC1R在羊驼皮肤组织中的定位与表达量的不同与羊驼毛色表型之间存在一定的相关性。

基于A3r受体探讨针刀疗法治疗膝骨关节炎的作用机制

目的:在A3r受体的基础上探讨针刀疗法治疗膝骨关节炎的分子生物学机制。方法:选取2018年3月—2019年12月本院(黑龙江中医药大学附属第一医院)收治的膝骨关节炎96例患者为研究对象,随机分成对照组及观察组各48例。对照组均进行口服药物(硫酸氨基葡萄糖胶囊)治疗,观察组在其基础上增加针刀松解术治疗。治疗结束后分别比较两组治疗前后的临床疗效、骨关节炎指数(WOMAC)评分、骨关节炎的严重程度指数(Lequesne MG)评分、P38MAPK、MEK3/6含量、NF-KB信号通路指标变化[p50、p65及NF-KB抑制蛋白α(IKBα)]及炎症因子[白介素1β(IL-1β)、人基质金属蛋白酶3(MMP-3)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及肿瘤坏死因子(TNF-α)]表达水平。结果:治疗后,观察组总有效率91.67%(44/48),显著高于对照组的77.08%(37/48),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组与对照组WOMAC评分、Lequesne MG评分均明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组与对照组AIMS2-SF评分均明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组明显高于对照组(P<0.05);治疗后,观察组与对照组P38MAPK、MEK3/6、p50、p65及IKBα含量均明显低于治疗前(P<0.05),且观察组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组与对照组炎症因子(IL-1β、MMP-3、hs-CRP与TNF-α)水平均明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刀疗法可明显改善KOA患者临床症状(疼痛、肿胀和晨僵等)以及膝关节活动功能,降低相关炎性因子的表达,其起作用的原因可能与抑制P38MAPK、MEK3/6和NF-KB信号通路有关。

德化黑鸡黑素皮质素受体1(MC1R)基因单核苷酸多态性分析

采用聚合酶链式反应及单链构象多态(PCR-SSCP)技术以及DNA直接测序的方法,对德化黑鸡MC1R基因编码区进行单核苷酸多态性(SNPs)分析。结果表明:引物P2扩增片段具有多态性,并表现为AA、AB和BB等3种基因型;经序列分析发现,BB型存在2个突变位点:分别在1094处(G-A)和1095处(T-C),其中在1095处的突变还导致氨基酸的改变(Cys-Arg)。由基因型分布情况表明,德化黑鸡C系(乌色)和D系(非乌色)均以AA型为主;BB型(含SNP)仅存在于C系中,而在D系中未发现,推测BB型可能是乌色性状特有或与乌色性状相关。

白介素4受体基因Q576R多态性及与变应性鼻炎的相关性

目的对变应性鼻炎患者行白介素4受体基因Q576R分型,探讨白介素4受体基因Q576R基因与变应性鼻炎遗传易感性的相关性。方法用PCR-RFLP法为69名无亲缘关系的变应性鼻炎患者和91名无血缘关系的健康汉族人行白介素4受体基因Q576R分型。结果AR组中TIgE含量明显高于对照组。(P<0.001),Q576R各基因型之间TIgE无显著性差异,在AR组中QR基因型频率高于对照组(P=0.007),QQ基因型频率低于对照组(P=0.02)。AR组与对照组之间等位基因频率存在显著性差异(P=0.005),AR组的R等位基因频率高于对照组(OR=2.18)。结论Q576R基因多态性与AR存在相关性,R等位基因可能是AR的易感基因。

甲状旁腺相关蛋白及其受体PTH1R及Ihh信号在鼠胚髁突软骨中的分布特征

目的 探讨甲状旁腺相关蛋白（PTHrP）及其受体PTH1R及Ihh信号在髁突软骨发育过程中的分布特征及意义。方法 取E14～18d鼠胚，以免疫组化及原位杂交染色方法，检测PTH1R抗体及PTHrP、Ihh mRNA在下颌髁突软骨发生过程中的分布特征。结果 在鼠胚下颌髁突软骨发育过程中，PTHrP、PTH1R主要表达于软骨膜间质细胞、软骨细胞及大部分肥大软骨细胞中，Ihh主要位于肥大软骨细胞上层及其与扁平细胞层交界处，PTHrP及Ihh信号可能通过自分泌和（或）旁分泌作用调控髁突软骨细胞的增殖和分化。结论 鼠胚下颌髁突软骨发育过程中，PTHrP、PTHA1R、Ihh的分布特征与其在生长板分布不同，提示PTHrP可能对髁突全层软骨细胞均具有增殖促进作用。

多巴胺D3受体基因Ser9Gly多态性与抑郁症的相关研究

目的 探讨多巴胺D3受体基因（D3R基因）Ser9Gly多态性在抑郁症发病机制中的作用.方法 选取50例抑郁症患者作为抑郁症组,另外选取30例健康体检者作为对照组.采集全血标本,提取模板DNA,特定引物扩增D3R基因片断,用限制性内切酶Mls Ⅰ（Bal Ⅰ）进行酶切,鉴定基因型.所有结果数据均采用SigmaStat统计分析软件包进行统计分析.结果 抑郁症组与对照组之间D3R基因Ser9Gly多态性位点等位基因频率、基因型分布之间差异无统计学意义（P〉0.05）.抑郁症患者D3R基因Ser9Gly多态性基因型分布频率为：Ser/Ser 40%,Ser/Gly 46%,Gly/Gly 14%.D3R基因Ser9Gly多态性位点基因型分布的两两比较显示：Ser/Ser与Ser/Gly、Ser/Ser与Gly/Gly、Ser/Gly与Gly/Gly之间的差异均无统计学意义（P〉0.05）.结论 抑郁症患者的D3R基因Ser9Gly多态性与抑郁症的发病无相关性.

促甲状腺激素释放激素受体-1(TRH-R1)蛋白在大鼠出生后睾丸不同发育阶段的表达和定位

目的 研究促甲状腺激素释放激素受体- 1 (thyrotrophin releasing hormonereceptor- type 1, TRH- R1) 在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达, 探讨其在生殖发育调节中的作用。方法 应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测TRH R1在8d、15d、20d、35d、60d和90d大鼠睾丸中的表达和定位, 并结合图像分析技术对免疫组化结果进行统计学分析观察其在发育过程中的变化。结果 免疫印迹杂交发现TRH R1蛋白表达于15d以后各阶段的大鼠睾丸; 而运用免疫组化在第8d即检测到TRH -R1的表达, 以后发育过程中的各个阶段均有阳性反应细胞, TRH- R1定位于大鼠睾丸的间质细胞; 免疫反应阳性物均位于胞膜和胞质, 胞核区为阴性; 图像分析结果表明, 随着大鼠睾丸的发育,TRH -R1表达量呈增多趋势, 且具有统计学差异(P<0. 01)。结论 本实验证明TRH- R1 在出生后8d大鼠的睾丸内即有表达, 并持续表达于其后各个发育阶段; TRH- R1定位于睾丸的间质细胞, 其表达量随着增龄变化呈增多趋势, 即同发育过程相关。

蒙古马黑素细胞激素受体1(MC1R)基因多态性与毛色表型相关性研究

为了探讨蒙古马的毛色与黑素细胞激素受体1(MC1R)基因的相关性,试验采用PCR-RFLP技术对蒙古马5个类群及三河马和纯血马的MC1R基因进行了多态性检测,并对多态位点与毛色性状之间的相关性进行分析。结果表明:蒙古马MC1R基因在901 bp处发生碱基错义突变(C→T),该突变导致出现EE、Ee及ee 3种基因型。群体遗传学分析表明,在黑色毛和骝色毛中,等位基因E对e为优势基因;在栗色毛中,由于未检测到E基因,可以确定等位基因e为优势基因。根据以上结果可知,等位基因e为蒙古马栗色毛形成的主要基因,E为黑色毛和骝色毛形成的主要基因。

过敏性儿童白细胞介素4受体Q576R与血清总IgE相关性探讨

目的探讨过敏性儿童白细胞介素4（IL-4）受体Q576R与血清总IgE的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）和垂直电泳方法，检测80例患过敏性疾病的儿童和20例正常对照儿童IL-4R是否存在Q576R突变位点，并用测序进行确认。采用日本HITACHI的CLA-1过敏原分析仪检测80例患过敏性疾病的儿童和20例正常对照组儿童血清总IgE水平，然后进行X^2检验及成组t检验。结果IL-4受体Q576R突变位点和血清总IgE在过敏组与对照组相比差异有统计学显著性意义（均P〈0．05）。结论过敏性儿童IL-4受体QS76R与血清总IgE有相关性。

一个新的信号受体家族——Toll/IL1R家族的研究进展

Toll受体最初是在研究果蝇胚胎腹背侧体轴的形成中发现的 ,由于它与IL 1受体在结构、功能、信号转导通路上的诸多相似 ,人们将它们归入一个大的信号受体家族———Toll/IL 1R家族。许多研究均证实 ,除与胚胎发育有关外 ,这一信号受体家族的成员在机体对抗外来病原体的天然免疫中起到了重要的作用 。