不同证型变应性鼻炎复合大鼠模型鼻腔黏膜神经源性炎症特点的对比分析

目的:探讨不同证型变应性鼻炎(AR)复合大鼠模型鼻腔黏膜神经源性炎症的特点。方法:动物随机分为模型组(肺气虚AR组、脾气虚AR组、单纯AR组)与空白对照组,以相应造模方法先后建立中医证型以及证型AR复合模型。并通过证型评估、大鼠变应性鼻炎行为学评分、镜下黏膜组织病理学观察、P物质(SP)与血管活性肠肽肽(VIP)免疫组化染色以及积分光密度值测定,对各组大鼠鼻黏膜神经源性炎症特点进行对比分析。结果:中医证型造模后,肺气虚模型组大鼠呼吸频率明显升高,脾气虚模型组大鼠提质量增幅明显降低。AR复合模型建立后,各模型组大鼠行为学评分明显升高;黏膜HE染显色示肺气虚AR组炎性细胞浸润、脾气虚AR组黏膜下腺体扩张较其它组更加明显;神经肽免疫组化显示肺气虚与脾气虚AR模型组分别在SP、VIP出现高水平表达,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:不同证型AR复合大鼠模型之间鼻腔黏膜神经源炎症检测指标具有一定的差异。

实验性变应性鼻炎鼠类模型的建立

目的:建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)鼠类模型。方法:将NIH小鼠和SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入 OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果:实验组均出现鼻痒、喷嚏、流清涕等变应性鼻炎的临床特征 (评分>5分),鼻粘膜和肺组织见大量的嗜酸性粒细胞浸润,粘膜水肿、腺体增生且鼻粘膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。对照组均无上述变化。结论:本实验成功建立OVA变应原致敏的变应性鼻炎鼠类模型,具有操作简单、重复性好的优点,为今后变应性鼻炎的诊断、治疗及研究工作提供了有效的方法及组织形态学依据。

IL-9在变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜中的表达研究

目的探讨IL-9在小鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)发生发展中的作用。方法利用Balb/c小鼠建立卵清蛋白致敏的变应性小鼠模型,按激发时间分为6组(30 min、2 h、6 h、12 h、24 h、48 h),同时使用生理盐水作为对照组,每组各5只小鼠。取各组小鼠鼻黏膜组织,利用免疫组化SABC法检测IL-9在各组小鼠鼻黏膜组织中的表达情况。结果 IL-9在对照组以及实验组中均有表达,且实验组明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);IL-9在实验组中随激发时间表达先增高后下降。结论 IL-9在小鼠变应性鼻炎中的表达与变应性鼻炎发病机制存在着一定的相互关联。

制备具有明显OVA吸附作用的Al(OH)_3佐剂及其在变应性鼻炎大鼠模型建立中的应用

目的:制备可明显吸附卵清蛋白(OVA)的Al(OH)_3佐剂并用其建立具备变应性鼻炎(AR)临床客观特征的大鼠模型.方法:通过控制反应条件制备可明显吸附OVA的Al(OH)_3佐剂,对模型组用OVA辅以自制Al(OH)_3佐剂进行基础致敏,继以质量分数为2%OVA生理盐水行鼻内激发.对照组以生理盐水替代自制Al(OH)_3佐剂.采用PCA、行为学评分、Luna染色、HE染色评价模型.结果:1)吸附研究表明自制Al(OH)_3佐剂对OVA具明显吸附作用;2)模型组:PCA(+)证明变应原特异性Ig E产生;行为学评分>5分;Luna染色与HE染色示鼻黏膜嗜酸性粒细胞增多、浸润.对照组无上述变化.结论:所制Al(OH)_3佐剂对OVA具明显吸附作用并在此基础上成功建立了具备Ig E阳性和鼻黏膜嗜酸性粒细胞增多AR临床客观特征的大鼠模型.

脾气虚与变应性鼻炎模型大鼠相关机理的研究

目的建立脾气虚变应性鼻炎病证复合模型,探讨脾气虚体质与变应性鼻炎发病的内在联系,为临床运用温阳益气法治疗变应性鼻炎提供实验依据。方法利用大黄泻下法、饮食不节加劳倦过度等综合因素再加上卵清蛋白建立脾气虚变应性鼻炎动物模型,运用温阳益气的中药进行药物反证。结果观察模型动物出现的鼻部症状(鼻痒、喷嚏、清涕)、鼻分泌物及血中嗜酸粒细胞(EOS),被动皮肤免疫反应(PCA)试验作用明显、大鼠血清中IL-5、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)含量升高(P<0.01);而经过中药治疗后的模型组症状减轻,大鼠血清中IL-5、ECP含量降低(P<0.01)。结论在同样的致敏原作用下,脾气虚动物较正常动物更易于造成变应性鼻炎模型,而温阳益气方对脾气虚变应性鼻炎模型大鼠有一定治疗效应。

穴位埋线调节变应性鼻炎模型大鼠血清Th细胞因子平衡状态的实验研究

目的探讨穴位埋线对变应性鼻炎实验动物外周血清的sIgE、IL-4、IL-10、INF-γ水平的影响及其作用机制。方法用卵清蛋白(OVA)建立AR大鼠模型,实验组大鼠穴位埋线后2周,处死动物采血,取血清送检。用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)对各组大鼠外周血清sIgE、IL-4、IL-10、INF-γ变化进行观察。结果 1模型组大鼠外周血清sIgE、IL-4、IL-10水平明显升高,与空白组相比有明显差异(P<0.05);INF-γ水平升高,与空白组相比没有明显差异(P>0.05)。2实验组大鼠外周血清sIgE、IL-4、IL-10水平显著下降,与模型组相比有统计学意义(P<0.05),与空白组相比没有显著差异(P>0.05);INF-γ水平显著升高,与空白组、模型组相比有显著差异(P>0.05)。结论穴位埋线可以通过调节变应性鼻炎大鼠血清sIgE、IL-4、IL-10和INF-γ水平,调节Th1/Th2水平,改善变应性鼻炎症状。

卵白蛋白鼻腔强化激发制作变应性鼻炎大鼠模型效果观察

目的比较变应性鼻炎(AR)大鼠模型制作过程中鼻腔不同激发方式的效果,探索较优的激发方式。方法 32只SD大鼠随机分为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组各8只,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别采用卵白蛋白(OVA)滴鼻、OVA雾化、OVA鼻腔强化激发(滴鼻+雾化),Ⅳ组为生理盐水对照(空白组)。采用症状评分及鼻黏膜HE染色镜下观察的方式,比较其制作AR大鼠模型的效果。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组症状评分均数均大于5,与Ⅳ组比较,有统计学意义(P<0.05),Ⅲ组优于Ⅰ组、Ⅱ组,有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ组与Ⅱ组效果相当(P>0.05)。结论制作AR大鼠模型时,在低剂量佐剂,长时间基础致敏的基础上,采用鼻腔强化激发的方式激发,其效果明显优于单用一种方式激发。

符合变应性鼻炎临床客观特征的大鼠模型初步建立

目的建立符合临床客观特征的变应性鼻炎大鼠模型。方法 21只Wistar大鼠,随机分为模型组(9只)和对照组(9只),另有3只大鼠用于被动皮肤过敏(PCA)实验。模型组以卵清蛋白作为变应原,完成基础致敏;继以2%卵清蛋白生理盐水进行鼻内激发。对照组以生理盐水替代卵清蛋白。采用PCA实验、行为学评分、Luna染色、HE染色对所建模型进行综合评价。结果模型组基础致敏阶段完成后,PCA实验阳性,证明变应原特异性免疫球蛋白E产生;鼻内激发阶段完成后,每只大鼠行为学评分均>5分,出现喷嚏、鼻痒、流清涕等典型症状;Luna染色示鼻中隔黏膜下嗜酸性粒细胞增多、浸润;HE染色示鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润,杯状细胞增多,部分黏膜上皮脱落。对照组无上述变化。结论初步建立产生变应原特异性免疫球蛋白E和嗜酸性粒细胞升高的符合变应性鼻炎发作时临床特征的变应性鼻炎大鼠模型。

变应性鼻炎大鼠模型的文献研究

目的:通过对近20年发表变应性大鼠造模的文献进行总结,对国内目前研究现状及动态进行分析,并为如何建立标准化的造模流程及造模后评价提供部分见解。方法:以"变应性鼻炎"和"变应性鼻炎大鼠模型"或"动物实验"为检索词,对中国知网(CNKI)数据库中于1993年8月-2013年10月发表的相关文献进行检索,对文献中描述的造模方式、药物剂量、造模周期、模型评价等进行资料、数据提取后进行归纳及量化分析。结果:本次研究共纳入208篇有效文献,以SD大鼠为造模动物,卵清蛋白+氢氧化铝为致敏剂和佐剂,以腹腔注射+鼻腔激发造模是最常用的造模方式,动物行为学观察量化评分为主要评价指标。结论:目前国内在变应性鼻炎动物造模方面形式多样,造模后评价方式较为单一,建立标准化的变应性鼻炎造模流程及造模后评价亟待所需。

变应性鼻炎SD大鼠模型制备

目的探讨SD大鼠变应性鼻炎动物模型的最佳制备方法。方法选取SD大鼠60只,随机分为空白Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ组,模型Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ组,每组各10只。采用卵清蛋白(OVA)和热灭活百日咳杆菌为致敏原,腹腔注射基础致敏,滴鼻或雾化吸入激发,制备SD大鼠AR动物模型。空白各组以生理盐水代替OVA。结果所有模型组大鼠症状总评分均>5分,并具备典型的AR的病理表现,提示造模成功。模型组Ⅲ组SD大鼠行为学变化、血清Ig E水平、鼻黏膜EOS计数和鼻黏膜细胞间黏附因子(ICAM)-1表达较模型组Ⅰ和Ⅱ组更为理想(P<0.05)。结论长期、持续抗原攻击引起的鼻黏膜变应性炎症程度较短期效果好,症状典型,速发相反应和迟发相反应明显,血清Ig E水平、鼻黏膜EOS计数和鼻黏膜ICAM-1表达理想,鼻黏膜病理学变化显著,更利于AR动物实验的开展。

LMP-1重组质粒滴鼻对变应性鼻炎鼠模型Th2方向的免疫调节作用

近一个世纪以来,变应性疾病的发病率增加,医疗支出加剧,给病患及社会带来沉重负担。包括细菌超抗原,病毒以及大气污染等外界环境因素变化对变应性鼻炎的影响为我们提出新的问题与挑战。病毒广泛存在于呼吸道,中国10岁以上人口EB病毒(EBv)感染率高达86%以上,是研究呼吸道变态反应中不能忽视的外部因素[1]。近年来研究显示,病毒感染不但与肿瘤有关而且与变应性鼻炎及哮喘密切相关,可能是促进变应性鼻炎发生发展的重要病因之一[2]。本研究拟通过制备LMP-1重组质粒,并滴鼻观察其对变应性鼻炎鼠模型鼻黏膜组织Th2方向的免疫调节细胞因子IL-5以及IL-13影响。

变应性鼻炎大鼠模型的建立方法

目的:建立有效可行的大鼠变应性鼻炎模型。方法:将雌雄各半、5周~6周龄SPF级SD大鼠20只,随机分成实验组和对照组,每组各10只。应用生理盐水加卵蛋白氢氧化铝溶胶加灭活百日咳杆菌注射大鼠脚掌皮下使其出现致敏现象,继续鼻腔局部致敏,然后观察不同处理组别所致变应性鼻炎大鼠模型的临床症状;通过常规HE染色和甲苯胺蓝染色观察大鼠鼻咽黏膜组织病理学指标的改变,采用叠加量化记分法记分,积分>5分表示造模成功。结果:实验组大鼠出现的症状均与临床相符,经鼻腔局部激发后均能观察到实验组大鼠有搔鼻、喷嚏、流涕等症状;对照组大鼠均无上述症状;所有实验组大鼠和对照组大鼠均无死亡。结论:本实验建立的大鼠变应性鼻炎模型是成功的,方法是可行的,有效的。

建立符合人类诊断标准的变应性鼻炎大鼠模型初探

建立符合人类诊断标准的变应性鼻炎大鼠模型。取6-8周龄的Wistar大鼠27只,雌雄各半,随机分为模型组(n=12)和对照组(n=12),另有3只空白大鼠用于被动皮肤过敏试验(PCA)。模型组以卵清蛋白(OVA)作为变应原辅以氢氧化铝佐剂进行腹腔注射,完成基础致敏;之后用2%OVA生理盐水进行鼻内激发。对照组以生理盐水替代OVA。模型组基础致敏阶段完成后,PCA(+),证明IgE产生;鼻内激发阶段完成后,各大鼠行为学评分均>5分,出现喷嚏、鼻痒、流清涕等典型症状,鼻粘膜病理切片HE染色示嗜酸性粒细胞浸润。对照组无上述变化。本实验成功建立了符合人类诊断标准的可重复的变应性鼻炎大鼠模型。

变应性鼻炎相关动物模型研究进展

目的综述变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)相关动物模型的研究进展,为深入研究AR的发病机制及药物评价提供参考。方法通过对国内外文献的查阅,从AR模型动物的种类、特点、模型种类、建模方法、模型成功的标准和评价指标等方面进行总结。结果变应性鼻炎相关动物模型包括西医病理模型和中医病症结合模型,动物选择多使用豚鼠、小鼠、大鼠、新西兰兔等。结论总结已有AR动物模型的种类、方法和评价指标以及在AR发病机制研究中的应用,可为后续AR的深入研究提供参考。

玉屏风颗粒治疗大鼠变应性鼻炎的血清氨基酸代谢组学研究

目的:研究玉屏风颗粒对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠血清氨基酸含量的影响,探讨玉屏风颗粒治疗AR的疗效和作用机制。方法:将40只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、玉屏风颗粒组、枸地氯雷他定组四组。采用卵清蛋白造模法建立AR大鼠模型,玉屏风颗粒组、枸地氯雷他定组以相应药物干预,应用气相色谱-质谱联用技术检测氨基酸含量,分析药物干预后AR大鼠血清样本代谢谱的变化,找出有统计学意义的差异代谢物,并进一步分析相关代谢通路。结果:造模后AR血清代谢谱发生了显著变化,玉屏风颗粒干预后逆转了精氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺及谷氨酸等的变化(P<0.05),使AR大鼠血清氨基酸含量较枸地氯雷他定组更趋于正常对照组。结论:玉屏风颗粒干预后,AR大鼠血清氨基酸含量有所逆转,证实了玉屏风颗粒治疗AR的一定疗效,通过血清氨基酸代谢物回归趋势可从侧面证实其在治疗AR中发挥着一定的抗炎、调节免疫作用。

生命早期益生元干预对变应性鼻炎大鼠模型的免疫调节研究

目的通过建立初生大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)动物模型,检测AR大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞及血清Th1/Th2细胞因子水平,以探讨益生元在防治AR中的作用。方法将新生Wistar大鼠与母鼠同笼适应性喂养7 d,选取其中24只大鼠,随机分成4组,每组6只,分别为卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,生理盐水灌胃对照组;OVA致敏,益生菌干预组;OVA致敏,益生元干预组;OVA致敏,合生元(益生菌+益生元)干预组。灌胃9周后以ELISA法检测大鼠血清中Th1/Th2型细胞因子白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的表达情况;采用HE染色检测鼻黏膜中嗜酸性粒细胞的表达情况。结果AR大鼠模型构建成功,对照组鼻腔黏膜组织中可见大量嗜酸性粒细胞浸润,血清IL-12、IFN-γ低表达,IL-4高表达。鼻黏膜中嗜酸性粒细胞在生理盐水灌胃对照组中高于合生元(益生菌+益生元)干预组(P<0.05)。IL-12、IFN-γ表达在对照组中低于合生元干预组(P<0.05)。而对照组与益生菌干预组、益生元干预组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益生元联合益生菌生命早期干预可以激活并推动Th1型免疫进程,动态平衡机体免疫系统,并抑制Th2型免疫反应同时抑制过敏反应的发生。

芪柴煎剂对变应性鼻炎大鼠血清IL-4,IFN-γ影响的实验研究

目的:研究芪柴煎剂(自拟方)对变应性鼻炎大鼠模型血清IL-4、IFN-γ的影响,探讨其对变应性鼻炎大鼠的作用疗效。方法:应用卵清蛋白将实验大鼠制作成变应性鼻炎模型,随机分为正常对照组(A组)、芪柴煎剂低剂量组(B组)、高剂量组(C组)、地氯雷他定组(D组)、模型对照组(E组)各8只。连续14 d分别给予对应的药物,A组、E组以蒸馏水替代。用双抗体夹心ELISA法检测血清IL-4、IFN-γ的含量。结果:各实验组血清IL-4含量较模型对照组明显偏低,差异均有统计学意义(P<0.05);芪柴煎剂低剂量组IL-4含量高于芪柴煎剂高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。各实验组血清IFN-γ含量高于模型对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);芪柴煎剂低剂量组、地氯雷他定组IFN-γ含量低于高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芪柴煎剂能够下调变应性鼻炎大鼠血清IL-4水平;上调IFN-γ水平。

变应性鼻炎模型气道Th1和Th2失衡的研究

目的：通过对大鼠变应性鼻炎模型上、下气道Th1和Th2失衡的研究，探讨上、下气道炎症反应的相关性及其机制。方法：以卵蛋白为致敏原建立大鼠变应性鼻炎模型。HE染色观察鼻黏膜和肺组织的病理学改变；免疫组化检测鼻黏膜和肺组织中IL-5和IFN-1的表达；以酶联免疫吸附测定法（enzyme—linked immunosorbentassay，ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（bronchialalveoluslavagefluid，BALF）中IL-5和IFN-γ的水平。结果：变应性鼻炎大鼠模型组鼻黏膜和肺组织有明显炎症细胞浸润。模型组鼻黏膜和肺组织IL-5的表达明显高于对照组，并且和嗜酸性粒细胞的数量呈正相关。模型组鼻黏膜和肺组织IFN-γ的表达低于对照组。模型组BALF中IL-5的含量高于对照组，而IFN-γ的含量低于对照组。结论：变应性鼻炎大鼠上、下气道有Th1和Th2的失衡，鼻的变应性炎症不仅导致鼻黏膜局部的病理学和免疫组织学的改变，同时还引起下气道的炎症反应。

变应性鼻炎大鼠TNFAIP3基因在鼻腔上皮细胞的表达

目的研究致敏-治疗过程中肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(tumor necrosis factor alpha-induced protein 3,TNFAIP3)基因在大鼠鼻腔黏膜上皮的表达,探讨TNFAIP3基因在变应性鼻炎免疫进程中的作用。方法本实验于在2019年1月—2020年1月开展,将24只Wistar大鼠,随机分为对照组、模型组、治疗组各8只。卵清蛋白构建变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠模型并评价造模效果;免疫组化法检测大鼠鼻腔黏膜组织中促炎因子核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、TNFAIP3的表达情况;采用qRT-PCR检测鼻黏膜中NF-κB和TNFAIP3基因表达的情况。结果AR大鼠模型构建成功,模型组鼻腔黏膜组织中可见大量嗜酸性粒细胞浸润,NF-κB阳性显色密集,TNFAIP3阳性显色罕见。鼻黏膜中NF-κB基因表达在模型组中高于治疗组与对照组(P<0.05)。TNFAIP3基因表达在模型组中低于治疗组与对照组(P<0.05)。结论锌指蛋白TNFAIP3作为炎症触发因子NF-κB的负调控因素,可阻止机体变应性炎症反应的发展。

健脾通窍丸对AR模型大鼠血清总IgE、IL-4含量的影响

目的:探讨健脾通窍丸治疗治疗变应性鼻炎的作用机理。方法:按参考文献复制变应性鼻炎大鼠模型,观察健脾通窍丸对大鼠鼻部症状、血清总IgE、IL-4含量的影响。结果:健脾通窍丸对大鼠鼻部症状有明显的抑制作用,能显著降低总IgE、IL-4值,与模型组比较,差异非常显著(P<0.01);治疗组与阳性对照组比较,差异不显著(P>0.05)。结论:健脾通窍丸对变应性鼻炎具有治疗作用,其作用机理与抑制血清总IgE、IL-4值的产生有关。