麻疹病毒抗原性变异及免疫保护效果研究

目的 了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况以及麻疹疫苗的免疫保护效果。方法 采用麻疹国际标准株Edmonston株、疫苗株沪191与近几年浙江省分离的麻疹野毒株 (浙 98- 5和浙 0 0 - 4 )分别制备免疫血清 ,与各毒株进行交叉中和试验 ,并分别对不同来源的人群血清测定中和抗体滴度。结果 麻疹野毒株浙 98- 5与疫苗株沪191和Edm株的抗原比分别为 3 0和 2 6 ,浙 0 0 - 4与上述两毒株的抗原比分别为 7 30和 5 6 5 ,其抗原性存在着明显的差异。麻疹疫苗初免儿童和麻疹急性期病人血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度 (GMT)分别为 15 0 3和 5 0 4 ,明显低于疫苗株沪191,GMT分别为 6 8 12和 11 76。但健康人群血清对两毒株的中和抗体滴度无显著性差异。结论 浙江省麻疹野毒株已出现较明显的抗原性变异 ,现行麻疹疫苗的免疫保护效果也受到一定影响。

H9N2亚型禽流感病毒抗原性变异的研究

对1998—2002年间在河南省豫北地区分离到的5株H9N2亚型禽流感病毒的抗原性变异进行了研究。经HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验及攻毒保护试验证明，5株H9N2亚型间已经发生了抗原性漂移。98A5和99S毒株间的保护力接近100％，HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验的相关性均在0．74以上。表明2毒株间的抗原性相近；用00Y毒株攻击其他4株免疫的鸡，其保护率仅为60％～80％；而02Y株对除00Y株外的4株的免疫保护率分别为60％、75％、80％、100％，与分离年代呈负相关性，HI、鸡胚中和试验、细胞中和试验也取得类似结果，说明2000年后的毒株间已发生抗原性变异。

近年来典型ND分离株的致病性和抗原性变异研究

8株ND分离株经过毒力测定 (MDT小于 4 7h ;ICPI大于 1.6 5 )均属于NDV强毒 ,交互凝集抑制试验表明 :分离株与C3 0 和F48株在HI效价上差 1～ 3个滴度 ;攻毒试验表明不同毒株致病性明显不同 ;鸡胚中和试验则表明 ,LaSota单因子血清对分离株有中和作用 ,但中和滴度有明显差异。

近年来流感病毒抗原性变异的比较

目的了解流感病毒既往流行株与当前流行株抗原性变异的幅度.方法用2000年以来流行的与当前流行的A1、A3、B三株流感病毒株的标准抗原与免疫血清作交叉血凝抑制试验,根据所得数据计算抗原比,进行抗原性变异幅度分析.结果A1型2个流感病毒毒株间的抗原比为2.6;A3型4个流感病毒毒株间的抗原比为1.2～13.2;B型5个流感病毒毒株间的抗原比为1.8～22.6.结论自2000年以来,A1、A3型流感病毒抗原性变异幅度较小,B型流感病毒抗原性变异幅度较大.

浙江省麻疹野毒株抗原性变异分析

目的 了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况。方法 采用麻疹病毒标准株Edmonston、疫苗株沪1 91 与近几年浙江省分离的麻疹野毒株 (浙江 /5 /98和浙江 /4 /2 0 0 0 )分别制备免疫血清 ,与各毒株进行交叉中和试验。结果 麻疹野毒株浙江 /5 /98与疫苗株沪1 91 和Edm株的抗原比分别为 3 0和 2 6,浙江 /4 /2 0 0 0与上述 3毒株的抗原比分别为 7 3和 5 65 ,其抗原性存在着明显的差异。结论 浙江省麻疹野毒株已出现明显的抗原性变异。

H_3N_2流感病毒变异株抗原性的分子学研究

目的研究分离的H3N2流感病毒变异株的分子学抗原特性。方法将国内分离确认的几株甲3亚型流感病毒进行双向交叉血凝抑制实验,比较抗原性差异;同时进行HA1基因特性分析。结果从抗原性及HA1基因特性分析看出A/深圳/1/99与A/福建/151/2000和A/广东/448/2001差异较小,而与以前流行株A/京防/47/92差异较大。结论A/深圳/1/99发生抗原变异,但变异不大,未产生大规模流行。

2013年云南省H9N2亚型禽流感病毒两个进化分支毒株抗原性变异分析

为明确2013年云南省H9N2亚型禽流感病毒Ⅲ-1和Ⅲ-2小分支间是否存在抗原性差异,以及这种抗原性差异是否与氨基酸位点变异有关,从2个小分支中选取7个毒株与疫苗株进行系统发育分析和血清学交叉比对试验。结果表明,2个小分支HA基因核苷酸序列同源性为86.6%~98.4%,与2000年前疫苗株亲缘关系较远,Ⅲ-1分支与2000年后疫苗株（ACKLGQ113和ACKDL2010）亲缘关系较近。血清学交叉比对试验结果经统计学分析显示,Ⅲ-1和Ⅲ-2小分支间抗原性存在差别。氨基酸比对结果表明,不同进化亚分支毒株与疫苗株相比氨基酸存在变异;与已报道的抗原表位关键性位点相比,Ⅲ-1分支中部分毒株抗原表位关键性位点存在变异,Ⅲ-2分支毒株无变异,但在其他8个氨基酸位点存在特有变异,是否存在未知抗原表位关键性位点,以及其他氨基酸位点变异是否会辅助性影响抗原变异,还有待进一步研究。

丙型肝炎病毒高变区1合成肽抗原性验证

设计合成丙型肝炎病毒高变区 1合成肽 ,并验证其抗原性。应用计算机软件设计抗原肽 ,合成后免疫小鼠 ,检测小鼠血中抗体滴度 ;计算机模建抗原肽结构 ,预测其抗原性。 7条合成肽中 ,计算机模建显示第 4、5、6、7号肽具有较好的抗原性 ,酶联免疫吸附实验表明第 4、6、7号肽可使机体产生抗体 ,抗原性较强 ,二者结果基本相符。

乙型肝炎病毒核心基因启动子变异对HBeAg表达及病情的影响

目的:研究乙型肝炎病毒核心基因启动子(HBVBCP)变异对HBeAg表达及病情的影响。方法:采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术,对176例HBV慢性感染者血清进行检测HBVBCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764G→A联合突变。采用ELISA检测技术,检测患者血清HBV标志物。结果:在176例HBV慢性感染者中检出HBVBCP区T1762A1764G变异者73例,HBVBCP变异的阳性率为41.5%,HBVBCP变异在HBeAg阴性病例的阳性率为49.4%,显著高于HBeAg阳性病例的阳性率33.3%。HBVBCP双变异在慢性乙型肝炎轻、中、重度组,肝炎肝硬化组,慢性重症肝炎组和原发性肝癌组的阳性率分别为28.0%、31.4%、34.2%、39.4%、60.0%和70.0%。各型肝病与HBVBCP变异的阳性或阴性进行相关分析,结果有显著性差异。结论:本组病例HBVBCP变异的阳性率为41.5%,变异可引起HBV感染者的HBeAg阴转。HBVBCP变异与HBV慢性感染的临床类型呈正相关,随着病情加重,BCP变异的阳性率有增高趋势。

汉坦病毒抗原性差异及其基因分型

用抗汉坦病毒单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对汉坦病毒Ｂ７８株（来自病人血）和Ｒ１７８株（分离自褐家鼠）进行间接免疫荧光试验，以分析病毒的单克隆抗体反应谱，又用病毒免疫血清进行交叉中和试验，结果表明，两株病毒均具有双型（Ⅰ型／ＨＴＮ型和Ⅱ型／ＳＥＯ型）反应特征，但Ｒ１７８株基本上属于Ⅰ型。用汉坦病毒Ⅰ－Ⅳ型型特异性引物进行ＰＣＲ扩增，Ｂ７８株用Ⅰ型和Ⅱ型引物均得到特异性扩增，而Ｒ１７８株虽经重复扩增均未见特异性扩增片段。初步认为，Ｂ７８株和Ｒ１７８株可能是发生在宿主转换（野鼠→家鼠）过程中介于Ⅰ型和Ⅱ型之间的过渡型变异株，而这类双型病毒在自然界中可能比较常见。这对阐明汉坦病毒的变异规律及广谱抗原性毒株的研制具有一定的理论和实际意义。

甲型流感病毒流行与变异

甲型流感病毒的抗原变异与流感的发生和流行密切相关。其抗原性变异的形式有两种:一种为抗原性漂移(an-tigenic drift),主要是由于编码血凝素(HA)或神经氨酸酶(NA)蛋白基因的一系列点突变,导致了H或N蛋白分子上抗原位点氨基酸的替换与同一亚型内HA和NA基因发生点突变有关,属量变,可引起中、小型流行;另一种为抗原性转变(antigenic shift),是指当细胞感染两种不同亚型的流感病毒时,病毒基因组的节段发生重配。抗原发生大幅度变异,属质变,往往形成新亚型,易造成大流行。在实验条件下常采用亚中和剂量的抗血清来选择变异株,不同年代分离的毒株的核苷酸序列比较研究可以看到核苷酸点突变积累是导致抗原漂移的重要原因。故非常难以预防。

支气管扩张试验对老年咳嗽变异型哮喘患者中的诊断价值

目的探讨肺通气功能和支气管舒张试验对老年咳嗽变异型哮喘(CVA)的诊断价值。方法对CVA组48例患者(分为激素组和非激素组,各24例)、慢支组32例患者和健康组30例老年人的临床资料进行分析。观察肺活量(VC)、第1秒钟用力呼气量(FEV_1)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV_1/FVC %)、最大呼气中期流速(MMEF)及支气管扩张试验的效果。结果CVA组患者VC、FVE_1、FEV_1/FVC%与慢支组患者相比差异无明显意义(P>0.05),但低于健康老年人(P<0.05)。支气管扩张试验后,CVA组支气管扩张试验阳性,且FEV_1变异率显著高于慢支组和健康组(P<0.01)。激素组哮喘患者VC、FEV_1、FEV_1/ FVC%与非激素组差异无明显意义(P>0.05),但激素组的FEV_1变异率较非激素组病人改善明显(P<0.05)。结论支气管扩张试验是诊断和鉴别老年咳嗽变异型哮喘有价值的方法。平喘药联合激素治疗疗效确实。

YK系无机抗菌功能材料的安全性实验研究

抗菌功能材料的安全性指标对其产业化前景有着重要影响。本文按照有关食品医药的标准要求,用YK系无机功能材料对白鼠进行急性毒性经口、经皮试验(半数致死量LD50)和精子畸形试验,还给出了变异原性等试验结果。结果表明,YK系无机抗菌功能材料安全性高、抗菌性能好。

3种禽类呼肠孤病毒血清学相关性及致细胞病变差异分析

本研究旨在研究3种不同疾病型禽类呼肠孤病毒间的抗原性关系及病毒的培养特性。作者通过血清中和试验测定了禽呼肠孤病毒(ARV S1133株)、番鸭呼肠孤病毒(MDRV 9710株)、新型鸭呼肠孤病毒(NDRV NP01株)3种禽类呼肠孤病毒的血清学相关性,统计抗原相关性R值;并应用部分禽胚原代细胞及哺乳动物传代细胞对这3种病毒的培养特性进行了初步研究。结果表明,3种病毒株之间的R值很小,抗原相关性较低;三者具有广泛的细胞亲嗜性,能在多种细胞中增殖,并产生细胞病变,但病毒致细胞病变特征有所差异,ARV和NDRV均以巨融合为主,而MDRV则以细胞圆缩坏死为主。上述结果表明导致禽类不同疾病的ARV、MDRV和NDRV三者之间的抗原相关性较低,病毒的细胞培养特性也不同,细胞病变类型的差别提供了一种初步鉴别禽类呼肠孤病毒的方法。

郑州市儿童流行性感冒监测分析

目的 :监测流行性感冒 (流感 )的流行趋势 ,追踪可能出现的流感病毒变异株 ,对流感流行尽可能作出较准确的预测预报 ,及时制定防制措施 ,降低流感对人类的危害。方法 :1 999年至 2 0 0 2年以郑州市儿童医院作为哨点医院 ,收集上呼吸道病例与门诊病例的总数 ,采集流感样病例咽拭子标本 71 8份 ,用鸡胚分离、MDCK细胞培养分离鉴定病毒。于 2 0 0 2年采集 4 4 7名 5～ 1 3岁儿童全血 ,进行红细胞凝集试验检测 3个型别流感病毒抗体水平。结果 :1 999年 1月至 2 0 0 2年 4月 ,上呼吸道感染病例占门诊病例的 6 0 .1 7%～ 6 9.0 3% ,2 0 0 2年 5～ 1 2月流感样病例占门诊病例的 1 0 .6 2 % ,分离出流感病毒 5 1株 ,其中H3N2、H1N1和B型分别占 4 9.0 2 %、2 9.4 1 %和 2 1 .5 7% ,健康儿童H3N2抗体阳性率和保护性抗体分别为 95 .30 %和 74 .2 1 % ,明显高于H1N1和B型 (P <0 .0 1 )。结论 :近年来H3N2、H1N1和B型在郑州市混合流行 ,H3N2为流行优势株 ,由于H3N2和H1N1抗体水平较高 ,如果病毒没有较大的变异和新毒株的出现 ,发病不会突然增多 ,但由于B型抗体水平较低 。

四川省1995~1999年流行性感冒流行病学分析

目的 :对四川省 1995～ 1999年流感流行病学和病原学监测资料进行分析。结果 :我省 1996年和 1998年流感发病率上升主要是由于流感病毒抗原性变异引起 。

鸭1型甲肝病毒亚型的鉴定

为了明确引起雏鸭胰腺炎的新型鸭1型甲肝病毒（duck hepatitis A virus 1,DHAV-1）的分类地位,通过鸭胚血清交叉中和试验测定并分析其与经典的肝炎型DHAV-1的抗原相关性。经血清交叉中和试验测得抗胰腺炎型DHAV-1阳性血清对胰腺炎型DHAV-1、经典的肝炎型DHAV-1的中和效价分别为1∶169.8、1∶91.2,而抗肝炎型DHAV-1阳性血清对经典的肝炎型DHAV-1、胰腺炎型DHAV-1的中和效价分别为1∶125.9、1∶89.1。参照同属小RNA病毒科的口蹄疫病毒血清型、亚型的划分标准,计算得出胰腺炎型DHAV-1与经典的肝炎型DHAV-1间的抗原亲源值（R）为0.62,介于0.32-0.7之间,表明胰腺炎型DHAV-1与经典的肝炎型DHAV-1相比其抗原性发生了较大变异,定名为鸭1型甲肝病毒亚型（DHAV-1a）。

2004年云南省部分地区流感暴发的病因研究

目的分析2004年云南省流感暴发的病因,探讨流感流行优势株抗原性和基因特性变异特征。方法从暴发疫情中采集标本,用MDCK细胞分离流感病毒,对所分离的毒株用血清学方法进行抗原分析,并对其编码HA1区进行序列测定和分析。结果从146份标本中分离到54株流感病毒,其中A3亚型27株,B型27株。62%的A3亚型毒株与A/福建/411/2002(H3N2)的血凝抑制效价有4倍或以上差别;5.8%的Yamagata系毒株与B/上海/361/2002的血凝抑制效价有4倍或以上差别;10.8%的Victoria系毒株与B/浙江/2/2001的血凝抑制效价有4倍或以上差别。无论是A3亚型还是B型毒株HA1区的某些位点均发生了氨基酸的替换。结论2004年云南省流感暴发点分离的A3和B型毒株其抗原性和基因特性与疫苗株相比发生了变异。

猪瘟病毒基因2型流行毒株和疫苗C株抗血清与相应E2蛋白交叉免疫反应性分析

为研究猪瘟病毒(CSFV)2.1基因亚型病毒株和疫苗C株E2蛋白与相应抗血清的免疫反应性差异,本研究在分析4株CSFV浙江流行株(QZ-14、JH-14、QZ-07和HZ-08)与疫苗C株E2变异程度的基础上,制备了流行病毒株和疫苗C株全病毒猪抗血清以及针对流行株E2的单克隆抗体(MAb)4F4,比较了它们与同源株和异源株重组杆状病毒表达的E2蛋白的亲和性。结果显示,4株浙江分离株中2株(QZ-14和JH-14)属于亚型2.1d,另2株(QZ-07和HZ-08)为亚型2.1b,它们与C株E2的核苷酸同源性在82%~84%;间接免疫荧光鉴定显示MAb 4F4能够识别4株流行株,但不与C株反应;接种流行株的动物均出现不同程度临床症状;ELISA分析显示疫苗C株血清与流行株E2蛋白的反应性约为C株E2蛋白的27%~49%,2株流行株感染血清与C株E2蛋白反应性约为流行株E2蛋白的34%~50%,免疫印迹分析显示类似结果。以上结果表明CSFV基因2型流行株与疫苗C株E2蛋白的差异显著影响其与相应抗血清的交叉免疫反应性,这一现象是否与C株猪瘟疫苗免疫保护效果下降有关还有待于进一步研究。