EXODUS系统联合变构DNA纳米开关在帕金森病患者血浆外泌体miR-107检测中的应用

探索帕金森病患者血浆外泌体miR-107快速检测方法。采用病例对照设计,收集华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科2023年12月至2024年1月帕金森病患者组和健康对照组血浆标本各10例。EXODUS系统分离血浆外泌体,纳米颗粒跟踪分析技术和透射电镜鉴定外泌体粒径和形态,Qiagen miRNeasy Micro Kit提取外泌体RNA,变构DNA纳米开关miRacles检测miR-107,琼脂糖凝胶电泳分析miR-107含量。采用Thermo Fisher RevertAid RT Reverse Transcription Kit对外泌体RNA进行逆转录,实时定量PCR检测miR-107。组间比较采用独立样本t检验。EXODUS系统1.5 h完成500μl血浆外泌体的分离,外泌体浓度健康对照组为(4.82±2.02)×10^(10)个/ml,帕金森病患者组为(5.08±2.34)×10^(10)个/ml,两组间差异无统计学意义(t=-0.168,P=0.872),透射电镜证实外泌体形态。变构DNA纳米开关miRacles能检测fM级miR-107,可有效区分miR-107及其家族成员miR-15a和miR-16。琼脂糖凝胶电泳显示,灰度值相对含量健康对照组为(1.00±0.26),帕金森病患者组为(1.86±0.21),帕金森病患者组miR-107显著高于健康对照(t=-8.143,P<0.001),与逆转录实时定量PCR结果类似。EXODUS系统联合变构DNA纳米开关miRacles能实现帕金森病患者血浆外泌体miR-107快速、非酶促、廉价的检测。