猪流行性腹泻病毒变异株疫苗免疫剂量和血清中和效价研究

为了研究猪流行性腹泻病毒变异毒株灭活疫苗的免疫剂量及免疫后抗体的中和效价,选择初产母猪于产前42 d首次免疫,后海穴注射,间隔21日以相同剂量和方法加强免疫,免疫剂量分别为0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL和4.0 mL,采集母猪血清和仔猪血清,采用变异强毒株、经典毒株CV777进行血清中和试验分析免疫抗体效价,ELISA抗体检测试剂盒检测血清IgG抗体效价。结果表明,2 mL、4.0 mL免疫剂量组血清抗体与变异毒株中和效价均≥1∶128,与CV777中和效价≤1∶64,二免后母猪血清IgG抗体S/P值均>2.0,仔猪断奶时母猪血清抗体S/P≥1.4,0.5 mL、1.0 mL免疫组抗体中和效价、S/P值均较低。确定2 mL为最佳免疫剂量,加强免疫后血清抗体中和效价≥1∶128,对母猪损伤小,经济效益高。

猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗和变异株灭活疫苗的免疫效果评价

分别采用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1R致弱毒疫苗株和变异毒株灭活疫苗免疫接种40日龄～45日龄仔猪,免疫接种后4周,用高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN-4变异株强毒攻毒,攻毒后21 d剖检,取主要器官作病理组织学观察和病毒抗原定位。结果显示变异毒株灭活疫苗免疫攻毒后导致的病理变化和病毒抗原分布程度均明显高于CH-1R弱毒疫苗免疫组。免疫病理学研究结果表明CH-1R弱毒疫苗对HU-4株强毒免疫保护效果好于变异毒株灭活疫苗。

急性弛缓性麻痹病例中Ⅱ型脊髓灰质炎疫苗病毒变异株基因特征分析

研究Ⅱ型脊髓灰质炎（脊灰）疫苗变异株的基因特征，为我国使用口服脊灰减毒活疫苗／脊灰灭活疫苗使用策略，维持无脊灰状态和全球最终消灭脊灰提供科学依据。根据型内鉴定的检测结果，从2000-2001年AFP病例分离到的Ⅱ型脊灰疫苗变异株中选取有聚集性的5株病毒进行全基因组序列测定（贵州省3株、山东省2株），并进行核苷酸、氨基酸同源性分析。贵州省3株病毒全基因组序列完全一致，但与SabinⅢ型病毒发生重组，重组区域在3A区（nt5343-5353）；与疫苗株相比，Ⅱ型区域变异10个碱基，其中VP1区变异4个，与SabinⅡ型株核苷酸同源性为99．56％，氨基酸同源性99．34％；Ⅲ型区域变异9个碱基。山东省2株病毒全基因序列共享16个突变位点，没有发生重组，与SabinⅡ型株相比，VP1区分别变异7个和4个碱基，核苷酸同源性分别为99．22％和99．56％，氨基酸同源性分别为99．0％和99．67％。上述5株病毒在重要的减毒位点nt481、nt2909均发生突变。此研究中5株病毒分属于两个不同的传播链，但是共享nt481、nt2909、nt2992三个突变位点，这3个突变位点不在重组区域内，他们的共同作用可能是影响病毒传播力的重要因素，但目前尚无证据证明脊灰疫苗病毒型间重组会增加病毒的毒力及传播力。

PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗免疫特性的研究

为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株疫苗的免疫机理和明确PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗各自的免疫特性,本实验分别采用PRRSV变异株(HuN4)活疫苗和PRRSV变异株(JXA1)灭活苗免疫PRRSV抗原和抗体阴性的健康断奶仔猪,免疫后21d用PRRSV变异株HuN4强毒攻毒,ELISA方法检测血清中PRRSV特异的抗体水平及TNF-α、IFN-α、IL-1、IL-6和CRP细胞因子水平,荧光定量RT-PCR方法检测病毒血症的发生和持续情况,并取主要器官进行病理组织学观察。结果表明:HuN4活疫苗组免疫后14d便可检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后5d各细胞因子水平升高,攻毒后21d病毒血症完全消失,免疫后各器官没有明显病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化轻微;JXA1株灭活苗组免疫期间没有检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后5d～9d各细胞因子水平升高,攻毒后病毒血症持续存在,免疫后各器官有轻微病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化比HuN4活疫苗组严重,但比对照组明显减轻。本实验表明,HuN4活疫苗能够快速有效的激发机体的体液免疫反应,在抵抗PRRSV变异株HuN4强毒攻毒时,临床症状明显优于JXA1灭活苗。

新型冠状病毒变异株疫苗非临床研究评价的考虑

新型冠状病毒(简称新冠)肺炎疫情自暴发至今已近3年,给全球人类健康、经济发展和社会稳定带来严重的负面影响,而预防用新冠疫苗是缓解和终止疫情的重要手段。目前国内已有多款新冠疫苗获批附条件上市,如灭活疫苗、重组蛋白疫苗和腺病毒载体疫苗等。与大多数RNA病毒一样,新冠病毒易发生突变。

菏泽市曹县一例脊灰疫苗高变异株病毒病例监测处理分析

2011年3月菏泽市曹县发生一例脊灰疫苗高变异株病毒病例,先将该病例的调查监测处理分析如下。1病例情况1.1一般情况患者李天宇,男,2010年6月22日出生,三胎,计划外生育儿童。家长李大兴,现居住曹县古营集镇北李庄村。1.2诊疗经过患儿于2011年3月25日出现发热、腹泻后于3月26日出现双下肢无力,发热2-3天,最高体温达38℃,随后出现昏迷。

1例脊髓灰质炎疫苗变异株病毒病例监测、诊断、处理分析

讨论脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例的监测、诊断、处理方法与预防脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例发生的策略。根据此病例的个案调查、预防接种相关信息、临床诊断、治疗与脊髓灰质炎实验室病毒检测等方面的资料进行分析。脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例监测、诊断、处理仍需改进,须严格把握Ⅰ+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗接种禁忌证,进一步改进消灭脊髓灰质炎免疫策略,预防脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例的发生。

浙江省1例AFP病例检出脊髓灰质炎疫苗高变异株病毒的流行病学调查

2021年6月,浙江省1例6月龄急性弛缓性麻痹(AFP)监测病例检出Ⅲ型脊髓灰质炎(脊灰)疫苗高变异株病毒(VHPV),分离培养的病毒与Sabin疫苗株相比在VP1区有6个核苷酸变异。病例有3剂次脊灰疫苗免疫史,发病时左上肢肌力Ⅱ级,临床诊断为肩蜂窝织炎(左侧),经治疗后恢复正常,神经系统检查无异常,痊愈出院。病例后续采集的标本中未再分离到VHPV,密切接触者中未检出VHPV,病例所在县区医疗机构主动搜索及社区人群搜索未发现类似病例。由于病例未出现VHPV所致脊灰的类似临床症状,经专家组讨论排除脊灰。本例VHPV发现及时,并采取有效措施,未造成病毒进一步传播,提示需继续保持AFP病例监测系统的敏感性,提高适龄儿童脊灰疫苗接种率,遏制脊灰病毒传播和流行。

多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法的建立及验证

目的 建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法并进行验证。方法 以不同新型冠状病毒变异株mRNA为靶基因,选取各自保守序列设计引物和探针,建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法,并进行了线性范围、重复性、准确度、中间精密度、耐用性和适用性等方法学验证。结果 mRNA浓度在1~150 pg·mL^(-1)内时线性良好;重复性变异系数(coefficient of variation,CV)<10%;准确度回收率84%~114%,CV<10%;中间精密度和耐用性CV均<5%;并且4种不同二价新型冠状病毒mRNA疫苗组份比例检测结果CV均≤5%。结论 建立的多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法灵敏度高,稳定性好,特异性强,适用于多价新型冠状病毒mRNA疫苗进行组分比例和含量检测。

一例疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎病例的流行病学调查与分析

随着口服脊髓灰质炎（脊灰）减毒活疫苗的广泛使用，脊灰野病毒的传播和流行已得到有效控制，野病毒病例明显减少。浙江省慈溪市自1991年至今未发生由脊髓灰质炎病毒野毒株引起的急性弛缓性麻痹（AFP）病例，于2000年10月通过卫生部无脊髓灰质炎状态的证实报告。然而，2005年5月慈溪市出现一例贵州籍AFP病例，

四川省1例脊髓灰质炎疫苗高变异株病例的流行病学调查与分析

目的阐述四川省1例脊髓灰质炎(脊灰)疫苗高变异株病例的流行病学调查与分析。方法按照相关要求,对疫情开展病例个案调查、实验室检测、病毒传播风险评估、应急处置等相关工作。结果 2014-06,四川省发现1例脊灰疫苗高变异株病例。事件发生后,四川省严格按照相关要求开展了多项应急处置措施,成功控制疫情,未再发现新发病例。结论通过本次事件的应对证明了《脊髓灰质炎野病毒输入性疫情和疫苗衍生病毒相关事件应急处置技术方案(试行)》的有效性和可操作性。同时,本次事件也暴露出了四川省在维持无脊灰工作中存在的一些漏洞和不足,需在今后的工作中不断完善和改进。

北京1例庞贝氏症伴脊髓灰质炎疫苗高变异株携带者的流行病学调查

目的对北京市1例庞贝氏症携带脊髓灰质炎(脊灰)疫苗高变异株(Vaccine High-mutant Poliovirus,VHMPV)患儿进行流行病学调查分析。方法开展病例的个案调查、消毒隔离、排毒监测、病毒传播风险评估,召开急性弛缓性麻痹(AFP)病例分类诊断专家会对病例进行最终分类诊断。结果 2015年7月报告1例AFP病例,麻痹后采集2份合格粪便标本,经国家脊灰实验室核苷酸序列测定为VHMPVⅢ。患儿2月龄接种1剂脊灰灭活疫苗,3、4月龄分别口服1剂脊灰减毒活疫苗;排毒监测患儿及其密切接触者粪便标本中脊灰病毒分离均为阴性;患儿所在居委会接种率普查发现1例脊灰疫苗零剂次免疫儿童;昌平区所有街乡学龄前儿童脊灰疫苗查漏补种发现漏种率0.18%,补种率100%;医院AFP主动搜索发现1例AFP漏报病例;病例采取消化道隔离措施直至疫情结束。病例分类诊断为脊灰排除病例,临床诊断为庞贝氏症。结论患儿的弛缓性麻痹症状为其原发病庞贝氏症所致,是一名VHMPVⅢ携带者。病例所在区应进一步加强AFP病例监测,夯实常规免疫和查漏补种工作。

山东省1例脊髓灰质炎疫苗高变异株病例的变异分析

为了解山东省2011年分离的1株脊髓灰质炎（脊灰）疫苗高变异株的基因特征,并对该病例接触者标本进行病原学鉴定及分析。本研究对采集的2份病例及40份接触者粪便标本进行病毒分离,对脊灰病毒进行全基因组序列测定和分析,对非脊灰肠道病毒进行VP1区序列测定,并将分离率较高的柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）B1和CV-B3与国内外其他地区分离株进行VP1区同源性及系统进化树分析。其中病例标本中分离到1株脊灰病毒（P1/11186）,1株CV-A4和1株CV-A8;接触者标本中分离到1株CV-A2、10株CV-B1、5株CV-B3和埃可病毒（Echovirus,E）3型、12型、14型各1株,提示当地可能存在肠道病毒流行,应加强监测。P1/11186为Ⅰ型脊灰疫苗病毒,在2A及3A区分别与Ⅱ型和Ⅲ型脊灰病毒发生重组,与相应的疫苗株相比全基因组共有25个核苷酸、9个氨基酸发生变异,其中VP1区8个核苷酸、5个氨基酸发生突变。CV-B1和CV-B3的同源性分析显示10株CVB1之间核苷酸同源性为97.0%~100%,氨基酸同源性为98.9%~100%;5株CV-B3之间核苷酸与氨基酸同源性分别为92.6%~100%与99.2%~100%。CV-B1与CV-B3VP1完整编码区进化树分析显示,山东分离株与国内其他省份分离株亲缘关系较近,位于同一基因簇,与世界其他地区分离株位于不同分支。

河南省2018年1例脊髓灰质炎疫苗高变异株病毒病例的调查处置

目的分析河南省2018年1例分离出脊髓灰质炎(脊灰)疫苗高变异株病毒(Vaccine-hypervariable poliovirus,VHPV)的急性弛缓性麻痹(Acuteflaccidparalysis,AFP)病例的调查处置。方法对该例AFP病例进行个案调查、脊灰病毒分离和鉴定,开展排毒监测、隔离消毒、AFP病例主动搜索和接种率评估,分析传播风险。结果从该AFP病例及其两名密切接触者粪便标本中分离出脊灰病毒,均鉴定为Ⅲ型VHPV;病例无残留麻痹。当地未发现漏报AFP病例,2月龄-5岁儿童各剂次脊灰疫苗接种率>99%,对病例和接触者采取隔离消毒等措施后,未再发现VHPV。结论高水平脊灰疫苗覆盖率、高质量AFP病例监测和及时采取控制措施是阻断本起VHPV疫情传播的关键。

一例来京就诊脊髓灰质炎疫苗病毒高变异株病例的流行病学调查与分析

目的阐述1例来北京市就诊的脊髓灰质炎(脊灰)疫苗病毒高变异株病例的流行病学调查与分析。方法对疫情开展病例个案调查、排毒监测、病毒传播的风险评估,参考《高危和聚集性AFP病例调查指南》要求,对病例进行消毒和隔离。结果 2010年7月,北京市从1例江西省来京就诊的急性弛缓性麻痹病例中分离到脊灰病毒,经国家脊灰实验室核苷酸序列测定为Ⅲ型脊灰疫苗病毒高变异株。患儿曾在原籍口服一剂脊灰减毒活疫苗(OPV),但接种过程不规范。结论该病例最终经专家小组分类诊断为疫苗相关麻痹型脊灰病例,通过采取相关措施,最终控制了疫情的蔓延。

脊髄灰质炎疫苗Ⅲ型高变异株1例病例的应急处理与思考

2010年5月21日,北京市某医院在检索中国疾病预防控制信息系统时,发现本辖区内出现一例疑似AFP（急性弛缓性麻痹）病例,随即电话报告所属疾病预防控制（疾控）中心,当日专业人员对疑似AFP病例进行了流行病学调查,经调查和实验室诊断确诊为脊髄灰质炎（脊灰）疫苗Ⅲ型高变异株病例。病后60 d随访,患儿精神状态佳,双上肢活动情况良好,左侧下肢活动度较差。

山东省烟台市1例脊髓灰质炎疫苗高变异株病例的流行病学调查

目的 分析烟台市蓬莱区2017年1例脊髓灰质炎疫苗高变异株病例的流行病学调查处置。方法 对该病例进行个案调查、排毒监测、接种率快速评估、急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例主动搜索、AFP病例监测系统运转情况评估等,分析疫情传播风险。结果 该AFP病例大便标本中检出1株Ⅲ型脊髓灰质炎疫苗高变异株病毒,病毒发生9个核苷酸变异;相邻街道社区调查适龄儿童241名,口服脊髓灰质炎减毒活疫苗3 (OPV3)接种率100%,麻疹疫苗1(MV1)接种率100%;主动搜索入院登记及门诊记录345 794条,社区搜素154户,均未发现AFP病例漏报;收集患病儿童所在社区和幼儿园0~6岁密切接触儿童粪便标本50份,未检出脊髓灰质炎疫苗高变异株病毒。结论 本次脊髓灰质炎疫苗高变异株发生可能与个人体质有关或是外环境污染引起,较高的免疫屏障及病例监测系统可有效阻断疫情传播。

大连市1例脊髓灰质炎疫苗高变株病例的流行病学调查

目的阐述大连市1例脊髓灰质炎疫苗高变异株病例的流行病学调查与分析。方法按照相关要求,对疫情开展病例个案调查、病毒传播风险评估、应急处置等相关工作,由省级AEFI调查诊断专家组对病例进行诊断。结果 2016年,大连市发现1例口服第1剂二价脊髓灰质炎减毒活疫苗后高变异株病例,国家脊灰实验室对病例所分离到的脊灰病毒进行核苷酸序列测定时发现,与Sabin株相比变异数为7。结论该病例诊断为疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎病例,按照相关要求采取措施,有效地控制了疫情的扩大和蔓延。

一例急性弛缓性麻痹病例的流行病学调查与分析

目的通过对1例急性弛缓性麻痹病例的调查分析,了解当地AFP监测现状。方法运用现场流行病学调查方法,根据脊髓灰质炎疫情应急处理预案(试行)要求,对该例AFP病例的发病过程、治疗情况、脊灰疫苗免疫史等情况进行调查,同时开展脊灰疫苗接种率调查和对病例住所周围及县人民医院AFP病例进行主动搜索。结果2004年6月,固始县段集乡发生了1例急性弛缓性麻痹病例。该病例为“零剂次”免疫儿童,于6月20日出现双侧下肢麻痹,经国家和省AFP病例分类专家诊断小组诊断为Ⅱ型脊灰疫苗变异株病例。在调查中发现,该病例周围5岁以下儿童OPV3次以上接种率仅为32.26%,OPV“零剂次”儿童占16.13%。结论计免工作存在管理混乱、疾病监测系统不敏感、存在免疫空白区等问题。提高OPV接种率是保护儿童免受脊灰野病毒、疫苗变异株病毒侵袭的有效措施。

2名健康儿童检出脊髓灰质炎疫苗衍生病毒的调查

[目的]评价上海市徐汇区2名健康儿童检出脊髓灰质炎疫苗衍生病毒(VDPV)的调查处置措施。[方法]分别对2名病毒携带者进行个案调查、粪便消毒处置、测定免疫功能,采集粪便标本分离病毒。对密切接触者和周围健康儿童粪便标本进行带毒调查、儿童脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)接种率调查、OPV查漏补种及医疗机构急性弛缓性麻痹(AFP)病例主动搜索。[结果]2名健康儿童分别检出Ⅲ型VDPV和脊灰疫苗高变异株病毒。当地儿童OPV免疫接种率较高,粪便标本均未检出阳性病毒。未发现VDPV病例。[结论]VDPV未在当地造成循环。