冀北地区致犊牛腹泻奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性研究

为鉴定冀北地区养殖场中引起犊牛腹泻的病原菌,本实验于2021年~2023年采集冀北地区养殖场中患腹泻病奶肉犊牛的肛拭子、粪便及肝脏等病料样品247份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定和ureR基因的PCR扩增等方法进行细菌的分离鉴定,结果显示,从采集的247份患腹泻病的奶肉犊牛病料样品中分离并鉴定到102株奇异变形杆菌(PM)。将分离菌人工感染小鼠(0.20 m L/只,含菌量为108cfu/mL),检测PM对小鼠的致病性。结果显示其中72株PM引起小鼠发病与死亡,为致病性PM,小鼠的死亡率在40%~100%。采用PCR方法及K-B药敏纸片法分别检测分离菌的毒力基因、相关耐药基因及耐药性,采用SPSS19软件中的Fisher确切概率法分析PM耐药表型与相关耐药基因之间的相关性。结果显示,毒力基因fliL、zapA、pmf A、atfA、rsb A、ureC、atfC在72株致病性PM中的检出率在63.4%~100%,其他毒力基因的检出率在2.7%~8.1%;72株致病性PM对阿莫西林、氨苄西林、安普霉素等12种药物耐药的菌株占51.4%以上,对其他药物耐药的菌株占6.9%~33.3%,均呈多重耐药性(MDR),且至少耐3类药物;72株致病性PM的β-内酰胺类耐药基因blaOXA、blaCTX-M、blaTEM,磺胺类耐药基因Sul1、Sul2、Sul3,氨基糖苷类耐药基因adA、aac(6’)-Ib,四环素类耐药基因TetA、TetM的检出率在43.2%~98.6%,其他耐药基因检出率在4.2%~33.3%,其耐药表型与耐药基因型之间基本呈正相关(除多粘菌素类和大环内酯类药物外)。本研究为致奶肉犊牛腹泻的奇异变形杆菌病的防控提供了参考。

家兔奇异变形杆菌的分离鉴定及致病性分析

为探究河南省某规模化兔场暴发的以精神萎靡、腹泻为主要症状的疾病病原,本实验随机选取6只病死兔剖检并观察其各组织剖检病变后,通过四区划线法分离纯化并增菌培养后,分别于普通琼脂培养基、血琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基培养,并对分离菌进行疑似病原菌的PCR鉴定、球虫检测、生化鉴定、16S r RNA基因的PCR扩增、测序和序列分析,构建分离菌16S r RNA基因的进化树,进一步确定病原菌。剖检观察可见病死兔肾脏呈土黄色、肝脏肿大有出血点、胸腺出血、脾脏萎缩呈深褐色、肺脏发白且有散在出血点等。疑似病原菌的鉴定结果显示,大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、魏氏梭菌、沙门氏菌、波氏杆菌及球虫均呈阴性,且通过细菌的分离培养、16S r RNA基因的PCR扩增、测序并构建系统进化树,进一步确定引起该兔场发病的病原菌为奇异变形杆菌,并将其命名为HN001株。通过PCR检测该菌携带的毒力基因,并采集病死兔肝、肾、肠等病变组织制作病理切片,观察其病理变化。将HN001株以1011cfu/mL感染家兔,一周后剖杀,观察各组兔的剖检病变,并再次从兔的内脏分离并鉴定病原菌。毒力基因的PCR检测结果显示,HN001菌株中鞭毛基因FliL和菌毛结构亚单位基因Mrp A均为阳性,溶血素基因Hpm A、金属蛋白酶结构亚单位基因ZapA和“雾蔓”菌毛迁移能力的调控基因Rsb A均为阴性。组织病理学结果显示,病死兔肾、肝、胸腺、脾、肺脏和空肠组织均损伤严重,主要表现为炎性细胞浸润、散在分布部分红细胞等病理变化。家兔致病性试验结果显示,该病原菌感染兔后出现与自然感染兔类似的症状和脏器的剖检症状,但病变程度与自然感染兔相比较轻。且从病兔体内再次分离到与感染菌相同的菌株,表明奇异变形杆菌为该兔场暴发疾病的病原菌。本研究为兔奇异变形杆菌病的防控提供参考依据。

bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌的多重耐药特征

【目的】研究bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌的多重耐药特征,并分析菌株CY32全基因组序列结构。【方法】对5株bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌进行氟苯尼考和质粒介导氟喹诺酮类耐药基因检测、接合试验和bla_(CMY-2)基因的Southern杂交定位,对其中一株菌CY32进行全基因测序和生物信息学分析。【结果】5株奇异变形杆菌携带的bla_(CMY-2)位于染色体,其中,菌株CY12、CY32、S31和S52携带floR,菌株CY12和CY32携带qnrD。CY32的染色体同时含有SXT/R391型整合性接合元件(integrative and conjugative elements,ICEs)(ICEPmiJpn1)和PmGRI1共2种耐药基因岛。ICEs的可变区包含2个串联的复合型转座子(IS10构成),其中一个复合型转座子携带bla_(CMY-2);CY32的PmGRI1耐药岛含有12个耐药基因。与其他奇异变形杆菌携带的PmGRI1相比,多重耐药区差异最大的区域位于Tn21转座子。此外,CY32包含2个质粒,包括携带floR的IncQ质粒和携带qnrD的非接合质粒。奇异变形杆菌CY32携带15个耐药基因,呈现多重耐药的特性。【结论】奇异变形杆菌经基因岛和质粒获得多重耐药,使治疗奇异变形杆菌感染变得更加困难,应加强对动物源奇异变形杆菌耐药性监测。

20味中药体外抑制奇异变形杆菌的研究

为探讨诃子、薄荷、黄连等20味中药提取物对犊牛腹泻粪便样本中分离鉴定的奇异变形杆菌的抑制效果。用水煮法分别提取中药有效成分,通过微量二倍稀释法分别测定各中药提取物对奇异变形杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),用棋盘法、时间杀菌-曲线绘制法测定中药提取物对奇异变形杆菌的联合抑菌效果。结果显示,诃子、薄荷、黄连、艾叶、金银花、知母、五倍子的抑菌效果明显,MIC值为3.9~62.5 mg/mL,MBC值为3.9~125 mg/mL;其中诃子与薄荷联用,表现协同作用;诃子和黄连、金银花、艾叶、五倍子联用,均表现相加作用;诃子和知母联用,表现无关作用。结果提示,诃子与不同中药组合能起到不同抑菌效果,为临床奇异变形杆菌引发的疾病治疗用药提供了参考。

普通变形杆菌噬菌体裂解酶Lys66的表达纯化及活性分析

目的:对一株新型普通变形杆菌噬菌体中的裂解酶Lys66进行基因克隆、蛋白表达纯化及活性分析。方法:将噬菌体全基因序列在Genbank数据库中进行对比,挖掘出裂解酶基因序列,并对其进行克隆,进一步在大肠杆菌中表达蛋白并纯化,探究其抑菌效果。结果:通过比对挖掘出与裂解酶相似度较高的基因序列,大小为393 bp;利用ExPAsy Bioinformatics Resource Portal预测裂解酶的分子质量为15.20 kDa,等电点为9.40,由130个氨基酸组成,将优化的合成基因构建到载体pET-32α中,得到重组质粒pET-32α-lys66,并将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后诱导其表达,经纯化验证后,获得1.86 mg/mL的重组裂解酶Lys66蛋白。裂解酶Lys66在平板上的抑菌圈直径为19.30 mm;对15株受试菌株中的13株经氯仿处理的革兰氏阴性菌均表现出裂解活性,宿主谱较广。Lys66(1.89 mg/mL)与乙二胺四乙酸(1 mmol/L)联用,2 h后OD_(600 nm)下降0.61,抑菌效果较好。结论:本研究重组表达的裂解酶Lys66具有良好的抑菌效果,可作为一种潜在的抗菌剂。

抑制变形杆菌的干酪乳杆菌LDJ主要抑菌物质分析

干酪乳杆菌LDJ是一株能抑制变形杆菌生长的优良菌株。为了探究干酪乳杆菌LDJ无细胞上清液的抑菌效果,采用牛津杯法测定了不同培养时间的无细胞上清液对变形杆菌的抑菌能力,发酵时间在0~4 h时无细胞上清液无抑菌能力,发酵至8 h时抑菌能力逐步上升,发酵时间在24~48 h时无细胞上清液抑菌能力趋于平稳;其中,发酵时间在36 h时,抑菌圈直径最大,为20.48 mm。干酪乳杆菌LDJ无细胞上清液中抑菌物质的理化特性研究结果表明:该抑菌物质对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和李斯特菌都有不同程度的抑制作用;无细胞上清液经40~100℃处理30 min,仍有良好的抑菌活性;pH值在3~6范围内抑菌物质有良好的抑菌效果,在中性及碱性条件下则没有抑菌作用;不同酶处理对无细胞上清液的抑菌效果有不同程度的影响。因此,推测其抑菌有效成分可能为肽类及有机酸。

硒化甘草多糖联合抗生素对奇异变形杆菌体内外抑菌效果以及抑菌机制研究

试验旨在探究硒化甘草多糖(SeGUP)和甘草多糖(GUP)联合抗生素对奇异变形杆菌(PM)的体内外抑菌效果以及抑菌机制。体内外抑菌效果通过药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)、生长曲线、体外协同作用以及SeGUP、GUP对PM感染小鼠的死亡率进行分析。抑菌机制通过PM细胞壁、细胞膜、生物膜、抗氧化酶活性的变化进行分析。结果显示,同浓度SeGUP比GUP抑菌圈大,MIC值小,对PM生长抑制更强;SeGUP与环丙沙星(CI)联合表现为协同,GUP与CI表现为相加;SeGUP能够极显著降低PM感染小鼠死亡率(P<0.01)。与对照组相比,SeGUP、GUP、CI可极显著升高培养液中碱性磷酸酶(AKP)、β-半乳糖苷酶(β-gal)的活性和蛋白含量(P<0.01),极显著降低菌体DNA含量,抑制生物膜形成,降低过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01)。结果表明,SeGUP体内外抑菌效果以及抑菌机制能力均优于GUP。

172株奇异变形杆菌和68株普通变形杆菌临床分布及其耐药性

目的对某院临床分离的奇异变形杆菌和普通变形杆菌进行分析,检测常用抗菌药物对其的体外活性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对该院2011年1月1日—2013年6月30日临床分离的172株奇异变形杆菌和68株普通变形杆菌进行分析,采用纸片扩散法进行药敏试验;WHONET5.4软件进行数据分析。结果奇异变形杆菌标本主要来源为创面分泌物(26.74%)、痰液(22.68%)和尿液(18.61%);普通变形杆菌主要来源为创面分泌物(48.53%)、尿液(17.65%)和痰液(11.77%)。奇异变形杆菌对氨苄西林、复方磺胺甲口恶唑耐药率均>45.00%;普通变形杆菌对头孢唑林、复方磺胺甲口恶唑耐药率高,分别为86.76%、41.18%;奇异变形杆菌和普通变形杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、碳青霉烯类(厄他培南、美罗培南)、阿米卡星的耐药率均<20.00%。结论奇异变形杆菌和普通变形杆菌对于哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、厄他培南、美罗培南、阿米卡星敏感率高,上述抗菌药物可作为临床治疗相关感染的经验用药。

熟肉制品中奇异变形杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

熟肉制品的特点是可直接食用,而其在食用前又很容易受到致病性微生物污染,所以保证其食用安全性尤其重要。为了解熟肉制品中微生物携带情况,对从沈阳市某熟食店购买的猪头肉和鸡肝中分离到的2株微生物进行了培养鉴定,从形态特征、培养特性、生化试验、16S rRNA基因序列的角度进行分析,并对药物敏感性进行了调查。结果显示,2株分离菌均为短杆状革兰氏阴性菌;均发酵葡萄糖、产生硫化氢,甲基红试验和三糖铁试验阳性;与GenBank中公布的奇异变形杆菌的同源性均在98%以上,综合分析后确定分离的2株菌均为奇异变形杆菌(分别命名为SZ2101菌株和SJ2124菌株);药敏试验结果显示,2株分离菌对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类以及大环内酯类的阿奇霉素等药物不同程度敏感;对磺胺类及大环内酯类的红霉素不敏感。结果表明,从熟肉制品中分离的2株菌均为奇异变形杆菌,研究结果为肉品污染防控和食品安全防护提供了重要的参考资料。

云南猪源致病性普通变形杆菌的分离与鉴定

普通变形杆菌（P.vulgaris）隶属于细菌域、变形菌门、γ-变形菌纲、肠杆菌目、肠杆菌科、变形杆菌属（Proteus）成员之一,其余3个成员分别是奇异变形杆菌（P.mirabilis）、产黏变形杆菌（P.myxofaciens）和潘尼变形杆菌（P.penneri）,普通变形杆菌是变形杆菌属的代表菌种〔1〕。普通变形杆菌属于革兰氏阴性杆菌,

可形成生物膜的猪源奇异变形杆菌分离鉴定及致病性研究

为确诊某猪场猪发病死亡原因,采集死亡猪病变组织,用常规方法分离鉴定细菌并进行致病性和耐药性检测。结果显示:从病死猪肺脏分离到1株奇异变形杆菌GX-PM1,与GenBank收录的奇异变形杆菌AYQ-1株同源性高达99.9%;小鼠致病性试验鉴定为强毒株:药敏实验检测结果显示,该菌株对阿米卡星、头孢氨苄为极敏,对青霉素G、头孢拉定、左氟沙星等为高敏,对阿莫西林、恩诺沙星等药物效果为中敏,对四环素、红霉素、复方新诺明、磺胺异恶唑等8种药物完全耐药;对耐药基因进行PCR扩增发现在该菌株中存在四环素类、氯霉素类、磺胺类耐药基因;GX-PM1株毒力基因型为ureC(-)、atfA(+)、pmfA (+)、zapA (+)、mrpA (-)、atfC (+)、ucaA (+)、rsbA (-);生物膜实验研究表明,分离株具有生物被膜形成能力,且为强黏附型(+++)。本研究表明此疫情由奇异变形杆菌引起,可用头孢类和氨基糖苷类药物进行治疗。

仔貉腹泻性奇异变形杆菌分离鉴定、致病性及耐药性检测

为明确引起仔貉腹泻的病原菌并分析其特征,本研究于2017年-2020年采集秦皇岛、唐山、石家庄、沧州地区患腹泻病仔貉的肛拭子、粪便以及死亡的仔貉肝脏病料组织283份,采用常规细菌分离鉴定和PCR方法对采集的病料组织进行奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,PM)分离鉴定,采用人工感染小鼠试验、PCR方法和K-B药敏纸片法分别检测奇异变形杆菌致病性、毒力基因、耐药性及耐药基因。结果显示,分离得到109株P.mirabilis,其中78株P.mirabilis对小鼠具有不同致病性,其死亡率在40%~100%之间,毒力基因ureC、zapA、mrpA、ucaA、rsbA、pmfA、atfA检出率在79.5%~100%之间,其它毒力基因的检出率在43.6%~47.4%之间;78株致病性P.mirabilis对阿莫西林、氨苄西林、新霉素等9种药物耐药率在41.0%以上,对其它药物的耐药率在5.1%~30.8%之间,以耐10、11、12种药物的分离菌株为主,耐药基因Sul1、Sul2、adA、aac(6')-Ib、TetA、TetM检出率在48.7%~79.50%之间,其它耐药基因检出率在2.6%~16.7%之间,耐药表型与耐药基因型之间具有一定的相关性。本研究首次报道致仔貉腹泻的奇异变形杆菌的致病性、毒力基因、耐药性及耐药基因等生物特性,为今后仔貉腹泻性奇异变形杆菌的致病机制研究、流行病学调查及防控研究提供科学依据。

1株新的变形杆菌噬菌体的分离、鉴定与生物学特性分析

目的:对1株新的变形杆菌(Proteus)噬菌体进行分离、鉴定与生物学特性及基因组分析。方法:将实验室从牦牛屠宰环节中分离到的菌株纯培养后,对其DNA提取进行16S rRNA测序,鉴定获得宿主菌,采集四川成都牦牛屠宰场环境污水,以获得的宿主菌进行噬菌体分离;运用双层琼脂平板法进行噬菌体的分离纯化,测定噬菌体的最佳感染复数、一步生长曲线和噬菌体耐受性等;通过磷酸负染、透射电镜观察噬菌体的形态;采用试剂盒提取噬菌体全基因组DNA,使用Illumina MiSeq测序平台进行噬菌体全基因组测序,对噬菌体全基因组序列进行组装、注释和基因组学分析。结果:从67株分离菌株中鉴定出10株Proteus,并从污水中分离得到1株可裂解变形杆菌和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)并且裂解性较强的噬菌体,命名为Proteus phage PV66;其最佳感染复数为0.1,一步生长曲线结果显示,感染宿主菌的潜伏期约为10 min,裂解期约为80 min,平均裂解量为321 PFU/cell;耐受pH值范围为3~12,耐受温度为65℃。电镜观察该噬菌体为C3形态噬菌体,其头部长(140±1)nm、宽(54±2)nm,尾部长为(36±1)nm。基因组测序结果表明PV66全序列长度为90 492 bp,系统发育树分析发现该噬菌体与奇异变形杆菌(P. mirabilis)噬菌体和克诺罗杆菌(Cronobacter)噬菌体同源性较高,与non-Kuravirus属处于同一分支。结论:本研究分离到1株新的变形杆菌噬菌体并具有良好的应用潜力,为进一步开发噬菌体类新型抗菌剂提供基础,同时也丰富了变形杆菌噬菌体的数据库。

鸡源奇异变形杆菌的分离鉴定及生物学特性分析

为确定引起新疆阿克苏地区某鸡场雏鸡死亡原因。本试验对采集自该鸡场病死鸡病料进行病原的分离鉴定,并进行动物回归试验和药物敏感性试验。结果显示,分离菌为奇异变形杆菌,革兰氏阴性菌,能分解木糖、葡萄糖、尿素等。动物回归试验雏鸡死亡,表明该菌有较强的致病性。药敏试验结果显示,分离菌对复方磺胺甲噁唑表现为中介、对庆大霉素和丁胺卡那表现为敏感,对其他5种抗生素表现为耐药。试验结果为治疗和防控奇异变形杆菌感染提供了用药依据,为奇异变形杆菌感染的进一步研究奠定了基础。

新疆某养殖场腹泻仔猪奇异变形杆菌的分离鉴定、药物敏感性试验及毒力基因检测

[目的]鉴定新疆某养殖场腹泻仔猪粪便中分离到的病原菌,了解其生物学特性。[方法]通过细菌学培养和PCR法对该场4份仔猪腹泻样本进行细菌分离鉴定,对分离菌株进行药物敏感性试验和毒力基因检测。[结果]经细菌学培养,有3株细菌在木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基上呈淡黄色菌落,菌落四周平滑、有光泽、中心呈黑色;革兰染色后呈两端钝圆短杆状革兰阴性菌;3株分离菌的SSU rDNA序列与我国广东省狞猫源奇异变形杆菌分离株SSU rDNA序列的同源性均为100%;结合形态学观察和序列分析,鉴定3株细菌为奇异变形杆菌。3株奇异变形杆菌分离株对12种抗菌药物中的诺氟沙星、麦迪霉素、红霉素等11种药物耐药,分离株2和分离株3对头孢西丁敏感,分离株1对头孢西丁的敏感性呈中介;3株菌均携带ureC、pmfA、zapA、mrpA、atfA、atfC和ucaA 7种毒力基因。[结论]分离到的3株猪源奇异变形杆菌具有多重耐药性,携带多种毒力基因,提示该菌是引起仔猪腹泻的病原之一,应注意抗菌药物的合理使用。

变形杆菌抗生素耐药性分析

变形杆菌属肠道的正常菌群,广泛存在于泥土、水和被粪污染的物质中,并在一定条件下引起各种感染,是引起医源感染的重要条件致病菌。奇异变形杆菌和普通变形杆菌可引起人的原发性和继发性感染,是泌尿道感染的主要病原菌之一,仅次于大肠埃希菌,可由此产生菌血症,还常引起伤口、呼吸道等多种感染。

一株野生马来穿山甲源奇异变形杆菌的分离鉴定及生物学特性分析

为查明野生动物保护协会送检的1只野生马来穿山甲(Manis javanica)的死亡原因,对其进行剖检,从肺脏组织中分离得到1株病原菌。对分离菌株进行革兰氏染色、生化试验、16S r RNA同源性分析、药敏试验、耐药基因检测、毒力基因检测和小鼠致病性试验等研究。结果显示:分离菌株在麦康凯、SS、血琼脂和LB培养基上均能生长;革兰氏染色镜检为阴性短杆菌;生化鉴定和16S r RNA同源性分析鉴定该菌株为奇异变形杆菌(Proteus mirabilis),命名为YN2018株;生长曲线表明该菌株在2 h后进入对数生长期,16 h后进入稳定期;该菌株对头孢他啶、头孢噻肟和大观霉素较敏感,对庆大霉素、阿米卡星、阿莫西林、妥布霉素和链霉素中度敏感,对罗红霉素、多西环素和复方新诺明等14种抗菌药物耐药;该菌株含有aadA1、aadB、sul1、sul2和dfrA1耐药基因,并携带有mrpA、rsbA、ureC、zapA、rsmA、hpmA、fliL、ucaA、pmfA和atf A毒力基因;小鼠接种菌株浓度为8.50×10^(8)、1.70×10^(9)、3.40×10^(9)、6.80×10^(9)、1.36×10^(10)cfu/m L的死亡率分别为0、50%、75%、100%、100%;死亡小鼠肝脏和肺脏组织病理切片显示发生局灶性细胞坏死及炎性细胞浸润。分离得到的奇异变形杆菌具有多重耐药和强致病性,可能是导致野生马来穿山甲死亡的原因。

大熊猫源奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速鉴别检测大熊猫3种病原菌的多重PCR方法,本研究根据NCBI登录的奇异变形杆菌(PM)ureR基因、肺炎克雷伯菌(KPN)phoE基因、大肠杆菌(E.coli)phoA基因,设计3对引物,并对各反应条件优化,初步建立检测大熊猫源PM、KPN和E.coli的多重PCR方法。特异性结果显示,本研究建立的多重PCR方法对PM、KPN和E.coli能够分别扩增到308 bp、456 bp和666 bp的目的条带,而对大熊猫常见的其它20种病原菌均无扩增;敏感性试验结果显示,该方法对PM、KPN和E.coli DNA的检测限分别为2.8×10^(7)拷贝/μL(ureR)、3×10^(7)拷贝/μL(phoE)、6×10^(7)拷贝/μL(phoA)。利用本研究建立的多重PCR方法对100份大熊猫临床样品检测,结果显示:PM、KPN和E.coli的检出率分别为30%(30/100)、90%(90/100)和100%(100/100),均与研究报道的单一PCR检出率相同,对PM和KPN的检出率均高于传统病原分离方法(25%、83%)。本研究建立的大熊猫源PM、KPN、E.coli多重PCR检测方法特异性较强、敏感性较高,且可以同时检测3种病原,为大熊猫细菌性疾病的诊断提供了新的检测手段,极大缩短了检测时间,对临床防控相应细菌性疾病具有重要意义。

急性腹泻患者奇异变形杆菌分离鉴定及其生物学特性

目的:对某市医院腹泻门诊收集的一起急性腹泻患者肛拭子样本进行奇异变形杆菌分离鉴定、耐药性与致病作用分析。方法:增菌培养、划线分离,革兰氏染色,镜检观察细菌形态,16S rRNA基因扩增、测序鉴定细菌种类;纸片法进行药物敏感性检测,PCR法筛检毒力基因,结晶紫染色法检测细菌生物被膜形成,小鼠感染试验分析分离株致病力;荧光PCR法分析奇异变形杆菌感染小鼠致不同脏器炎症因子表达水平。结果:成功从腹泻样本中分离获得3株细菌(NB1711、NB1335和NB1336),经菌种鉴定均为奇异变形杆菌。3株细菌对米诺环素、红霉素、多粘菌素等9种药物表现为多重耐药,对头孢唑林、哌拉西林、环丙沙星等敏感。NB1711分离株完整编码8种毒力因子,生物被膜形成能力强,对小鼠致病最高,感染该菌株可显著上调小鼠不同脏器IL-1β、IL-6、TNFα、IFN-γ等炎症因子的表达。结论:奇异变形杆菌感染是引发此次急性腹泻的主要病因,细菌分离株NB1711耐药谱广、毒力强、可形成致密生物被膜,感染小鼠介导形成炎症反应。本研究为进一步探究奇异变形杆菌感染机制及临床用药提供科学依据。

变形杆菌属中抗菌药物亚胺培南稀释法和纸片法的对比研究

目的提高亚胺培南对变形杆菌属药敏报告的正确性。方法选取2021年5月—2023年8月广东省英德市人民医院临床标本分离出的208株变形杆菌属,对同一标本来源分离出的变形杆菌属同时进行抗菌药物亚胺培南仪器稀释法药物敏感试验和手工K-B纸片扩散法药物敏感试验,进一步作结果对比分析。结果仪器稀释法与手工K-B纸片扩散法试验结果呈耐药判读的相符率是52.63%,呈中介判读的相符率是64.71%,呈敏感判读的相符率是94.12%,从变形杆菌属中细分出来的奇异变形杆菌,普通变形杆菌及豪泽变形杆菌在研究试验中得出的相符率与总相符率保持一致,其耐药判读结果相符率为52.94%和50.00%,中介判读结果相符率为65.19%和61.11%,敏感判读结果相符率为92.86%和100.00%,试验数据可见相关统计表格。结论仪器稀释法检测抗菌药物亚胺培南药敏时,由于方法学的局限性,当其结果呈现耐药或中介时存在判读过高,可使用手工K-B纸片扩散法对药敏结果予以纠正,提高结果报告的准确性。