夹江县叠鞘石斛产业发展现状、存在问题及对策

为促进四川省乐山市夹江县叠鞘石斛产业可持续发展,通过查阅文献资料和实地调研,分析当地叠鞘石斛产业发展现状及存在的问题,并提出建立标准化叠鞘石斛生产体系、提升叠鞘石斛产业的创新力、拓展销售渠道、打造品牌效应及政府加大扶持力度等促进叠鞘石斛产业可持续发展的对策。

叠鞘石斛中联苄类成分的定性定量分析

目的建立叠鞘石斛中联苄类成分的定性、定量分析方法。方法运用薄层色谱法对叠鞘石斛中联苄类成分石斛酚（gigant01）和杓唇石斛素（moscatilin）进行定性分析，采用高效液相色谱法测定石斛酚的含量，以Shim—packCLC—ODS柱为固定相，流动相乙腈-0．2％甲酸（35-65），检测波长280nm，柱温25℃。结果石斛酚在0．196～12．54μg内峰面积与进样量呈良好的线性，r=0．9999；平均回收率100．6％；RSD3．0l％。结论通过10批不同来源的叠鞘石斛的鉴别和含量测定，证明方法灵敏，准确可靠，重复性好。在不同采收期的叠鞘石斛中，石斛酚的含量在春季4，5月份和秋季10，11月份相对高于其他月份。

叠鞘石斛茎叶花HPLC-DAD-ELSD对比研究

目的对叠鞘石斛不同部位进行指纹图谱对比研究。方法采用Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.5%冰醋酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1 ml/min;DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果首次建立了叠鞘石斛茎、叶、花HPLC-DAD-ELSD指纹图谱鉴别方法,叶、花均具有与茎相同的化学成分,且叶与花中所含化学成分较茎更为丰富。结论建立的方法稳定、可靠、重现性好,可直接了解叠鞘石斛茎、叶、花化学成分变化的关系。

叠鞘石斛中联苄类化合物的体外抗氧化活性研究

将叠鞘石斛药材粉末经70%乙醇提取后,经HPD-300型大孔树脂纯化,得联苄类化合物。采用ORAC法、1,1-苯基苦基苯肼(DPPH)法、邻苯三酚自氧化法、fenton反应测定叠鞘石斛中联苄类化合物清除AAPH自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的能力。结果表明叠鞘石斛中联苄类化合物和V C清除AAPH自由基能力的ORAC值分别是0.33、0.21mg/L;叠鞘石斛中联苄类化合物和V C清除DPPH自由基的EC50分别是62.89、3.44mg/L;清除超氧阴离子自由基的EC50分别是408.10、14.04mg/L;抑制羟自由基的EC50分别是7.86、1.89mg/mL。与V C相比,叠鞘石斛中联苄类化合物具有较强的清除AAPH自由基的能力,能清除DPPH和超氧阴离子自由基,抑制羟自由基;其对自由基的清除能力在各用药浓度范围内呈一定量效关系。

叠鞘石斛化学成分研究

目的研究叠鞘石斛化学成分。方法叠鞘石斛乙酸乙酯部位采用硅胶柱层析、重结晶等方法分离纯化,并通过理化性质和波谱技术鉴定化合物结构。结果从叠鞘石斛中分离得到10个化合物,分别鉴定为松柏醛(1)、香兰素(2)、香草酸(3)、丁香醛(4)、丁香酸(5)、5-乙酰氧甲基糠醛(6)、5-羟甲基糠醛(7)、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(8)、草木樨苷甲酯(9)、4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲(10)。结论所有化合物均为首次从叠鞘石斛中分离得到。

叠鞘石斛多糖抗氧化作用研究

为观察不同浓度叠鞘石斛多糖提取液的抗氧化活性,采用超声提取法提取叠鞘石斛中的多糖;采用分光光度法测定叠鞘石斛多糖对DPPH自由基、羟基自由的清除率以及对Fe2+螯合率的影响,再观察其对脂质过氧化的抑制作用。结果表明,叠鞘石斛多糖对DPPH自由基、羟基自由基具有较好的清除率,对Fe2+也具有很好的螯合率,对脂质过氧化有明显的抑制作用。叠鞘石斛多糖具有较强的抗氧化能力。

叠鞘石斛化学成分及功效研究进展

石斛为兰科（Orchidaeae）石斛属（Dendrobium）多种植物的新鲜或干燥茎的统称,是常用名贵中药材,始载于《神农本草经》。它以＂千金草＂＂还魂草＂之誉驰名中外,为中华九大仙草之首。该植物是＂石斛夜光丸＂等10种中成药的主要原料,也可作为抗疲劳、美容养生以及增强免疫力等的保健品。

叠鞘石斛茎段组织培养与花芽诱导

目的研究叠鞘石斛的快速繁殖及离体开花的培养体系。方法选用野生的叠鞘石斛带侧芽的茎段作为外植体,培养在附加不同激素的培养基上。结果MS培养基附加6-BA(1.0 mg.L-1),NAA(0.5 mg.L-1)对侧芽的诱导效果最佳。而MS培养基附加6-BA(2.0 mg.L-1),NAA(0.4 mg.L-1)最适合丛生芽的增殖。把无菌苗培养在附加6-BA(2.0 mg.L-1)的MS培养基中,少数植株被诱导开花,诱导率为10.0%。结论用带腋芽的茎段作为外植体在MS培养基中,附加一定的6-BA和NAA可以诱导丛生芽的产生。

叠鞘石斛与石斛药典收载品种脂溶性成分GC-MS对比研究

目的运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法研究叠鞘石斛与石斛药典收载品种的脂溶性成分,为叠鞘石斛的开发利用提供参考。方法采用有机溶剂法提取脂溶性成分,运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果初步鉴定出95种化合物,其中分别从叠鞘石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛中分析鉴定出33、55、37、36种化合物,四者脂溶性成分在组成和相对含量上均有一定差异。结论首次采用GC-MS联用技术对叠鞘石斛与药典收载品种金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛进行对比研究,为叠鞘石斛的进一步开发利用提供了一定的理论基础。

紫外可见分光光度法测定叠鞘石斛中联苄类化合物的含量

目的：建立叠鞘石斛中联苄类化合物的含量测定方法。方法：以石斛酚为对照品，未加显色剂条件下，建立紫外可见分光光度法测定叠鞘石斛中联苄类化合物的含量。结果：确定最佳吸收波长280nm，石斛酚在浓度4．88-58．56μLg／mL范围内呈良好线性关系（r=0．9998），平均加样回收率为97．39％，RSD=2．97％。结论：该方法准确、简单、快捷，重现性好，适用于叠鞘石斛中联苄类化合物含量的测定。

川产道地药材叠鞘石斛茎叶花脂溶性成分气相色谱-质谱联用分析

目的研究叠鞘石斛茎、叶和花脂溶性成分,为叠鞘石斛的综合开发利用提供科学依据。方法运用GC-MS法对叠鞘石斛不同药用部位脂溶性成分进行分离测定,结合质谱库检索系统对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果叠鞘石斛茎中鉴定出33个化学成分,占总含量的75.84%;叶中鉴定出41种化学成分,占总含量的61.56%;花中鉴定出53种化学成分,占总含量的81.90%。结论首次对川产道地药材叠鞘石斛不同部位脂溶性成分进行定性定量研究,共鉴定出93种成分。不同药用部位脂溶性成分有较大差异,主要成分均为脂肪酸类、酯和烃类。

叠鞘石斛不同炮制方法的比较研究

目的:建立一个简便快捷的叠鞘石斛产地加工方法。方法:以多糖、香豆素、水溶性浸出物、醇溶性浸出物含量为评价指标,对叠鞘石斛的切片阴干法、切片烘干法、燀蒸法、传统产地加工法及清水浸泡法、NaOH浸泡法进行比较研究。结果:综合评分结果由高到低为:切片烘干法>燀蒸法>NaOH浸泡法>清水浸泡法>传统产地加工法>切片阴干法。结论:切片烘干法和燀蒸法可应用在叠鞘石斛的产地加工中。

叠鞘石斛与药典品种石斛酚含量对比研究

目的:建立叠鞘石斛与药典收载品种金钗石斛,鼓槌石斛中石斛酚的高效液相色谱含量测定方法.方法:Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.5％冰醋酸(35:65)为流动相,检测波长280 nm,流速1 mg· mL-1,柱温30℃.结果:石斛酚在0.01228～0.2456 mg·mL-1 (r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为100.39％,RSD为2.17％.结论:本方法操作简单、快捷、重现性好、准确率高,可用于上述三种石斛中石斛酚的含量测定.

中心复合设计——效应面法优化叠鞘石斛石斛酚提取工艺

目的:采用中心复合设计—效应面法优化叠鞘石斛中石斛酚的提取工艺。方法:以甲醇体积分数、料液比和超声提取时间为自变量,以石斛酚提取率为因变量,通过对因变量进行多元线性回归拟合,采用效应面法优化最佳提取工艺。结果:确定石斛酚提取工艺为甲醇体积分数50%～61%,料液比1∶19～1∶22,超声提取时间16～21min,工艺验证预测值与实测值的偏差为-1.82%。结论:该方法可用于优化叠鞘石斛石斛酚提取工艺。

川产叠鞘石斛与石斛药典收载品种指纹图谱对比研究

目的:对叠鞘石斛与石斛药典收载品种金钗、鼓槌和流苏石斛HPLC-DAD-ELSD指纹图谱进行对比研究。方法:采用Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.5%冰醋酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1 mL/min;DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果:首次建立了石斛的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱鉴别方法,并对9个指纹峰进行了标定。首次对叠鞘石斛和石斛药典收载品种金钗、鼓槌、流苏石斛指纹图谱进行对比研究。结论:建立的方法稳定、可靠、重现性好,可直接了解石斛品种与化学成分变化的关系。叠鞘石斛与石斛药典收载品种有一定相似性,但相似度较低。

川产叠鞘石斛挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:采用GC-MS联用法对叠鞘石斛挥发油化学成分进行研究,为叠鞘石斛的综合利用提供参考。方法:采用有机溶剂-水蒸气蒸馏法提取挥发油,并运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:叠鞘石斛挥发油中分离出115种成分,鉴定出70种化学成分。结论:首次对叠鞘石斛挥发油化学成分进行定性定量研究,主要为烷烃类、醛类和醇类。

叠鞘石斛多糖含量测定两种方法的比较

目的:通过叠鞘石斛多糖的含量研究,比较改良苯酚硫酸法和传统苯酚硫酸法测定多糖的差异。方法:分别进行两种方法的准确度、重复性、精密度、稳定性等试验及测定6批次叠鞘石斛多糖含量。结果:改良苯酚硫酸法测定叠鞘石斛中多糖含量优于传统苯酚硫酸法。结论:改良苯酚硫酸法操作简便、稳定可靠,可用于叠鞘石斛多糖含量的检测。

GC-MS/MS测定叠鞘石斛中乐果等三种农药残留的一测多评研究

以叠鞘石斛(Dendrobium aurantiacum)为研究对象,样品采用乙腈提取,经Cleanert TPH专用净化柱净化。用GC-MS/MS测定样品,根据色谱相对保留时间和质荷比信息对样品进行定性分析,以乐果二级离子扫描峰(125.0/79.0)面积为参照峰,建立以乐果为对照品,测定叠鞘石斛中乐果等三种农药残留量的GC-MS/MS方法。结果表明,乐果、敌敌畏、毒死蜱进样量在0.1~1.0 ng与它们的色谱峰面积有较好的线性关系,最低检出限(以进样量计)分别为1.399×10^(-2)、2.279×10^(-4)、1.757×10^(-4) ng;平均回收率分别为95.4%、95.0%、94.7%。该一测多评方法简单快速,定量准确,适用于叠鞘石斛中乐果、敌敌畏、毒死蜱农药残留的同时测定。

光质对叠鞘石斛形态及生理指标的影响

以兰科植物叠鞘石斛为实验材料,通过研究光质对其形态及生理指标的影响,寻找提高叠鞘石斛观赏价值和经济价值的新方法。采用红蓝光搭配光质,处理组分别为T1组(红光:蓝光=3∶1)、T2组(红光:蓝光=1∶1)、T3组(红光:蓝光=1∶3),对照CK组为白光。每天照射2 h,照射7、14、21、28 d时分别取样检测。结果表明:(1)T1光质(红光:蓝光=3∶1)照射7 d时可有效增加叠鞘石斛茎长,照射21 d时可促进茎粗增加;(2)T2光质(红光:蓝光=1∶1)照射7 d时可促进茎长的增加;(3)T3光质(红光:蓝光=1∶3)照射可有效延长叠鞘石斛的花期,照射7 d时会有效增大叶绿素a、b含量,在21 d时会有效增大可溶性蛋白质的含量。采用红蓝光质按照不同配比照射,可有效调控叠鞘石斛的花期和生长,增加其观赏价值。

UV法测定叠鞘石斛中总酚含量方法研究

目的:建立叠鞘石斛中总酚的含量测定方法,并对叠鞘石斛中的总酚含量进行测定。方法:考察磷钼酸显色法、普鲁士蓝显色法和福林酚法3种显色方法对叠鞘石斛中总酚定量分析的适用性,通过L_9(3~4)正交实验选择最佳的显色条件。结果:福林酚法适用于叠鞘石斛中总酚含量的测定;显色条件:检测波长760nm,福林酚试剂用量为1 mL,10%Na_2CO_3溶液用量为5 mL,反应时间为1 h,反应温度为30℃,线性范围为4~12μg·mL^(-1),平均加样回收率为98.14%,RSD为1.64%;总酚平均含量为6.75~7.85 mg/g。结论:该方法可用于叠鞘石斛中总酚含量的测定,且简单易行,稳定可靠,重现性好。