葡萄抗羟脯氨酸变异细胞系和抗盐变异细胞系的生化特性比较研究

对抗HYP和抗盐的葡萄变异细胞系进行了比较分析 ,结果表明抗HYP变异系细胞的脯氨酸含量是抗盐变异系的 2 .86倍 .在盐胁迫下 ,抗HYP变异系吸收的K+和Na+含量高于抗盐变异系 ,但二者的K+/Na+比值相近 .抗HYP变异系的耐盐和耐PEG的能力 ,明显比抗盐变异系强 .实验表明在筛选葡萄抗逆变异系过程中 ,以HYP作为选择压力更为适合 .

荧光染料探针分子对变异细胞的识别

介绍了变异细胞的结构特征、细胞识别与荧光标记技术以及荧光染料探针分子标记细胞的方式。简述了荧光染料探针分子用于变异细胞组织的标记与识别的研究新进展。并针对目前荧光染料探针分子的应用现状,分析了未来的发展趋势,包括增强荧光染料探针分子与人体组织的相容性、靶向性,提高其灵敏度,降低毒性等的方法和途径。简述了固相合成分离技术用于探针分子的制备与纯化的优越性。

苜蓿抗性变异细胞系的筛选

对准格尔苜蓿进行愈伤组织的诱导,以叠氮化钠和紫外线对苜蓿愈伤组织进行诱变处理,筛选其半致死浓度和剂量,并对诱变处理后的材料进行了脯氨酸含量测定,筛选出了具有抗性的苜蓿愈伤组织,为苜蓿的抗性育种提供基础材料。

普通小麦抗赤霉变异细胞系的离体筛选及其再生系抗性分析

通过禾谷镰刀菌毒素胁迫下的幼胚直接筛选、愈伤组织筛选、一步筛选和多步筛选相结合的方法, 从普通小麦千斤早和小偃22中筛选出了抗镰刀菌毒素变异细胞系,比较分析了不同筛选方法在不同筛选程序上的筛选效果,研究了再生株系R0代的抗赤霉特性。结果表明,利用毒素胁迫对优良品种进行抗赤霉细胞工程定向改良是有效可行的,可获得抗病性显著提高的变异株系;利用幼胚直接多步筛选,在高毒素质量浓度上获得抗性植株的比例和抗性提高的幅度均较从愈伤组织筛选和低毒素质量浓度上获得的效果更好。

苜蓿乙硫氨酸抗性变异细胞系的筛选及特性分析

用经返地卫星搭载诱变处理的豆科牧草紫花苜蓿 (Medicago sativa L .)干种子种植后长出的花序为外植体诱导愈伤组织 ,以 L -乙硫氨酸为筛选剂 ,通过多步正筛选途径获得了苜蓿乙硫氨酸抗性细胞系 MEr B.MEr B在脱离选择压 9个月后 ,其对 L-乙硫氨酸的抗性 I50 (生长量半抑制时的 L-乙硫氨酸浓度 )比野生型高 14.2倍 ,表明抗性系抗性表达稳定 .抗性系还表现出对 DL-甲硫氨酸的交叉抗性和对天冬氨酸族其它几种氨基酸的抗性 .游离氨基酸含量分析表明甲硫氨酸含量明显增加 .MEr B抗性系过氧化物同功酶 (POD)和酯酶同工酶谱带 (EST)与野生型有显著差异 ,表明抗性系可能发生了基因变化并产生相应的基因产物 .

胡萝卜抗HgCl_2变异细胞系的筛选

利用胡萝卜下胚轴愈伤组织 ,以HgCl2 为选择剂 ,通过多步正筛选法 ,获得了抗性变异细胞系 .抗性鉴定结果表明 ,在不同HgCl2 浓度的培养基上 ,抗性系的愈伤组织存活率和鲜质量增殖率均明显高过亲本系 ,抗性系的细胞膜透性也发生了变化 .对抗性系和亲本系愈伤组织进行再分化的结果表明 ,在连续 3～ 4代的分化培养之后 ,愈伤组织都能再生绿苗 .提出了该项研究在预防和治理重金属污染方面的重要意义 .

苜蓿乙硫氨酸抗性变异细胞系的筛选

用经返地卫星搭载诱变处理的豆科牧草紫花苜蓿 (Medicago sativa L .)干种子种植后长出的花序为外植体诱导愈伤组织 ,以 L -乙硫氨酸为筛选剂 ,通过多步正筛选途径获得了苜蓿乙硫氨酸抗性细胞系 MEr B.MEr B在脱离选择压力 9个月后 ,其对 L-乙硫氨酸的抗性 I50 (生长量半抑制时的 L-乙硫氨酸浓度 )比野生型高 14.2倍 ,表明抗性系抗性表达稳定 .抗性系还表现出对 DL-甲硫氨酸的交叉抗性和对天冬氨酸族其它几种氨基酸的抗性 .游离氨基酸含量分析表明甲硫氨酸含量明显增加 .MEr B抗性系过氧化物同功酶 (POD)和酯酶同工酶谱带 (EST)与野生型有显著差异 ,表明抗性系可能发生了基因变化并产生相应的基因产物 .

红细胞分布宽度变异系数及标准差在结直肠癌转移诊断中的临床价值

目的 探讨红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)及标准差(RDW-SD)在结直肠癌(CRC)转移诊断中的临床应用价值。方法 以91例住院CRC患者为研究对象,依据肿瘤是否转移分为2组:未转移组61例和转移组30例,分析两组患者实验室指标包括中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数、癌胚抗原、血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间以及RDW-CV和RDW-SD等。两组均数比较采用t检验,同时运用Pearson相关分析RDW-CV和RDW-SD与中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数-淋巴细胞计数比值(NLR)和癌胚抗原的相关系数,以受试者工作特征曲线(ROC)评估RDW-CV、RDW-SD、癌胚抗原及其联合诊断在评估CRC转移的曲线下面积(AUC)。结果 相较于未转移组,转移组RDW-CV和RDW-SD值升高(P<0.05)。RDW-CV和RDW-SD水平与癌胚抗原含量均呈正相关。与癌胚抗原诊断CRC转移的AUC相比较,RDW-CV或RDW-SD联合癌胚抗原的AUC增高(P<0.05)。结论 RDW-CV和RDW-SD具有鉴别诊断CRC转移的潜在临床应用价值。

常山柚橙不同树龄和繁殖方式的遗传变异分析

本研究以20~100年实生和嫁接的常山柚橙(Citrus×aurantium L.‘Changshanhuyou’)为材料,进行全基因组背景分析、体细胞变异检测和果实品质评价。结果显示,常山柚橙与药用枳壳基原品种黄皮酸橙(C.aurantium L.‘Huangpi’)、代代花(C.aurantium L.‘Daidai’)、朱栾(C.aurantium L.‘Chuluan’)和塘橙(C.aurantium L.‘Tangcheng’)聚类在一起,两者与酸橙(C.aurantium L.)的遗传相似度在76.99%~91.06%。随着常山柚橙树龄的增加,其果实品质发生变化,且体细胞变异总数增加。枳(Poncirus trifoliata(L.)Raf.)砧不会改变常山柚橙的果实品质,但其接穗中体细胞变异总数增加,其中变异基因涉及衰老修复和逆境防御过程。综上所述,常山柚橙是酸橙变种,且在常规生产年限内,其果实品质稳定,遗传物质保持不变,但体细胞变异数量逐渐积累。

胰腺透明细胞变异型实性-假乳头状肿瘤1例并文献复习

目的 探讨胰腺透明细胞变异型实性-假乳头状肿瘤(clear cell variant of solid pseudopapillary neoplasm, ccSPN)的临床病理学特征。方法 回顾性分析1例ccSPN的临床资料,采用免疫组化EnVision两步法检测CK、vimentin、CD10、β-catenin、CD56、Syn、CgA、E-cadherin、Ki-67的表达,分析蛋白表达与临床病理特征的关系,并复习相关文献。结果 患者女性,54岁,以腹部疼痛为首发症状,MRI示胰体尾部占位伴钙化。镜下见肿瘤界尚清,瘤细胞体积小,形态温和,呈巢状或小梁状排列,大部分胞质内含大小不等的空泡或胞质完全空泡化,细胞核圆形或卵圆形,核仁不明显,未见明确核分裂象。瘤组织被透明变的间质分隔,局部黏液样变。免疫表型:vimentin、CD10、β-catenin、CD56、Syn均阳性,CK、E-cadherin、CgA均阴性,Ki-67增殖指数约2%。结论 ccSPN是实性-假乳头状肿瘤的一种罕见变异型,行影像学检查,并尽早手术切除及长期随访是疾病诊治的关键。

长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1参与盆腔器官脱垂的机制

背景:作者所在课题组前期通过高通量测序结果发现长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1在盆腔器官脱垂患者子宫主韧带中表达明显降低,转化生长因子β1信号通路也是相关通路之一。目的:观察长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1对盆底韧带成纤维细胞的影响,探讨其在盆腔器官脱垂疾病发病机制中的可能作用。方法:提取大鼠盆底韧带组织标本,分离成纤维细胞,进行原代培养。慢病毒构建长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1干扰和过表达载体加入成纤维细胞中。通过免疫荧光、MTT、细胞划痕实验、流式细胞术来检测成纤维细胞的形态、增殖、迁移和凋亡情况;RT-PCR和Western-blot检测转化生长因子β1、smad2/3、c-Myc的mRNA及蛋白表达情况。结果与结论:①长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1过表达时可显著促进成纤维细胞的增殖,提高细胞的迁移能力,抑制成纤维细胞凋亡;长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1干扰时结果相反;②此外,长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1过表达时细胞中的c-Myc、转化生长因子β1、smad2/3的mRNA和蛋白相对表达量均明显增加,其干扰时则显著抑制c-Myc和转化生长因子β1的表达;③提示长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1能够影响成纤维细胞的形态和生物学功能,可能与转化生长因子β1/smad2/3/c-Myc通路有关;该研究可为盆腔器官脱垂患者的临床诊断和治疗提供新思路。

血清可溶性转铁蛋白受体、红细胞分布宽度-变异系数与维持性血液透析患者铁代谢的关系

目的研究血清可溶性转铁蛋白受体(soluble transferrin receptor,sTFR)、红细胞分布宽度-变异系数(red blood cell distribution width-coefficient of variation,RDW-CV)与维持性血液透析患者铁代谢的关系。方法选取2019年1月至2020年6月秦皇岛市第一医院收治的98例终末期肾病患者,其中48例患者为维持性血液透析患者(A组),48例为非透析终末期肾病患者(B组)。另外,选取同期在秦皇岛市第一医院进行健康体检的受试者48例作为对照组。入组后第二天,测定受试者sTFR水平、RDW-CV水平、肾功能参数水平、铁代谢参数水平。结果A组的sTFR水平为(49.78±17.43)nmol/L、RDW-CV水平为(16.21±2.43)%,均显著高于B组的(31.01±5.23)nmol/L、(14.87±4.88)%和对照组的(13.79±3.72)nmol/L、(12.89±3.92)%(P<0.05)。与B组相比,A组患者的超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、血清铁蛋白(ferritin,Fer)水平显著增加(P<0.05),白蛋白(albumin,Alb)、血清转铁蛋白(transferrin,TRF)、血清铁及转铁蛋白饱和度(transferrin saturation,TSAT)水平显著降低(P<0.05)。患者血清sTFR和RDW-CV水平均与血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿酸(uric acid,UA)、hs-CRP、甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、FER和TSAT水平呈正相关(P<0.05);与估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、红细胞计数(red blood cell,RBC)、Alb、Hb、TRF和血清铁(serum iron,SI)水平呈负相关(P<0.05)。多元逐步回归分析结果显示,维持性血液透析患者血清sTFR、RDW-CV水平与患者铁代谢参数FER和血清总铁结合力水平均有密切关系(P<0.05)。血清sTFR的曲线下面积(area under curve,AUC)和95%置信区间为0.874、0.823~0.909,血清RDW-CV的AUC和95%置信区间为0.888、0.812~0.899。血清sTFR的截断值为32.12 nmol/L,对维持性血液透析患者铁代谢预测的特异性为71.2%,敏感性为76.3%。血清RDW-CV的截断值为15.42%,对维持性血液透析患者铁代谢预测的特异性为68.0%,敏感性为76.4%。结论血清sTFR、RDW-CV水平与维持性血液透析患者的铁代谢水平呈负相关,可以在一定程度上反映患者的铁代谢水平。

透明细胞变异型黏液表皮样癌2例并临床病理特征分析

目的探讨涎腺透明细胞变异型黏液表皮样癌的临床病理特征。方法回顾性分析2例透明细胞变异型黏液表皮样癌,分析其临床和病理资料及免疫表型特点并文献复习。结果镜下肿瘤主要由透明细胞组成的团块状或小梁状癌巢构成,其内可见少量非透明细胞不规则分布于透明细胞巢周围,呈逐渐的过渡。免疫表型:CK5/6、P63、P40、S-100、SOX-10、Vimentin和CK7呈强阳性表达,DOG-1、Mammaglobin、SMA及GFAP呈阴性表达;特殊染色:AB阳性提示细胞有黏液分泌,Ki-67增殖指数3%~5%。结论透明细胞变异型黏液表皮样癌是黏液表皮样癌一种少见的变异型,其确诊需结合临床病史、组织病理学、免疫组化染色和特殊染色的综合分析,低级别者预后良好。

红细胞分布宽度、肌酸激酶与原发性高血压的相关性分析

探讨红细胞分布宽度、肌酸激酶与高血压的相关性。方法 选取我院内四病区高血压住院患者为观察组和同期体检健康者为观察组。检测所有研究对象的血常规和生化指标。所有数据经统计学软件分析。结果 两组研究对象的RDW-CV水平存在显著差异,P<0.05;RDW-CV、空腹血糖、总胆固醇、LDL-C、HDL-C、尿素氮水平与高血压的患病具有一定的相关性,P均<0.05。结论 红细胞分布宽度、肌酸激酶与原发性高血压存在一定相关性,可在高血压临床诊治中起到一定指导作用。

多年生黑麦草体细胞无性系变异分析

以多年生黑麦草成熟胚诱导获得的再生植株为材料,利用RAPD标记方法对其体细胞变异进行了研究。结果表明多年生黑麦草体细胞无性系在分子水平发生了多态性变异。

体细胞无性系变异培育高蛋白小麦种质

从一株小麦(Triticum aestivum L.)的单倍体花粉植株的幼穗外植体诱导出愈伤组织,经继代培养后分化138株再生植株,其中5株部分结实。所得42粒种子播种后得到34株R_2代植株,它们在株高、芒性、蜡质和成熟期等性状上出现变异。 R_3代一些株系分离,多数株系基本稳定。R_4代全部无性系基本稳定。 R_3代选出100多个稳定的无性系,取82个无性系的种子分析蛋白质含量,从中发现5个高蛋白无性系,含量介于19.16%和21.33%之间。 R_6代重复测定的结果与R,代的相近。各无性系的种子蛋白电泳组分和氨基酸含量也有差异。

连续回交对消除农杆菌介导转化引起水稻体细胞变异的影响

农杆菌介导的转化引起许多体细胞变异,影响了转基因植物的农艺性状。因此,转基因作物的培育需要大量的T0代再生植株。在本研究中,我们将转基因水稻株系与原始品种连续回交,然后评价其回交后代的表现,消除体细胞变异,恢复转基因亲本的农艺性状。回交的供体亲本是3个转基因水稻株系,分别带有来自于苏云金芽胞杆菌(Bt)的抗虫基因。与原始品种连续回交至BC3F1代,每代BCnF1单株再自交两代,同时对各个世代进行抗虫性选择。通过发芽试验获得转基因纯合的BCnF3株系,在室内抗性试验中,所有的BCnF3纯合株系都能杀死100%的幼虫。在田间试验中,这些株系的单株产量明显高于供体亲本,大部分农艺性状与原品种没有显著的差异。这些结果说明连续回交能够在很大程度上恢复转基因水稻株系的农艺性状,从而减少转基因育种过程中所需的工作量。

半夏缓慢生长法保存及体细胞变异的ISSR检测

以添加了不同浓度的甘露醇、PP333和ABA的培养基对半夏试管苗进行缓慢生长法保存,并对保存材料再生后代的体细胞变异进行检测。结果显示,甘露醇、PP333和ABA均能有效抑制试管苗生长,且存活率高;最佳浓度分别为甘露醇2%～4%,PP3332.0mg·L-1,ABA 2.0～4.0mg·L-1。保存在添加了2%～4%甘露醇或2.0mg·L-1 PP333培养基上的植株未检测到变异,而保存在添加了2.0～4.0mg·L-1 ABA培养基上的植株检测到1条新增标记和1条缺失标记,位点变异率为1.7%,个体变异率为30%。研究表明,ABA不宜用于半夏试管苗的缓慢生长法保存,但有助于新突变体的产生,在种质创新上具有特殊意义。

水稻抗白叶枯病菌毒素细胞无性变异系的初步筛选

应用湖北水稻白叶枯病强毒菌株“江陵６９１”活细菌、细菌培养滤液、病菌粘液多糖和菌体多糖。对水稻粳１０５、粳３０３７和科选１号的幼穗及花药所形成的愈伤组织进行共培养筛选。获得体细胞再生植株４４３株，花粉植株３１株，其中１７株为单倍体（ｎ＝１２）。同工酶谱显示，筛选出的粳１０５愈伤组织的过氧化物酶同工酶活性加强，带数增多。