rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的 探讨rhGM CSF促进口腔溃疡愈合的作用机制。方法 取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞 ,用rhGM CSF刺激成纤维细胞后第 2、4、6天用细胞计数及3 H 胸腺嘧啶掺入法 (3 H TdR)测定其增殖情况。结果 rhGM CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用 ,在 80～ 10 0ng/ml时 ,细胞生长达到最佳状态 ,过高浓度rhGM CSF的刺激作用反而下降。结论 rhGM

口腔癌相关成纤维细胞对舌癌细胞株增殖活性的影响

目的本研究拟通过体外实验观察口腔癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)对舌癌细胞增殖能力的影响。方法建立口腔CAFs与舌癌细胞株Tca8113的交互作用模型,对Tca8113进行形态学观察,并通过MTT法及流式细胞术,观测口腔CAFs对Tca8113增殖活性及细胞周期的影响。结果CAFs和Tca8113直接混合培养组的Tca8113细胞形态及生长方式发生变化;与正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)相比,CAFs增强了Tca8113的增殖活性(P<0.05),并提高了处于S期和G2期的癌细胞的比例(48.1%vs40.0%)。结论口腔CAFs可在体外促进舌癌细胞株Tca8113的增殖,提示其在口腔鳞癌发展中起重要作用。

槟榔提取物体外诱导人口腔黏膜成纤维细胞增殖模型的建立

目的为研究口腔黏膜下纤维化的修复机制,建立体外人口腔黏膜成纤维细胞增殖模型。方法体外培养口腔黏膜成纤维细胞,并用波形蛋白、角蛋白免疫细胞化学方法鉴定;分别用0、5、50、100、150、200μg/mL浓度的槟榔提取液对培养的成纤维细胞诱导,MTT法检测细胞增殖。结果波形蛋白表达阳性,而角蛋白表达阴性;50、100μg/mL槟榔提取物促进口腔黏膜成纤维细胞增殖。结论培养的细胞为纯化的成纤维细胞,槟榔提取物诱导口腔黏膜成纤维细胞增殖的最佳浓度为50～100μg/mL。该模型可为进一步的研究提供实验基础。

α-SMA在口腔粘膜下纤维性变成纤维细胞中的表达

目的:探讨肌成纤维细胞在口腔粘膜下纤维性变(OSF)发病机制中的作用。方法:免疫组化法检测组织中和体外培养成纤维细胞中平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)的表达;免疫组化法和RT-PCR法检测槟榔碱对OSF及正常成纤维细胞产生α-SMA和其mRNA表达情况。结果:正常口腔粘膜组织中除血管壁外无阳性染色,而OSF组织中在粘膜下层有大量梭形细胞胞浆被染成棕黄色;体外培养的正常组织来源成纤维细胞中有很少量的α-SMA蛋白表达,OSF来源的成纤维细胞中早期有大多数细胞(85.80%±3.56%)表达α-SMA;槟榔碱干预成纤维细胞后不能增加平滑肌肌动蛋白α蛋白和mRNA的表达。结论:肌成纤维细胞可能在OSF的发病机制中起重要作用,OSF组织中的肌成纤维细胞可能不是槟榔成分直接作用于成纤维细胞转化而来的。

槟榔提取物对口腔粘膜成纤维细胞表达细胞间粘附分子-1的影响

目的 :探讨成纤维细胞 (FB)与细胞间粘附分子_1(ICAM_1)在口腔粘膜下纤维化 (OSF)发生中的可能作用。方法 :分别从正常 (NM)及OSF患者的口腔粘膜中培养出FB ,向培养基中加入不同浓度的槟榔提取物 (ANE)培养 4 8h后 ,用细胞酶联免疫方法检测FB表达的ICAM_1水平。结果 :表示ICAM_1水平高低的OD值在OSF_FB为 0 386±0 0 99,高于NM_FB的OD值 0 32 4± 0 0 30 (P <0 0 5 ) ;ANE在 5 0～ 15 0 μg/ml的范围内以浓度—效应依赖关系刺激FB产生ICAM_1。结论 :ANE能上调FB表达ICAM_1的水平 ,提示ICAM_1及其介导的细胞与细胞或细胞与基质间的相互作用在OSF的发生、发展中可能起重要作用。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗放射性口腔粘膜反应的疗效观察

目的:观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)对放射性口腔粘膜反应的预防和治疗作用。方法:将放射治疗头颈部肿瘤患者120例随机分成治疗组和对照组各60例,于放疗1wk后,治疗组餐后口腔内喷雾rbFGF5喷,3次/d ;对照组餐后含漱朵贝尔氏液,3次/d ,直至放疗结束。结果:治疗组放射性口腔粘膜反应轻于对照组(P<0 .001) ,且治疗组Ⅲ度以上口咽反应发生时间较对照组明显延迟(P<0 .05)。结论:rbFGF能延迟和减轻放射性口腔粘膜反应,且应用安全、可靠。

不同分化程度口腔鳞癌旁的成纤维细胞增殖活力比较

背景与目的:有关口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生发展的机制目前尚未阐明,过去多数研究仅单纯从上皮的角度进行探讨,忽略了间质(宿主)细胞的变异在OSCC发生发展中的重要作用。本研究探讨在不同分化程度OSCC旁的癌相关成纤维细胞(CAFs)其增殖活性是否存在差异。方法:将前期冻存的第三代不同分化程度OSCC旁的CAFs和同部位正常成纤维细胞(NFs)进行复苏并鉴定,测定细胞生长曲线、有丝分裂指数曲线、MTT法,了解各类细胞的增殖活性是否存在差异。重复试验3次,每次检测3孔细胞,将平均值作为最终结果,并用两因素方差分析对检测值进行统计分析。结果:CAFs每天的细胞生长计数值、有丝分裂计数值、MTT检测值均高于NFs,CAFs的生长及存活能力均强于NFs(P<0.05),不同分化程度OSCC旁的CAFs增殖活性的差异有显著性(P<0.05),分化程度较低的舌癌旁CAFs的增殖活性更强。结论:OSCC与CAFs存在交互作用,CAFs增殖活性的改变可能对OSCC的分化程度产生影响。

碱性成纤维细胞生长因子治疗口腔粘膜溃疡的研究

100例口腔粘膜溃疡患者用硷性成纤维细胞生长因子(BFGF)涂擦,5天内愈合率为84%,对照组用养阴生肌散撒布溃疡面100例,5天愈合率为27%,两组对比P<0.001,表明BFGF有促溃疡面加速愈合,缩短疗程之功效。

口腔粘膜肥大细胞介质对成纤维细胞超微结构的影响

目的 :研究口腔粘膜下纤维性变 ( OSF)组织中胶原纤维增生的原因。方法 :采用分离纯化人胚口腔粘膜肥大细胞的介质溶液 ( OMMCC)与体外培养的人胚口腔粘膜成纤维细胞 ( OMFb)共同培养 ,对 OMFb进行形态计量分析。结果 :OMFb内粗面内质网 ( RER)和线粒体 ( Mi)体密度、面密质和 Mi的数密度增大 ,RER和Mi的比表面减小。结论 :OMMCC可促进 OMFb分泌胶原蛋白的功能 ,肥大细胞可能参与了

碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对许旺细胞在小肠粘膜下层增殖活性的影响

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）缓释微球对许旺细胞（SC）在小肠粘膜下层（SIS）上增殖影响。方法运用双酶两步消化法对 SC 进行体外分离、培养、纯化,将 bFGF-PLGA 缓释微球（bFGF-PLGA-MS）与 SC 及 SIS进行体外复合培养,并以游离 bFGF 组及单纯培养液组进行对比,观察 bFGF-PLGA 缓释微球对 SC 在 SIS 上增殖影响。结果运用双酶两步消化的体外原代培养方法获取的许旺细胞数量较多,细胞纯度可达90%以上。细胞的体外增殖活性良好,细胞增殖周期约为6～7d,培养后2～7d 为对数生长期,第7d 后进入生长平台期； bFGF 缓释微球能持续地促进许旺细胞在 SIS 上的增殖；细胞增殖周期缩短,细胞能较稳定地保持着良好的活性；提高了细胞增殖指数,并使 SIS 上的 SC持续保持较高的增殖活性；细胞数量与 bFGF 含量的相关系数为0.988（P =0.02）,表明两者间有明显正相关关系。结论bFGF-PLGA 微球的药物缓释促进了SC 在SIS 上持续而稳定的增殖,为以SC 复合SIS 构建人工神经提供了有利条件。

碱性成纤维细胞生长因子对口腔粘膜病的疗效

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(贝复济)对口腔粘膜病的疗效。方法:治疗组77例使用贝复济,对照组33例使用0.9％氯化钠溶液观察7 d。结果:两组经统计学分析P<0.01具有显著性差异。结论:贝复济治疗复发性口疮等口腔粘膜病有促进创面早期愈合的作用。

口腔粘膜下纤维性变中成纤维细胞形态学初步研究

为探讨口腔粘膜下纤维性变（ＯＳＦ）中胶原堆积的原因，电镜下对（ＯＳＦ）患者病变部位中的成纤维细胞（Ｆｂ）的形态学进行研究，并对各阶段的Ｆｂ进行计数。结果显示：幼稚的Ｆｂ（少分化Ｆｂ和幼Ｆｂ）在正常及病变各均无差别，肌成纤维细胞在ＯＳＦ中期增多，纤维细胞在ＯＳＦ早期减少，中期增加至正常水平，晚期则较其余各期增多。

Tiger17促进口腔黏膜成纤维细胞的增殖和迁移

目的观察在不同浓度Tiger17作用于人口腔黏膜成纤维细胞(hOMF)不同时间后对细胞增殖和迁移的影响。方法培养hOMF细胞,CCK8和划痕实验检测不同浓度Tiger17作用于hOMF细胞不同时间后细胞增殖和迁移的变化;Western Blot检测hOMF细胞表达TGF-β1、Erk1/2和p-Erk1/2蛋白的水平。结果100μg/mL和200μg/mL Tiger17对hOMF的增殖活性在48 h明显高于对照组(P<0.05);100μg/mL Tiger17对hOMF的迁移率在24 h和48 h均明显高于对照组(P<0.01);不同浓度的Tiger17作用于hOMF 24 h和48 h后,细胞表达TGF-β1、p-Erk1/2蛋白升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Tiger17使hOMF细胞表达TGF-β1、pErk1/2升高,促进hOMF细胞的增殖和迁移。

碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对Balb/c胎鼠下颌突外胚间充质细胞增殖的影响

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和表皮生长因子 (EGF)对Balb/c胎鼠下颌突外胚间充质细胞增殖的剂量效应和时间效应。方法 :用体外细胞培养技术和噻唑蓝 (MTT)比色法 ,观察不同浓度和不同时间bFGF和EGF对外胚间充质细胞增殖的影响。结果 :0 .1～ 10 0ng/mLbFGF、0 .1～ 10ng/mLEGF对细胞有促增殖作用 ,并呈浓度依赖性 ,两种生长因子均在 10ng/mL浓度时作用最强 ,并于培养第 5d达到促增殖高峰。结论

成纤维细胞生长因子受体4基因沉默对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的:探讨成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)基因沉默介导RAS/RAF/MAPK信号通路对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:收集本院2018年4月至2019年8月收治的口腔鳞癌患者32对肿瘤组织样本和癌旁非癌组织,利用免疫组织化学和免疫印迹检测FGFR4蛋白的表达;免疫印迹检测正常口腔上皮细胞HOEC和口腔鳞癌细胞(HSC-2、CAL-27和SACC-83)中FGFR4蛋白的表达水平。通过基因沉默技术下调FGFR4表达,利用qRT-RCR和免疫印迹检测SACC-83细胞的FGFR4表达的变化,克隆形成实验检测SACC-83细胞的增殖能力,流式细胞术检测SACC-83细胞的凋亡和细胞周期,免疫印迹检测SACC-83细胞的RAS/RAF/MAPK信号通路。结果:与癌旁非癌组织相比,口腔鳞癌组织的FGFR4表达升高;与正常口腔上皮细胞HOEC相比,口腔鳞癌细胞(HSC-2、CAL-27和SACC-83)的FGFR4表达量高;下调FGFR4表达可抑制SACC-83细胞的增殖,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调凋亡蛋白Bax的表达,促进SACC-83细胞的凋亡,同时抑制周期蛋白P21的表达,使SACC-83细胞停滞于G0/G1期;下调FGFR4表达可抑制RAS、RAF及p-MEK和p-ERK1蛋白的表达。结论:下调FGFR4表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡,使其停滞于G0/G1期,可能与抑制RAS/RAF/MAPK信号通路有关。

地塞米松对成纤维细胞增殖及表达细胞间粘附分子-1的影响

目的 :探讨地塞米松 (DEX)治疗口腔粘膜下纤维性变 (OSF)等口腔粘膜疾病的机理。方法 :分别从正常 (NM)及OSF患者的口腔粘膜中培养出成纤维细胞 (FB) ,向培养基中加入不同浓度的DEX培养 4 8h后 ,用MTT法检测FB的增殖水平 ,并用细胞酶联免疫方法检测其细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的表达水平。结果 :DEX在 10～ 15 0 μg ml的范围内以浓度 效应依赖关系抑制FB增殖 ;表示ICAM 1水平高低的OD值在OSF FB为 0 386± 0 0 99,高于NM FB的OD值 0 32 4± 0 0 30(P <0 0 5 ) ;DEX可下调FB的ICAM 1表达水平。结论 :DEX可能是通过抑制FB增殖和下调ICAM 1的表达而达到治疗OSF等口腔疾病的效果。

体外不同张应力对人牙周膜成纤维细胞增殖活性的影响

目的 观察不同张应力对人牙周膜成纤维细胞 (HPDL F)增殖活性的影响 ,进一步了解 HPDL F的应力 -生物学效应及其在正畸治疗中可能的生长增殖规律。方法 利用自行设计的膜式动态张应力 -体外细胞培养研究系统对分离培养的 HPDL F进行对照组 (0 k Pa)、静张应力组 (5 k Pa)、动态张应力组 1(5 k Pa- 0 k Pa- 5 k Pa)、动态张应力组 2 (5 k Pa- 2 .5 k Pa- 5 k Pa)不同水平及频动范围张应力加载 ,每组再分 16 h、2 4 h和 32 h 3个观察时间点 ,以 3H- Td R掺入法检测其 S期细胞增殖活性。结果 静张应力对 HPDL F具有明显的促增殖作用 ,有使其增殖高峰提前的趋向 ;动态张应力对 HPDL F的增殖活性有一定的抑制作用。结论 不同张应力对 HPDL F的增殖活性的影响明显不同 ,静张应力作用具有明显的促增殖作用 。

槟榔碱预处理的口腔角质形成细胞对肌成纤维细胞分化的影响及机制

目的:了解口腔粘膜下纤维性变组织中肌成纤维细胞的来源及机制。方法:体外培养正常口腔粘膜角质形成细胞(KC)和成纤维细胞(FB),并建立KC和FB共同培养体系;用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白和 mRNA的表达;用ELISA方法检测各组上清中TGF-β1的水平。结果:槟榔碱预处理的KC能促进FBα-SMA的 mRNA表达和蛋白的产生;槟榔碱预处理的KC和FB共同培养组上清中TGF-β1的水平高于FB组和槟榔碱干预FB组。结论:体外情况下经槟榔碱预处理后KC能促进MFB转化;TGF-β1可能在口腔粘膜FB转化为MFB的过程中起作用。