试论牛卵母细胞体外受精技术

牛卵母细胞体外受精是繁殖犊牛的重要方式,充分综合利用公牛与母牛的繁殖资源,用最低的成本繁殖出健壮、优良的犊牛,有利于种牛优秀基因的传播扩散,促进牛养殖经济效益的提升。本文通过牛卵母细胞体外受精技术的研究分析,进行牛卵母细胞体外受精采集技术、成熟培养与判定技术,以及体外受精机理、受精操作方法等的论述,以提高体外受精的受精率与胚胎发育质量,为犊牛繁殖提供参考借鉴。

以体外受精技术为基础的女性生育力保存技术的现状

体外受精-胚胎移植技术(in vitro fertilization&embryo transfer,IVF-ET)近些年有了突飞猛进的发展,全世界范围内到已有800万的新生儿出生;IVF衍生的冷冻技术的发展,使生育力的保存成为可能,特别是对于一些年轻的癌症患者。近年来癌症的发病率不断升高,并且有年轻化趋势,而癌症的治愈率在不断提高,年轻女性患者在癌症治愈后仍然有生育的需求;然而在恶性肿瘤手术、化疗、放疗等过程中生育力损伤的风险极大,在癌症治疗前、治疗中或治疗间期根据病情采用不同的生育力保存措施,使患者疾病痊愈后生育成为可能已成为世界范围的热点问题,而以IVF为基础的冷冻保存技术为生育力保存成为可能。该技术包括:胚胎冷冻保存、卵子冷冻保存、未成熟卵母细胞冷冻及卵巢组织冷冻等;各项技术不但有不同的使用人群和患者的病情,而且各技术的成熟度、解冻后妊娠成功率特别是得到活产儿的几率不同,现将各项技术的发展现状介绍如下。

水牛精子胞质内显微受精技术的初步研究

本研究探讨了水牛精子胞质内显微受精技术的可行性及操作条件的改善对水牛ICSI结果的影响。结果表明 :1.将精子操作液中PVP的浓度从 10 %降低到 5 % ,注射后卵母细胞的存活率无显著差异 (10 0 %vs .97.8% ;P >0 .0 5 ) ,分裂率明显提高 (79.4 %vs.88.6 % ;P <0 .0 5 ) ,囊胚率有所提高 ,但无显著差异 (2 3.5 %vs .2 4 .2 % ;P >0 .0 5 )。 2 .显微注射时卵母细胞第一极体置于相当于时钟 6点的位置与 12点位置相比 ,分裂率无显著差异 (89.5 %vs.86 .2 % ;P >0 .0 5 ) ,但囊胚发育率明显提高 (43.4 %vs.2 7.5 % ;P <0 .0 5 )。 3.离心和不离心的卵母细胞注射后的分裂率分别是 94 .3%和 91.3% ;囊胚发育率分别是 2 3.4 %和 2 7.5 % ,差异均不显著 (P>0 .0 5 )。结论 :1.适当降低PVP的浓度可以促进水牛卵母细胞获得胚胎发育的能力 ,并且不会增加精子显微注射的难度。 2 .注射时水牛卵母细胞的极体位于 6点的位置 ,卵母细胞获得胚胎发育的能力高于 12点位置。3.水牛卵母细胞的低透明度不会影响显微受精的效果。

从体外受精技术获诺贝尔奖谈从事转化医学研究

转化医学是促进基础研究向临床应用的转化,同时根据临床实际提出应用基础研究课题。从2010年获诺贝尔生理学或医学奖体外受精技术的发展,探讨了转化医学研究的内容和实现转化医学研究的途径,以便更好地促进临床医学研究。

牛体外受精技术的研究——单层细胞预培养时间对牛早期胚胎体外培养效果的影响

将2469枚经体外成熟、体外受精后获得的牛早期胚胎(2～8细胞阶段)随机放入7组不同日龄(分别预培养0～9天)的牛卵泡颗粒细胞单层细胞滴中进行“复合”培养,然后观察这些胚胎在体外培养条件下继续发育至囊胚和孵化囊胚阶段能力的差异。结果随单层细胞预培养时间的延长(0～4天内),牛早期胚胎的囊胚发育率、发育速度及囊胚胎孵化率均呈逐渐升高的趋势;尔后,培养效果又稍有下降。经统计学检验,各组间囊胚发育率(31.7～39.2%)和囊胚孵化率(61.1～72.6%)及7日龄囊胚发育比率(41.8～58.5%)均无显著差异(P>0.05)。这表明,利用不同预培养时间(0～6天)的颗粒细胞单层与牛早期胚胎“复合”培养,都同样具有促进胚胎在体外条件下发育到囊胚和孵化囊胚阶段的能力,但以使用预培养2～4天单层细胞进行“复合”培养效果较佳。

家兔的人工受精技术

在大型兔场或养兔比较集中的地区均可采用人工受精法，这是目前养免业中最经济、最科学的配种方法。人工受精技术的优点是能够充分利用优良种公兔，迅速推广良种：可减少公免饲养数量，降低饲养成本：能提高母兔的受胎率；能减少疾病的传播：使母兔集中产子，便于小兔饲养管理等。其缺点需要有熟练的操作技术和必要的设备等。

哺乳动物体外受精技术研究进展

哺乳动物体外受精技术（In Vitro Fertilization,简称为IVF）是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。IVF是继人工授精（AI）、胚胎移植技术（ET）之后,家畜繁殖领域的第三次革命。特别是近十年来,随着一系列高新生物技术的发展,如DNA图谱的构建、细胞核移植、转基因技术、

山羊配子输卵管内移植受精技术

以2只屡配不孕"波尔山羊"、1只F2代杂交波尔山羊、6只"徐淮白山羊"为卵子供体,经同期发情和超排处理,腹腔镜观察卵巢卵泡发育状况后筛选出供手术采卵供体。从7只供体中采集到可用卵子39枚,采用输卵管内配子移植(GIFT)技术植入受体徐淮母羊12只。移植后连续3个发情周期妊娠鉴定表明,12只受体中有6只未返情,妊娠率为50%。2只受体产单羔,1只受体产3羔(难产)。共移植39枚卵子,5枚发育为后代,配子受精发育率为13%。

人类体外受精技术——2010年诺贝尔生理学或医学奖工作介绍

2010年10月4日,瑞典卡罗林斯卡医学院诺贝尔生理学或医学奖评审委员会宣布,由于英国剑桥大学Robert G.Edwards教授（图1）在人类体外受精（human in vitro fertilization,IVF）领域的开创性贡献荣膺2010年诺贝尔生理学或医学奖。

蓝狐人工受精技术的应用

应用人工受精的技术改良地产蓝狐,使地产蓝狐的受胎率提高1.1%,胎平均产仔数增加0.25只,平均体长增加135cm,降低饲养成本,效益显著,为全省蓝狐的人工受精技术的应用提供经验。

体外受精技术在辐射细胞遗传学中的应用

Rudak(1978)建立的直接分析人精子染色体的技术,也为辐射细胞遗传学开辟了新局面。本文简要介绍了体外受精技术,重点总结了小鼠精子和人类精子辐射诱变的研究结果。最后讨论了辐射细胞遗传学今后的发展方向。

体外受精技术及其在家畜繁殖中的应用

所谓体外受精技术（invitrofertilization，WF）是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，它是继人工授精、胚胎移植技术之后，家畜繁殖领域的第三次革命。体外受精是目前在基础学科和应用学科上广泛应用的一门生物技术。它的诞生和成长导致生物世界发生了深刻的变化，

牛体外受精技术的应用前景

卵母细胞(卵子)和早期胚胎在有机体的生命周期中起着核心作用。动物(家畜)生物技术是通过对其配子(精子和卵子)以及胚胎进行操作,施以影响,人为地使其遗传物质(DNA)重组或复制,使之遗传性状可以按照人类愿望定向改变,从而达到加速遗传改进的目的。随着牛卵母细胞体外成熟和体外受粘技术日瑧完善,此项技术已经由试验研究走向应用。当前,牛体外受精实验均采用屠宰场废弃的母牛卵巢,从中采集未成熟的卵母细胞,通过体外成熟、体外受精、体外培养或在中间受体的输卵管内培养,使之发育成为可用于非手术移植的桑椹胚和囊胚阶段的胚胎。我国在该技术的研究上进展很快,“七·五”

牛人工受精技术要点

对牛实施人工受精的目的是为了改良本地牛的品种，使本地牛不因公牛严重不足而消失殆尽或因近亲繁殖而造成后代抗病力下降、生长缓慢，给畜牧业生产造成严重不良的后果。笔者所在乡镇2005年开始实施牛的品种改良工作，经过近7年的不懈努力，牛的品种改良工作取得了较好的成绩，2005年～2012年累计完成对6000头次母牛实施人工受精，受胎产子5040头，母牛人工受精受胎率为80％以上，有效地缓解了因公牛不足导致母牛不能正常进行生育繁殖的不良后果，通过牛的人工受精能更好地改良本地牛的生产性能，从而获得更优、更耐役、生长发育更快的后代，促进畜牧业的健康发展。牛人工受精的技术要点主要有：