粘膜型人乳头瘤病毒DNA在舌癌及口腔非鳞状上皮细胞性肿瘤中的检测

目的 :观测人乳头瘤病毒DNA在舌癌及其他口腔非鳞状上皮细胞性肿瘤组织中的存在情况。方法 :收集 6 9例各种口腔及颌面部肿瘤组织 ,HE染色后常规病理学检测 ;提取肿瘤组织DNA ,以粘膜型HPV通用引物进行PCR扩增。结果 :4例 (4 / 9)舌癌 ,6例 (6 / 2 5 )腮腺混合瘤 ,2例 (2 / 9)颌骨肉瘤 ,2例 (2 / 15 )涎腺恶性肿瘤组织中HPVDNA呈阳性。而腺淋巴瘤、粘膜白斑、基底细胞腺瘤、颌骨造釉细胞瘤、腺泡细胞瘤组织中未发现有HPVDNA。结论 :部分口腔颌面部肿瘤可检测到HPVDNA ,HPV感染可能在上述肿瘤发生过程中起一定的作用。

口腔鳞状细胞癌相关长链非编码RNA调控肿瘤细胞上皮-间充质转化的研究进展

口腔癌是全球第6大常见恶性肿瘤,其侵袭和转移是导致患者死亡的首要原因。上皮-间充质转化(EMT)使上皮肿瘤细胞获得间充质表型,增强肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,在肿瘤发生、发展和转移中发挥重要作用。近年来,越来越多的研究证明,长链非编码RNA(lncRNA)及其相关的信号通路网络已经成为肿瘤转移中诱导和调控EMT新的参与者。本文就涉及口腔癌EMT调节的几种lncRNA的最新研究进展进行综述。

非编码RNA在口腔鳞状细胞癌耐药机制中的研究进展

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是一种常见的口腔恶性肿瘤,在化疗过程中耐药的产生是临床治疗面临的最大难题。研究表明,非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可以通过促进上皮-间充质转化、调节药物外排转运体、影响DNA损伤应答、诱导自噬、调控耐药相关基因及通路等介导OSCC的化学耐药机制。以非编码RNA为新的治疗靶点,深入研究其在OSCC中的耐药机制具有重要的临床意义。本文综述了OSCC中非编码RNA耐药机制和治疗研究的新进展。

口腔鳞状细胞癌患者循环肿瘤细胞上皮-间充质转化状态的研究

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者与外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)状态的关系。方法:采用CanPatrolTM CTC-二代捕获技术联合RNA多重原位杂交分析(RNA in situ hybridization,RNA-ISH),检测32例OSCC患者术前1 d外周循环血中的肿瘤细胞。CTCs将根据EMT的相关标志物进行分型鉴定。结果:根据EMT相关标志物的表达情况,将检测出的CTCs分为上皮型CTCs(epithelial CTCs,e-CTCs),混合型CTCs(epithelial-mesenchymal-mixed CTCs,mix-CTCs)及间质型CTCs(mesenchymal CTCs,m-CTCs)。CTCs总数为198,其中e-CTCs为56(28.3%),mix-CTCs为128(64.6%),m-CTCs为14(7.1%)。每位患者的CTCs平均数值为(6.19±6.07),其中包括e-CTCs为(1.75±1.91),mix-CTCs为(4.00±5.77)和m-CTCs为(0.44±0.63)。CTCs总体数值与mix-CTCs数值相关(r^(2)=0.908,P<0.001)。e-CTCs数值与淋巴结有无转移(r^(2)=0.278,P<0.05)和TNM分期(r^(2)=0.278,P<0.05)相关。CTCs总体数值与患者术后发生复发或转移(r^(2)=0.252,P<0.05)相关。结论:mix-CTCs和e-CTCs数值可能对OSCC的进展其重要作用,CTCs可能作为OSCC预测预后的潜在指标。

长链非编码RNA FLJ30679对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

背景与目的:长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)能够调控基因转录、mRNA剪切、稳定和翻译,是多种生物学过程中的重要调节因子。本研究旨在探讨lncRNA FLJ30679在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达、与临床病理学特征的关系及对OSCC恶性生物学行为的影响。方法:通过UCSCXena数据库分析FLJ30679在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)组织中的表达及与临床病理学特征的关系。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测FLJ30679在OSCC细胞系中的表达,通过RNA核质分离实验明确其亚细胞定位;采用FLJ30679 Smart Silencer建立FLJ30679敲减组(SS-FLJ30679),采用过表达质粒建立FLJ30679过表达组(FLJ30679)。通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和transwell迁移实验检测FLJ30679表达改变对OSCC细胞增殖和迁移能力的影响。通过RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测OSCC细胞中的FLJ30679表达改变对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因表达的影响。通过Western blot检测FLJ30679表达改变对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase,AKT)通路的影响。结果:数据库分析显示,FLJ30679在HNSCC组织中的表达高于正常组织(P<0.01),且其表达与不良预后有关(P<0.01)。FLJ30679在6种OSCC细胞系中均高表达,且主要定位于细胞核。与对照组相比,FLJ30679敲减组的OSCC细胞增殖和迁移能力显著降低(P<0.01),FLJ30679过表达组的OSCC细胞增殖和迁移能力显著升高(P<0.001)。FLJ30679敲减导致E-钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.01),而N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.01);FLJ30679过表达导致E-cadherin的蛋白表达水平下调(P<0.001),而N-cadherin和vimentin的m RNA和蛋白表达水平上调(P<0.05)。FLJ30679敲减导致磷酸化PI3K(phosphorylated-PI3K,p-PI3K)和磷酸化AKT(phosphorylated-AKT,p-AKT)的蛋白表达水平下调(P<0.001),FLJ30679过表达导致p-PI3K和p-AKT的蛋白表达水平上调(P<0.01)。结论:FLJ30679在OSCC细胞和组织中表达上调,能够促进OSCC细胞增殖和迁移,这可能与FLJ30679激活PI3K/AKT通路,促进EMT的发生有关。

非肿瘤患者血浆鳞状上皮细胞癌抗原升高的研究进展

鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)是一种肿瘤相关蛋白,在健康人血浆中的浓度非常低,多用于肿瘤的诊断、疗效监测及预后评估。然而,在SCC-Ag的临床应用中发现,检测方法、特定的生理及病理过程等多种因素会导致非肿瘤患者血浆SCC-Ag升高,给临床相关疾病的诊疗造成了一定的困惑。文章综述了近年来有关SCC-Ag的研究进展,分析了SCC-Ag在非肿瘤状态下的升高情况,以便更好地理解SCC-Ag的特性,帮助正确解释和使用SCC-Ag的检测结果。

miR-26b对口腔鳞癌细胞SCC15肿瘤干性的抑制作用

目的分析miR-26b对人口腔鳞癌细胞SCC15肿瘤干性的影响及潜在机制。方法比较5例口腔癌患者癌组织和癌旁组织miR-26b表达差异;以miR-26b模拟物及抑制物瞬染SCC15细胞,Sphere实验检测癌细胞体外成球能力、real-time PCR检测干性基因(Nanog/OCT4)表达,Western Blot检测上皮间质转化标志物E-钙粘蛋白水平。结果 5例患者癌组织miR-26b水平均低于癌旁组织(P <0.05)。过表达miR-26b使SCC15细胞成球率下降(P <0.05),Nanog及OCT4表达下调(P <0.05),E-钙粘蛋白水平升高(P <0.05);反之抑表达miR-26b后,SCC15成球率上升(P <0.05),Nanog及OCT4表达上升(P <0.05),E-钙粘蛋白水平下降(P <0.05)。结论 miR-26b能降低SCC15细胞的肿瘤干性,其机制可能与miR-26b抑制细胞的上皮间质转化有关。

长链非编码RNA RUNX1-IT1对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移的影响及其作用机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)RUNX1-IT1对口腔鳞状细胞癌(OSCC)增殖、迁移的影响及其作用机制。方法利用实时qPCR检测lncRNA RUNX1-IT1在OSCC组织和细胞系中的表达水平。采用CCK8、流式细胞术以及Transwell实验检测OSCC细胞生物学行为。利用Western blotting检测上皮-间质转化(EMT)过程相关的蛋白表达。结果lncRNA RUNX1-IT1在OSCC组织和细胞系中表达水平与癌旁正常组织(P<0.001)和正常角质细胞(P<0.01)比较显著增高。lncRNA RUNX1-IT1表达水平和淋巴结转移相关(P<0.05)。过表达或沉默lncRNA RUNX1-IT1后可以调节E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin蛋白水平;也显著上调或下调细胞增殖迁移相关的蛋白(PCNA、Cyclin D1、MMP2)水平。结论lncRNA RUNX1-IT1在OSCC中高表达,且可能通过EMT过程调控OSCC细胞增殖、迁移。

抗凋亡蛋白BAG-1在口腔鳞状上皮细胞癌中的作用

凋亡功能的异常在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用，抗凋亡因素的增强与促凋亡因素的抑制是肿瘤发生过程中的一个关键环节。BAG-1蛋白是目前研究较多的一种抗凋亡蛋白，其高表达被认为与多种恶性肿瘤的发生关系密切。口腔鳞状上皮细胞癌是常见的一种口腔恶性肿瘤，近年来的研究结果显示，BAG-1蛋白的高表达与口腔鳞状上皮细胞癌的恶性程度、转移以及预后有关。

花姜酮对口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化的影响

目的研究花姜酮对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)花姜酮处理人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞,分别在培养24、48、72 h时,应用实时定量荧光PCR检测EMT标志物波形蛋白(Vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA表达水平,并于培养48 h时采用Western blot法检测Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平;采用MTT检测细胞增殖能力、流式细胞仪测定细胞凋亡能力、Transwell小室测定细胞侵袭能力。结果花姜酮处理后,HSC-3细胞E-cadherin mRNA表达水平显著提高(P<0.05);HSC-3细胞Vimentin mRNA表达受到明显抑制,且具有浓度依赖性(P<0.05)。花姜酮处理48 h时,随着花姜酮浓度的增加,HSC-3细胞中Vimentin蛋白表达水平逐渐降低,E-cadherin蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。随着花姜酮作用时间的延长及花姜酮浓度的增加,HSC-3细胞的增殖率逐渐降低(P<0.05)。花姜酮处理后,HSC-3细胞凋亡率明显升高,且随着花姜酮浓度的增加凋亡率显著升高(P<0.05);花姜酮处理后,HSC-3细胞侵袭数显著减少,随着花姜酮浓度的增加细胞侵袭数逐渐减少(P<0.05)。结论花姜酮可以通过抑制人口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭,促进其凋亡,进而抑制EMT进程。

慢性肾脏病患者血清鳞状上皮细胞癌抗原升高的影响因素分析

鳞状上皮细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen,SCC）是宫颈癌、食管癌、肺癌等鳞状上皮细胞来源肿瘤的诊断、肿瘤复发监测、判断预后的指标。正常人血清SCC无异常,但也有非肿瘤患者SCC升高者,笔者发现慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）患者常有SCC升高,本文回顾性分析CKD对血清SCC的影响,并对其影响因素进行分析。

lncRNA CASC9、YKT6在口腔鳞状细胞癌中表达意义及预后价值研究

目的探讨长链非编码RNA肿瘤易感性候选基因9(lncRNA CASC9)、YKT6在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中表达意义及预后价值。方法选取2016年1月至2018年1月在陕西中医药大学附属医院诊治的110例OSCC患者作为研究对象。采用实时荧光定量PCR法检测患者OSCC癌组织及癌旁组织lncRNA CASC9、YKT6 mRNA表达。采用免疫组化检测OSCC癌组织及癌旁组织YKT6蛋白表达。Kaplan-Meier曲线分析不同lncRNA CASC9、YKT6 mRNA表达对OSCC患者预后的影响。Cox回归模型分析影响OSCC预后的因素。结果OSCC癌组织lncRNA CASC9、YKT6 mRNA表达分别为3.12±0.57、2.69±0.42,均明显高于癌旁组织(依次为1.02±0.25、1.13±0.21),差异有统计学意义(t=35.386、34.843,P<0.05)。OSCC癌组织YKT6蛋白阳性率为81.82%(90/110),高于癌旁组织[9.09%(10/110)],差异有统计学意义(χ^(2)=117.333,P<0.05)。OSCC癌组织lncRNA CASC9与YKT6 mRNA表达呈正相关(r=0.788,P<0.001)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化及有淋巴结转移的OSCC癌组织lncRNA CASC9、YKT6 mRNA表达高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、高中分化及无淋巴结转移的OSCC癌组织lncRNA CASC9、YKT6 mRNA表达,差异有统计学意义(均P<0.05)。lncRNA CASC9高表达组、YKT6 mRNA高表达组5年累积生存率低于lncRNA CASC9低表达组、YKT6 mRNA低表达组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=7.080、8.741,P=0.008、0.003)。lncRNA CASC9高表达、YKT6 mRNA高表达、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化及有淋巴结转移是OSCC患者预后危险因素。结论OSCC癌组织中lncRNA CASC9、YKT6表达升高,两者可作为评估OSCC患者预后的肿瘤标志物。

lncRNA PCAT1表达下调抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、生长、侵袭、迁移及上皮-间充质转化

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) PCAT1对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞的增殖、生长、侵袭及迁移的影响,并探讨其可能机制。方法:采用Lipofectamine 200将PCAT1 siRNA转染入OSCC细胞分别利用RT-qPCR和Western blot检测相关基因的mRNA及蛋白表达;分别利用CCK-8实验和集落形成实验检测OSCC细胞的增殖及生长能力;利用细胞侵袭实验和细胞迁移实验检测OSCC细胞的侵袭及迁移能力。结果:PCAT1在OSCC组织和细胞中的表达与癌旁正常组织和正常口腔细胞黏膜角质细胞相比显著上调(P <0. 05)。转染PCAT1 siRNA可以显著降低PCAT1在Tca8113和TSCCa细胞中的表达(P <0. 05)。PCAT1的低表达可以显著抑制Tca8133和TSCCa细胞的增殖、生长、侵袭及迁移(P <0. 05)。PCAT1在Tca8113和TSCCa细胞中的低表达可以抑制ZEB1、N-cadherin和vimentin的mRNA及蛋白表达,同时增加E-cadherin的mRNA及蛋白表达(P <0. 05)。结论:沉默PCAT1能够抑制OSCC细胞的增殖、生长及转移,该作用可能与调控上皮-间充质转化有关。

上皮-间充质转化在口腔鳞状细胞癌发生、发展中作用的研究进展

口腔鳞状细胞癌是一种好发于颌面部皮肤及口腔黏膜的上皮恶性肿瘤,近年来虽然诊断和治疗技术有较大的提升,但由于肿瘤具有浸润性强、易转移的特点,5年生存率并没有明显提高,为解决上述问题,需要从分子生物学层面来更深入认识和研究口腔鳞状细胞癌。上皮-间充质转化的异常激活与肿瘤的发生、发展关系密切,可以提高肿瘤细胞的侵袭和转移能力,使肿瘤细胞对化疗药物具有更强的耐药性。本文就上皮-间充质转化在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用,与肿瘤侵袭前缘相关的信号通路的关系,在化疗耐药中的作用等研究进展作一综述。

microRNA-199a-5p对口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的影响机制

目的:探究MicroRNA-199a-5p通过靶向激酶β(IKKβ)-核因子κB(NF-κB)信号通路影响口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的机制。方法:将离体培养的SCC-25、CAL-27、TCA-8113、SCC-4 OSCC和293口腔鳞状细胞癌细胞分为空白对照组(n=24)、NC模拟组(n=24)和miR-199a-5p模拟物组(n=24)。逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析miR-199a-5p和IKKβ的转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布,蛋白质印迹法检测抗IKKβ、总p65、核磷酸化(p-)p65、NF-κB(IκB)-α抑制剂、p-IκB-α、组蛋白H3、β-肌动蛋白及α-微管蛋白的表达水平,荧光素酶测定试剂盒定量检测NF-κB活性,进行Transwell迁移和侵袭分析肿瘤细胞的侵袭和迁移能力。结果:在OSCC细胞中miR-199a-5p表达下调(P<0.01);与无淋巴结转移的细胞比较,有淋巴结转移的OSCC细胞中miR-199a-5p表达降低(P<0.05);OSCC细胞SCC-25、CAL-27、TCA-8113和SCC-4中miR-199a-5p下调(P<0.05);RTPCR分析显示,与TCA-8113和SCC-4细胞的NC对照组比较,用miR-199a-5p模拟物转染后,miR-199a-5p的表达上调;CCK 8分析表明,与模拟NC转染的细胞比较,miR-199a-5p模拟物转染抑制了细胞活力,在TCA-8113和SCC-4细胞中观察到的凋亡诱导;流式细胞仪分析的结果表明,在miR-199a-5p过表达后,IKKβ表达下调,但在TCA-8113和SCC-4细胞中敲低miR-199a-5p后,IKKβ的表达上调;miR-199a-5p模拟物抑制了pIκB-α的水平,miR-199a-5p模拟物在蛋白质水平上均抑制了p65表达,p65的过表达抑制了ZEB1、TWIST1、E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达,减轻了miR-199a-5p对OSCC细胞的迁移和侵袭的抑制。结论:miR-199a-5p作为OSCC临床诊断和预后的潜在生物标志物,可能是OSCC治疗的有效抗癌靶标。

长链非编码RNA在口腔鳞状细胞癌中的研究进展

近年研究发现,多种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)参与了生物学过程且发挥了重要的调控功能,如胚胎发育、细胞周期调控、干细胞多能性分化、免疫监视等,其异常调节可导致各类疾病包括肿瘤的发生发展,对于多种恶性肿瘤的早期诊断、治疗和预后判断有非常重要的价值。但到目前为止,lncRNA在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的研究报道还较少,本文将结合国内外最新报道对与OSCC相关的lncRNAs的表达及意义和调控机制作一综述,为OSCC的基因诊断和治疗提供新的思路。

Ki-67在皮肤鳞状细胞癌、基底细胞上皮瘤、脂溢性角化病中的表达

Ki-67是增殖性细胞核的标记物，代表细胞增殖水平，迅速地反映恶性肿瘤的增殖率，其高表达是细胞增殖活跃的重要标记。本研究用免疫组化SP法检测Ki-67在皮肤鳞状细胞癌（SCC）、基底细胞上皮瘤（BCE）、脂溢性角化病（SK）的组织表达，并进行差异比较和分析，为研究SCC、BCE的发病机制和早期诊断提供理论基础。

长链非编码RNA在口腔鳞状细胞癌及其微环境中的作用研究进展

口腔鳞状细胞癌作为口腔癌中最常见、最高发的肿瘤类型,在全世界公共卫生范围内是一个令人头疼的问题。关于口腔鳞状细胞癌的许多研究都已经完成或者正在进行,但近些年口腔鳞状细胞癌的生存率、治愈率及预后却并没有得到明显改善。长链非编码RNA(lncRNA)指的是一类长链RNA,但其本身并不编码蛋白质,对其研究仍在不断深入。lncRNA可以影响表观遗传、调控相关基因转录激活、进行基因修饰等,与人类疾病发生发展有密切联系。目前有关口腔鳞状细胞癌与lncRNA之间的研究也在不断进行当中,现对长链非编码RNA与口腔鳞状细胞癌及其微环境之间的作用进行综述。

口腔鳞状上皮细胞癌中Borealin的表达及其意义

目的探讨Borealin在口腔鳞状上皮细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及与Ki-67增殖指数的关系。方法采用免疫组化LSAB法检测20例正常口腔黏膜组织和111例手术切除OSCC组织中Borealin及Ki-67的表达,分析其与OSCC临床病理特征的关系。结果 Borealin在OSCC中高表达(52/111),在正常口腔黏膜中低表达(0/20),差异有统计学意义( P <0.01);Borealin在OSCC中的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移密切相关( P <0.05);Borealin与Ki-67的表达具有相关性( P <0.01)。结论 Borealin表达对判断OSCC的增殖、转移及恶性程度有重要意义,有望成为OSCC新的诊断标志物和治疗靶点。

基质金属蛋白酶9抑制高侵袭性HSC-3口腔鳞状细胞癌细胞的运动能力

基质金属蛋白酶(MMP)9的促肿瘤活性与许多癌症有关,但最近还阐明了 MMP9的肿瘤抑制作用。关于该主题的多方面证据,促使我们检查MMP9在口腔舌鳞状细胞癌(OTSCC)细胞中的作用。使用明胶酶特异性抑制剂、C1T2和短发夹(sh)RNA基因沉默,研究MMP9对侵袭性OTSCC细胞系HSC-3的增殖、运动和侵袭的影响。