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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体基因的克隆及工程菌的构建与鉴定 被引量:2
1
作者 陈于红 朱镇华 +6 位作者 刘蓓钫 张菁 傅一工 王石泉 张巍 杨庆 刘建宁 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页
 利用RT PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重...  利用RT PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重组表达质粒pET29a/K2tPA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,构成工程菌.经IPTG诱导表达,在40kDa处有一明显表达条带,表达量为约占菌体总蛋白的20%.该菌种在贮存与复苏及传代过程中具有良好的质粒稳定性和表达稳定性. 展开更多
关键词 组织型人纤溶酶原激活剂变体基因 工程菌 质粒稳定性 表达稳定性 克隆
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α—乳清蛋白变体基因的构建和在大肠杆菌中的高效表达
2
作者 李烨 《淮阴工学院学报》 CAS 2000年第4期21-23,共3页
α—乳清蛋白和c型溶菌酶具高度的同源性 ,根据已设计的改造α—乳清蛋白成溶α菌酶的可行方案 ,共需要六个点突变 ,分别是 :10 3Tyr→Ala ;33Thr→Glu ;49Glu→Asp ;32His→Leu ;99Lys→Asn ;5 9Leu→Trp。本文主要完成了α -Lac32 ,3 ... α—乳清蛋白和c型溶菌酶具高度的同源性 ,根据已设计的改造α—乳清蛋白成溶α菌酶的可行方案 ,共需要六个点突变 ,分别是 :10 3Tyr→Ala ;33Thr→Glu ;49Glu→Asp ;32His→Leu ;99Lys→Asn ;5 9Leu→Trp。本文主要完成了α -Lac32 ,3 3 ,49,1 0 3 -pUC9α -Lac32 ,3 3 ,49,1 0 3 -pET32a重组载体的构建 。 展开更多
关键词 α-乳清蛋白 c型溶菌酶 定点突 同源性 大肠杆菌 高校表达 构建 变体基因 分子生物学
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山羊转t-PA突变体基因的体细胞核移植研究 被引量:1
3
作者 赵晓娥 安志兴 +6 位作者 李向臣 高立功 吴月红 山灵 刘凤军 王永胜 张涌 《中国农学通报》 CSCD 2005年第6期1-4,共4页
比较了用转t-PA突变体基因的胎儿成纤维细胞和卵丘细胞作供体时核移胚的发育情况。结果表明:卵丘细胞作供体时,核移胚的卵裂率(82.9%)和桑葚胚率(55.9%)均高于胎儿成纤维细胞卵裂率(75.7%)和桑葚胚率(48.7%),但差异不显著(P>0.05);... 比较了用转t-PA突变体基因的胎儿成纤维细胞和卵丘细胞作供体时核移胚的发育情况。结果表明:卵丘细胞作供体时,核移胚的卵裂率(82.9%)和桑葚胚率(55.9%)均高于胎儿成纤维细胞卵裂率(75.7%)和桑葚胚率(48.7%),但差异不显著(P>0.05);卵丘细胞作供体时的囊胚率(19.7%)则高于胎儿成纤维细胞(11.0%),差异显著。(P<0.05)。比较了饥饿处理与否对胎儿成纤维细胞作供体时转基因核移胚的发育情况。结果表明:供体细胞饥饿后,其核移胚的卵裂率(75.6%)与供体不饥饿的卵裂率(75.8%)差异不显著;供体细胞饥饿后,其核移胚的桑葚胚率(46.5%)和囊胚率(11.0%)高于供体不饥饿的桑葚胚率(39.3%)和囊胚率(9.0%),但差异不显著。比较了SOFaa和CR1aa分别添加10%FBS和bFF后,转基因核移胚的发育情况。结果表明:用CR1aa液培养时,添加10%bFF,其囊胚率(9.1%)高于添加10%FBS(4.2%)(P>0.05);用SOF液培养时,添加10%bFF,其囊胚率(11.2%)高于添加10%FBS(5.5%)(P>0.05)。说明用SOF液优于CR1aa液。 展开更多
关键词 变体基因 细胞核移植 胎儿成纤维细胞 PA 山羊 卵丘细胞 细胞 囊胚率 卵裂率 差异显著 饥饿处理 基因 SOF 添加 桑葚 发育
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水稻假病斑基因spl1突变体基因的克隆
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《作物育种信息》 2005年第4期8-8,共1页
水稻假病斑基因spl1是由一对隐性基因控制。其表型是自发产生类似于病斑的假性病斑。spl1基因能增强水稻对稻瘟病的抗性。利用图位克隆法克隆该基因。我们建立了3202个后代分离群体(2950个spl1表型)。已找到10个和spl1基因紧密连锁的CAP... 水稻假病斑基因spl1是由一对隐性基因控制。其表型是自发产生类似于病斑的假性病斑。spl1基因能增强水稻对稻瘟病的抗性。利用图位克隆法克隆该基因。我们建立了3202个后代分离群体(2950个spl1表型)。已找到10个和spl1基因紧密连锁的CAPS分子标记,分布在12号染色体约8.8cM的区域,通过筛选这些分离群体, 展开更多
关键词 病斑 变体基因 水稻 12号染色 L1基因 分离群 基因控制 分子标记 CAPS 稻瘟病 克隆法 表型 sp 抗性 后代
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水稻白穗突变体基因的鉴定和染色体定位 被引量:16
5
作者 李红昌 钱前 +3 位作者 王赟 李晓波 朱立煌 徐吉臣 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期268-270,共3页
从一个水稻籼粳交F6后代自然群体中获得1例白穗突变体,其成熟植株基部少数叶片中脉呈现白色,抽穗后穗粒内外稃和枝梗均表现白色.用突变体作母本与一粳稻恢复系品种制7杂交,获得一个F2分离群体.初步的遗传分析表明,该突变属单基因隐性性... 从一个水稻籼粳交F6后代自然群体中获得1例白穗突变体,其成熟植株基部少数叶片中脉呈现白色,抽穗后穗粒内外稃和枝梗均表现白色.用突变体作母本与一粳稻恢复系品种制7杂交,获得一个F2分离群体.初步的遗传分析表明,该突变属单基因隐性性状.利用已定位的微卫星标记进行连锁分析,发现该基因位于水稻第1染色体上.进一步根据已完成的水稻基因组序列寻找微卫星位点,连锁分析显示,该基因位于微卫星标记SSR101和SSR63.9之间,分别相距2.3和0.8cM:并与微卫星标记SSR17呈共分离.该基因暂定名为wp(t). 展开更多
关键词 水稻 白穗变体基因 染色定位 叶绿 微卫星标记 基因定位 基因鉴定 发育
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中国科学家在健康人中发现超级耐药基因变体
6
《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2017年第2期50-50,共1页
中国研究人员发布最新报告称,在健康人中发现可抵抗多黏菌素的超级耐药基因mcr-1变体,而多黏菌素被视为抗生素中“最后一道防线”。这一发现意味着健康人能在不被觉察的情况下传播超级耐药基因,提示健康人中的耐药基因携带情况值得... 中国研究人员发布最新报告称,在健康人中发现可抵抗多黏菌素的超级耐药基因mcr-1变体,而多黏菌素被视为抗生素中“最后一道防线”。这一发现意味着健康人能在不被觉察的情况下传播超级耐药基因,提示健康人中的耐药基因携带情况值得关注。 展开更多
关键词 中国科学家 耐药基因 健康人 基因 研究人员 携带情况 抗生素 意味着
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蛋黄抗体和NK-Lysin基因变体
7
作者 侯梅利 《国外畜牧学(猪与禽)》 2013年第11期52-53,共2页
研究人员对两个鸡种的NK-lysin基因多样性进行了检测,获得了两种NK-lysin的基因变体,结果它们都能抵抗细菌感染和其他疾病,为该项研究迈出了可喜的一步。
关键词 蛋黄抗 NK-lysin基因 对抗癌症
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防止肥胖的基因变体被发现
8
《家庭医药(就医选药)》 2019年第6期5-5,共1页
遗传因素会影响人的胖瘦早已为人所知。日前,英国剑桥大学研究人员宣布,他们发现了可以防止肥胖的基因变体,可为开发治疗肥胖症新药提供思路。
关键词 基因 肥胖症 遗传因素 研究人员
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科学家研究发现一个特殊的基因变体决定人的记忆力
9
《科技广场》 2003年第2期14-14,共1页
关键词 脑衍生向神经因子 基因 记忆力
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一种提高变体库多样性的寡核苷酸设计方法
10
作者 唐瑞 郑浩然 《北京生物医学工程》 2022年第4期338-343,共6页
目的基于定向进化的新特性蛋白质合成研究的关键在于基因变体库的生成以及目标蛋白质的筛选,而目标蛋白质筛选的成功率取决于基因变体库的多样性,针对采用从头寡核苷酸合成策略的基于基因芯片技术的基因变体库合成生物技术,本文研究并... 目的基于定向进化的新特性蛋白质合成研究的关键在于基因变体库的生成以及目标蛋白质的筛选,而目标蛋白质筛选的成功率取决于基因变体库的多样性,针对采用从头寡核苷酸合成策略的基于基因芯片技术的基因变体库合成生物技术,本文研究并设计一种旨在提高基因变体库多样性的寡核苷酸设计方法。方法采用了逆翻译算法提高基因序列的一致性,并利用在高同源区域的片段切割来提高基因合成过程中的重组率,从而提高基因变体库的多样性。结果与DNAWorks和TmPrime设计后的基因序列相比,本文方法能够达到更高的一致性,同时基因片段切割结果显示该方法能够使切割后的前后片段末端具有非常高的相似度。最后设计的寡核苷酸经过基因芯片合成筛选得到了目标蛋白质。结论本文提出的寡核苷酸设计方法充分利用了DNA序列间的基因重组,设计出的寡核苷酸序列经过基因芯片的合成证实了可行性,说明本文提出的寡核苷酸设计算法能够有效提高基因变体库的多样性。 展开更多
关键词 基因 定向进化 寡核苷酸 基因重组 同源性
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一种体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme的新载体 被引量:2
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作者 刘静 金由辛 王德宝 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第8期6-9,共4页
为了在体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme ,通过PCR克隆技术构建了一种全新载体 pBSKneorU 6’。该载体利用hsnRNAU6基因表达单元的特性 ,保留了U 6RNA分子 5’端维持分子稳定性的发夹和帽式结构的序列 ,缺失了其中间参与mRN... 为了在体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme ,通过PCR克隆技术构建了一种全新载体 pBSKneorU 6’。该载体利用hsnRNAU6基因表达单元的特性 ,保留了U 6RNA分子 5’端维持分子稳定性的发夹和帽式结构的序列 ,缺失了其中间参与mRNA前体剪切的部分 ,取而代之的是 3个限制性内切酶位点。Hela细胞核抽提物体外转录实验证明该载体可有效地表达U6变体RNA分子。该载体携带新霉素抗性基因neor ,因而可用于真核细胞稳定转染的筛选。 展开更多
关键词 基因治疗 HSNRNA U6基因 U6变体基因 U6 SNRNA U6RNA 嵌合RNA
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水稻所研究发现影响水稻产量的关键基因
12
《种业导刊》 2015年第12期32-32,共1页
近日,从中国水稻研究所获悉,该所种质创新团队研究发现了水稻颖壳发育畸形的突变体基因(AFD1)影响水稻的产量构成,尤其对水稻籽粒的发育起关键性作用。该基因的克隆有利于高产新品种的培育。相关研究成果近期在线发表与国际知名学... 近日,从中国水稻研究所获悉,该所种质创新团队研究发现了水稻颖壳发育畸形的突变体基因(AFD1)影响水稻的产量构成,尤其对水稻籽粒的发育起关键性作用。该基因的克隆有利于高产新品种的培育。相关研究成果近期在线发表与国际知名学术期刊((植物学报(Journal of Integrative Plant Biology)》上。 展开更多
关键词 水稻产量 变体基因 水稻所 中国水稻研究所 PLANT 产量构成 种质创新 水稻籽粒
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2009年2月下半月科技新闻媒体关注指数排行榜
13
《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期8-8,共1页
关键词 关注指数 消息 新闻 (新闻) 新闻媒 基因
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科学家发现早老性痴呆症致病基因
14
作者 本刊通讯员 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2007年第6期7-7,共1页
由智利康塞普西翁大学教授德·费拉里领导的研究小组通过与美国华盛顿大学和美国国家健康研究院以及瑞士巴赛尔大学等机构的合作研究发现,LRP6基因中的某些基因变体是导致早老性痴呆症的主要致病基因,能使致病危险增加70%~80%... 由智利康塞普西翁大学教授德·费拉里领导的研究小组通过与美国华盛顿大学和美国国家健康研究院以及瑞士巴赛尔大学等机构的合作研究发现,LRP6基因中的某些基因变体是导致早老性痴呆症的主要致病基因,能使致病危险增加70%~80%。普通人群中有8%~12%的人具有LRP6基因变体。这一发现不仅有助于识别早老性痴呆症高危人群, 展开更多
关键词 早老性痴呆症 致病基因 科学家 基因 LRP6 华盛顿大学 健康研究 普通人群
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科学家发现早老性痴呆症致病基因
15
《医学信息学杂志》 CAS 2007年第5期495-495,共1页
由智利康塞普西翁大学教授德·费拉里领导的智利科学家小组通过与美国华盛顿大学、美国国家健康研究院和瑞士巴赛尔大学等机构的合作研究发现,LRP6基因中的某些基因变体是导致早老性痴呆症的主要致病基因,能使致病危险增加70%到8... 由智利康塞普西翁大学教授德·费拉里领导的智利科学家小组通过与美国华盛顿大学、美国国家健康研究院和瑞士巴赛尔大学等机构的合作研究发现,LRP6基因中的某些基因变体是导致早老性痴呆症的主要致病基因,能使致病危险增加70%到80%。普通人群中有8%到12%的人具有LRP6基因变体。这一发现不仅有助于识别早老性痴呆症高危人群,还有利于促进旨在阻断其病程或病原的相关治疗性研究。 展开更多
关键词 早老性痴呆症 致病基因 科学家 基因 LRP6 华盛顿大学 健康研究 普通人群
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新的人类基因组图谱将对医生和生物学家有所帮助,但人类遗传学解码了吗?
16
作者 吕吉尔 《世界科学》 2002年第9期3-4,共2页
在围绕人类基因组计划的炒作声中,测绘基因组图谱的方法不止一种--商业竞争对手们已难以看到这一事实.
关键词 人类遗传学 连锁图谱法 基因
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携带“活跃”基因的人寿命更长
17
《健康博览》 2013年第2期12-12,共1页
美国科学家近日研究发现,人体内一个与活跃的个性特征有关的基因变体似乎能使人的寿命更长。
关键词 基因 寿命 美国科学家 个性特征
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英国科学家破解冠心病等七种常见病基因
18
《中国健康月刊》 2007年第7期6-6,共1页
在近期出版的《自然》和《自然遗传学》杂志上,科学家公布的研究报告指出,24个基因变体会增加郁躁症、冠心病、克罗恩病(一种肠炎类疾病)、高血压、风湿性关节炎以及I型、Ⅱ型糖尿病等七种常见病的患病几率。
关键词 英国科学家 基因 常见病 冠心病 风湿性关节炎 Ⅱ型糖尿病 《自然》 克罗恩病
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EML4-ALK融合基因变体1和变体3质控品的建立 被引量:2
19
作者 曲守方 于婷 +3 位作者 郭李平 赵金银 高尚先 黄杰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期500-505,共6页
目的:建立EML4-ALK融合基因质控品,用于评价人类EML4-ALK融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类EML4-ALK融合基因序列,合成EML4-ALK融合基因变体1(V1)和变体3(V3)的基因序列。采用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ对带有目的基因的质... 目的:建立EML4-ALK融合基因质控品,用于评价人类EML4-ALK融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类EML4-ALK融合基因序列,合成EML4-ALK融合基因变体1(V1)和变体3(V3)的基因序列。采用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ对带有目的基因的质粒和表达载体分别进行酶切,将目的基因与载体连接,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落进行测序。将测序结果正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液,并用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果:对人类EML4-ALK融合基因V1和V3质控品进行序列测定和荧光定量RT-PCR检测,结果表明成功建立了人类EML4-ALK融合基因V1和V3假病毒质控品。结论:本研究建立了人类EML4-ALK融合基因变体假病毒质控品的方法。可为药物靶向治疗基因检测试剂质量控制提供参考。 展开更多
关键词 靶向药物 分子靶向治疗 棘皮动物微管相关蛋白样4(EML4) 融合基因 RNA检测 RT-PCR法 基因检测试剂 质控品建立 标准物质研究
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Morphological Structure and Genetic Mapping of New Leaf-Color Mutant Gene in Rice (Oryza sativa) 被引量:5
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作者 LI Yu-hong WANG Bao-he +5 位作者 DAI Zheng-yuan LI Ai-hong LIu Guang-qing Zuo Shi-min ZHANG Hong-xi PAN Xue-biao 《Rice science》 SCIE 2012年第2期79-85,共7页
Leaf-color mutations are a widely-observed class of mutations, playing an important role in the study of chlorophyll biosynthesis and plant chloroplast structure, function, genetics and development. A naturally-occurr... Leaf-color mutations are a widely-observed class of mutations, playing an important role in the study of chlorophyll biosynthesis and plant chloroplast structure, function, genetics and development. A naturally-occurring leaf-color rice mutant, Baihuaidao 7, was analyzed. Mutant plants typically exhibited a green-white-green leaf-color progression, but this phenotype was only expressed in the presence of a stress signal induced by mechanical scarification such as transplantation. Prior to the appearance of white leaves, mutant plant growth, leaf color, chlorophyll content, and chloroplast ultrastructure appeared to be identical to those of the wild type. After the changeover to white leaf color, an examination of the mutated leaves revealed a decrease in total chlorophyll, chlorophyll a, chlorophyll b, and carotenoid content, a reduction in the number of chloroplast grana lamella and grana, and a gradual degradation of the thylakoid lamellas. At maturity, the mutant plant was etiolated and dwarfed compared with wild-type plants. Genetic analysis indicated that the leaf mutant character is controlled by a recessive nuclear gene. Genetic mapping of the mutant gene was performed using an F2 population derived from a Baihuaidao 7 × Jiangxi 1587 cross. The mutant gene was mapped to rice chromosome 11, positioned between InDel markers L59.2-7 and L64.8-11, which are separated by approximately 740.5 kb. The mutant gene is believed to be a new leaf-color mutant gene in rice, and is tentatively designated as gwgl. 展开更多
关键词 水稻植株 颜色转换 遗传图谱 ORYZA 变体基因 形态结构 叶绿素含量 叶绿超微结构
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