口腔黏膜渗出液在HIV、梅毒抗体检测中的研究进展

口腔黏膜渗出液（oral mucosal transudate,OMT）是一种复杂的体液,能反映血液中各种蛋白质和抗体水平的变化,并具有采集方便、快速、无创性等特点,可代替血液作为感染性疾病筛查所用的诊断性液体。

口腔黏膜渗出液检测HIV1/2型抗体的方法评价

目的评价口腔黏膜渗出液检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体的敏感性和特异性,及其与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法分别取已知HIV感染者及未感染者餐前及餐后10分钟、餐后1小时,饮酒前、饮酒后,牙周疾病患者、健康志愿者的口腔黏膜渗出液标本,检测HIV-1/2抗体。同时平行采集上述人群的血清标本,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HIV-1/2抗体。并进一步通过ELISA方法检测标准血清转换盘,同时用此试剂检测该感染者的口腔黏膜渗出液标本中的HIV-1/2抗体。结果15例已知HIV感染者(餐前、餐后10分钟、餐后1小时,饮酒前、饮酒后)口腔黏膜渗出液标本为阳性,其余口腔黏膜渗出液标本均为阴性;15例已知HIV感染者血清标本均为阳性,1例健康志愿者血清标本呈阳性(后经Western Blot试验确认为阴性),余血清HIV抗体均为阴性。该口腔黏膜渗出液HIV抗体检测试剂的敏感性为100%,特异性为100%,与ELISA检测的一致性为99.85%。血清转换盘实验结果显示,血清标本于感染后的33天检出阳性,口腔黏膜渗出液于感染后的28天检出阳性。结论利用口腔黏膜渗出液检测HIV-1/2型抗体与现行的血液ELISA检测结果相近。口腔黏膜渗出液标本采集方便而且危险性小,在采血较困难的人群、基层医疗机构、艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊等,可考虑使用口腔黏膜渗出液进行HIV抗体的初筛检测。

广西MSM人群定期应用HIV抗体口腔黏膜渗出液诊断试剂的意向及影响因素分析

目的了解男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)定期应用人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体口腔黏膜渗出液检测试剂的意向及影响因素。方法采用方便抽样方法在广西招募MSM进行问卷调查,回收有效问卷283份。结果调查对象中89.0%(252/283)有意愿使用HIV抗体口腔黏膜渗出液诊断试剂,70.6%(178/252)愿意定期使用。多因素分析结果表明,最近六个月发生异性性行为(OR=0.247,P=0.009)、既往到疾病预防控制中心/医院检测(OR=0.183,P<0.001)的MSM使用HIV抗体腔黏膜渗出液诊断试剂定期检测的意愿较低。结论广西MSM人群对HIV抗体口腔黏膜渗出液诊断试剂接受意愿较高,可以推广使用。

口腔黏膜渗出液检测丙型肝炎抗体(IgG)的方法评价

目的评价口腔黏膜渗出液检测丙型肝炎病毒抗体(Ig G)的敏感性和特异性,及其与血清中丙型肝炎抗体检测试剂的一致性。方法分别取已知丙型肝炎感染者及未感染者,牙周疾病患者、健康志愿者的口腔黏膜渗出液标本,检测丙型肝炎抗体(Ig G)。同时采集上述受检者的血清标本,通过酶联免疫吸附方法试验(ELISA)检测丙型肝炎抗体(Ig G)。结果经研究发现,20例已确诊丙型肝炎感染者口腔黏膜渗出液标本为阳性,其余健康受检者的口腔黏膜渗出液标本均为阴性,口腔黏膜渗出液检测丙型肝炎抗体(Ig G)检测试剂的敏感性为和特异性均为100%,与ELISA检测的一致性为99.5%。结论由于口腔黏膜渗出液标本采集方便且暴露性小,因此在口岸现场检验检疫大量疑似病例或高危人群中实现现场、快速的筛查过程中具有重要的意义。

口腔黏膜渗出液HIV-1/2抗体快速检测试剂性能影响因素的实验研究

目的探讨无创法快速检测(简称快检)人类免疫缺陷病毒(HIV)-1/2抗体试剂性能的影响因素。方法选取2016年12月至2018年12月无锡市第五人民医院传染病门诊收治的317例HIV-1感染者(疾控中心已确证,实验组)和32例未感染者(对照组)作为研究对象。另从从实验组和对照组中分别选择46例未出现假阴性的感染者和21例未感染者。采集其的口腔黏膜渗出液和血清样本,分析人口学信息、饮水、进食、病毒载量、CD4+T淋巴细胞计数(CD4)和服用抗逆转录病毒药物对口腔黏膜渗出液假阴性率的影响,通过酶联免疫吸附试验法进行校验,计算口腔黏膜渗出液与血清免疫球蛋白G(IgG)的浓度关系,比较四种样品缓冲液对检测性能的影响。结果317例HIV-1感染者口腔黏膜渗出液快检的假阴性率为15.46%,以20~34岁为主,男性假阴性率是女性的1.73倍,实验组低病毒载量、CD4<200个/μL和服抗逆转录病毒药的抗体滴度与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);饮水、进食0h及1h后,未见实验组出现假阴性,未见对照组出现假阳性;口腔黏膜渗出液IgG抗体浓度约为血清的1/9,2h内检测无假阴性。结论快检筛查试剂的性能与感染人群体质差异及样品缓冲液成分有关,口腔黏膜渗出液样品在室温2h内能得到符合率较高的结果。

深圳市男男性行为者HIV口腔黏膜渗出液快速检测试剂的使用情况及影响因素

目的分析深圳市MSM利用口腔黏膜渗出液快速检测(简称口腔自检)试剂进行HIV检测的使用情况及相关影响因素。方法2019年9月至2021年12月,通过微信网络、同伴动员等方式招募深圳市≥18岁且过去1年内发生过同性口交或肛交性行为的男性,利用在线问卷收集目标人群的社会人口学信息、性行为特征、口腔自检试剂使用情况等信息。结果共纳入841名研究对象,其中128名(15.22%)曾做过HIV口腔自检。口腔自检试剂获取途径主要为网店购买和社会组织发放,分别占41.41%(53/128)、32.03%(41/128)。多因素Logistic分析结果显示,大专及以上学历(OR=2.51,95%CI:1.06~5.97)、通过网络寻找性伴(OR=3.13,95%CI:1.24~7.92)是MSM使用HIV口腔自检试剂的促进因素。结论深圳市MSM HIV口腔自检率偏低,文化程度、性伴寻找方式可影响该人群HIV口腔自检试剂的使用。建议开通基于互联网的HIV口腔自检试剂申请渠道,提高HIV口腔自检的覆盖面以期进一步扩大HIV检测。

某口腔黏膜渗出液HIV-1/2型抗体检测试剂现场使用效果

目的对某国产口腔黏膜渗出液艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体检测试剂进行评价,考核其灵敏度与特异度。方法平行采集353例女性性工作者血液及口腔黏膜渗出液标本,分别使用血液HIV抗体检测试剂和某口腔黏膜渗出液(OMT)HIV-1/2型抗体检测试剂进行现场检测,对比两种检测试剂的检测结果。结果经蛋白免疫印迹试验(WB)检测,62例血液HIV抗体阳性者中,61例OMT检测结果为阳性,该试剂灵敏度为98.39%;291例血液HIV抗体阴性者中,12例OMT检测结果为阳性,263例结果阴性,16例结果为不确定。排除16例OMT结果为不确定的样本后,275例HIV阴性者中,263例OMT结果为阴性,该试剂特异度为95.64%。结论口腔黏膜渗出液HIV-1/2检测试剂灵敏度与特异度均较高,可以应用于现场检测中。

一种人类免疫缺陷病毒抗体(HIV 1/2)口腔黏膜渗出液检测试剂盒(免疫层析法)的质量评价

目的对广州万孚公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体(HIV1/2)口腔黏膜渗出液检测试剂盒(免疫层析法),检测不同来源样本的能力进行质量评价。方法分别采集1 183名受检者[包括514名HIV-1感染者、86名乙型肝炎病毒(HBV)感染者、33名丙型肝炎病毒(HCV)感染者、20名梅毒感染者,10名类风湿病人、520名正常人]的血浆样品和口腔黏膜渗出液样品,以广州万孚公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体(HIV1/2)口腔黏膜渗出液检测试剂盒(免疫层析法)作为考核试剂,以北京玛诺生物制药有限公司的人类免疫缺陷病毒抗体口腔黏膜渗出液诊断试剂盒(胶体金法)和上海科华生物工程股份有限公司的人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗体诊断试剂盒(胶体金法)分别作为参比试剂1和参比试剂2。用考核试剂和参比试剂1平行检测口腔黏膜渗出液样品,对来自同一受试者的血浆样本使用参比试剂2进行检测,采用新加坡MP生物医学亚太私人有限公司(MP Biomedicals Asia Pa-cific Pte.Ltd)的人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗体免疫印迹试剂盒作为第三方试剂进行复核。评价考核试剂的阳性符合率、阴性符合率、总符合率。结果考核试剂和参比试剂1的阳性符合率为99.61%,阴性符合率为100.00%,总符合率为99.83%;与参比试剂2的阳性符合率为98.06%,阴性符合率为100.00%,总符合率均为99.15%。广州万孚公司人类免疫缺陷病毒抗体(HIV1/2)口腔黏膜渗出液检测试剂盒(免疫层析法)对口腔黏膜渗出液样本的敏感性为98.25%(95%CI:97.12%～99.38%),特异性为100%(95%CI:99.91%～100%)。结论考核试剂在口腔黏膜渗出液样本检测HIV抗体的敏感性和特异性较好。

VCT人群口腔黏膜渗出液与血液HIV 1/2抗体检测结果比较

目的观察自愿咨询检测(VCT)人群口腔黏膜渗出液(OMT)与血液艾滋病病毒(HIV)1/2抗体检测(胶体金法)结果之间是否有显著性差异及二者的一致性、符合率。方法对148名VCT人员平行进行OMT和血液HIV1/2抗体检测。采用统计学中的配对资料卡方检验比较OMT与血液检测结果差异是否有统计学意义。结果 OMT与血液的HIV1/2抗体检测结果差异无统计学意义(McNemar:P=1.000);二者一致性较好(Kappa=0.901,P<0.001)。以血液检测结果为参照:二者有反应性符合率为93.75%(30/32),无反应性符合率为97.41%(113/116),总符合率为96.62%(143/148)。结论 VCT人群应用OMT检测HIV1/2抗体效果良好,在一定程度上能够代替血液检测。

口腔黏膜渗出液中IgG含量和血清中IgG含量对应关系的分析

目的分析受检者口腔黏膜渗出液(OMT)样本中免疫球蛋白G(IgG)和血清中IgG含量的比对结果,评估OMT中IgG的含量是否适于进行免疫检测。方法采集20名受检者的OMT和血清样本,分别将二者的IgG的含量进行比对,建立OMT中和血清中IgG的比例关系。结果确定OMT中IgG含量约为血清中IgG含量的3.5%-39.0%。结论OMT的采集具有简便、易行的优势,对受检者来说有更好的可接受性和依从性,并且OMT中IgG含量水平能够满足国境口岸现场快速免疫检测的需要,适合于免疫检测。但OMT中IgG必须通过洗脱等步骤的稀释,检测试剂的灵敏度要比血清检测试剂的高300倍左右方可得出满意的结果。

血液/口腔黏膜渗出液/尿液HIV抗体快速检测试剂的性能评价

目的构建血液、口腔黏膜渗出液(OMT)、尿液HIV抗体快速评价盘,评价3种血液,2种OMT和1种尿液HIV抗体快速检测试剂的性能。方法用血液、OMT、尿液国家参考品,实验室评价盘(包括实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室稀释系列盘、实验室精密度盘),商业阳转血清盘,对6种(3种血液,2种OMT和1种尿液)HIV抗体快速检测试剂进行评价,肉眼判读结果,并用金标免疫层析试纸读数仪测定相应的GOD值。结果1)6种试剂的阴性参考品符合率均为20/20,HIV-1阳性参考品符合率均为18/18,3种血液和2种OMT试剂的HIV-2阳性参考品符合率均为2/2。2)3种血液试剂的阳性样本符合率和阴性样本符合率均为40/40,2种OMT试剂的阳性样本符合率均为40/40,阴性样本符合率分别为40/40和38/40。尿液试剂的阳性样本符合率和阴性样本符合率为30/30。3)3种血液试剂的分析灵敏度均为2/3,2种OMT试剂的分析灵敏度分别为3/5和0/5,尿液试剂的分析灵敏度为3/5。4)3种血液试剂的分析特异性均为45/45,2家OMT试剂的分析特异性分别为45/45和36/45,尿液试剂的分析特异性为45/45。5)GOD结果显示6家试剂的批内精密度在7.8%~44.0%之间。结论6家试剂的阴性参考品符合率,阳性参考品符合率,阳性样本符合率、阴性样本符合率均较好。1家OMT试剂的分析灵敏度和分析特异性较差,6种试剂的批内精密度存在差异。

HIV口腔黏膜渗出液快速检测试剂的方法学评价

目的构建艾滋病病毒（HIV）口腔黏膜渗出液（OMT）快速检测试剂（RDTs）评价盘,评价HIV OMT RDTs的质量。方法采集健康志愿者的口腔黏膜渗出液,用稀释液稀释HIV抗体阳性和阴性的血浆样本,分别构建实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室线性稀释系列盘和实验室精密度盘。用6家HIV OMT RDTs（编号：试剂AF）分别检测构建的评价盘和HIV抗体口腔黏膜渗出液快速试剂的国家参考品,肉眼判读检测结果并测定GOD值。结果根据肉眼判读,试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,分析灵敏度≥3/5;试剂D的批内精密度高于其他试剂,试剂F的线性范围为28214。根据GOD值,试剂AE的特异性,阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,敏感性≥92.50%（37/40）,阳性参考品符合率≥95.00%（19/20）,分析灵敏度≥3/5,线性范围分别为28216、27217、26216、26215、25212,批内精密度介于4.91%34.28%之间。结论试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、分析灵敏度、分析特异性较好,试剂BD的线性范围较宽,但饮食因素可能造成试剂D、E出现假反应性,试剂的批内精密度差别较大。

人类免疫缺陷病毒口腔黏膜渗出液质控样本的制备

目的探讨人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)口腔黏膜渗出液(oral mucosal transudate,OMT)质控样本的制备方法,以用于制备HIV OMT快速检测(rapid diagnostic test,RDT)试剂方法学评价的评价盘。方法用6家HIV OMT RDT试剂(编号A^F)样本稀释液(编号D1~D6)分别对1份抗-HIV阳性血浆样本进行倍比稀释(21~220),采用A试剂检测,测定相应的GOD(gold optical density)值,确定各稀释液的线性范围和最适稀释度;根据最适稀释度,用6种稀释液分别对抗-HIV阳性血浆样本进行稀释并分装,评价稀释液的均一性和稳定性,选出最适稀释液;用最适稀释液倍比稀释(21~220)4个系列混合阳性血浆样本,分别用A^F试剂检测,确定最适稀释度;用最适稀释液分别稀释40份抗-HIV阳性和40份HIV阴性血浆样本至最适稀释度制备质控样本,A试剂检测。结果稀释液D1~D6的线性范围分别为9~14、8~13、8~15、8~13、7~14、7~12(P<0.05),最适稀释度为210。均一性评价中,D4稀释后样本的CV<20%;稳定性评价中,37℃放置1~15 d,D1、D3稀释后样本的CV<20%,室温放置1~15 d,D1、D4、D5稀释后样本的CV<20%,2~8℃放置1~30 d,D1、D3、D4稀释后样本的CV<20%,-20℃放置1~30 d,D6稀释后样本的CV<20%;选择D1为最适稀释液。随着倍比稀释次数增加,A试剂、B、C、E、F的GOD值或显色强度先增加后降低,试剂D的GOD值逐渐降低。4种稀释系列满足A^F试剂线性范围的稀释度分别为29、210;28、29、210;210;28、29、210,从中选出210为最适稀释度。利用最适稀释液和稀释度制备的多份阳性质控样本的平均GOD值为5.82,标准差为3.10;阴性质控样本GOD值均为0。结论确定用于制备HIV OMT质控样本的最适稀释液为D1,最适稀释度为210。制备方法合适,可用于制备HIV OMT RDT评价盘。

采用唾液标本检测梅毒特异性抗体的评估

目的评估美国Chembio公司研发的利用唾液标本即口腔黏膜渗出液标本检测梅毒特异性抗体的胶体金快速检测方法的灵敏度和特异性。方法在我国的六个城市以方便抽样的方法收集来自性病门诊、婚检门诊等受检者的全血及唾液标本,以血浆梅毒TPPA的方法做为参照标准,计算唾液标本胶体金检测梅毒特异性抗体灵敏度和特异性。结果梅毒唾液标本胶体法试剂的灵敏度为61.1%[95%CI(54.9%～67.0%)],特异性为99.5%[95%CI(96.7%～99.9%)],一致性为77.3%[95%CI(73.1%～81.0%)],Kappa值为0.566。漏检主要集中已经治愈梅毒患者以及低于非特异检测滴度在1∶4以下的受检者。结论该检测方法的特异性高,无创,可接受性高,适用于畏惧抽血的受检者的梅毒筛查,但是其灵敏度还待进一步提高。

HIV-1/2抗体口腔快速检测仪临床效果观察

目的:评价HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体的敏感性和特异性,及其与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法:使用HIV-1/2抗体口腔快速检测仪采集并检测已知HIV感染者37例及我院性病门诊就诊患者391例口腔外牙龈黏膜渗出液(OMT)标本,同时使用ELISA检测上述人群的血清标本HIV-1/2抗体。结果:37例已知感染者口腔外牙龈黏膜渗出液及血液标本检测均为阳性;391例就诊患者中血液样本呈阳性2例,口腔外牙龈黏膜渗出液呈阳性1例。结果不同的病例1例,后经WesternBlot试验确认为阴性。该HIV-1/2抗体口腔快速检测仪的敏感性为100%,特异性为100%,与ELISA检测的一致性为99.77%。结论:HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测HIV-1/2抗体结果与现行的血液ELISA检测相近。其特有的无创安全、简捷易用的特点适用于不愿或不宜采血人群、艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊和自行检测等,也适用于医疗机构,可有效降低艾滋病职业暴露的风险。

胶体金法快速筛查HIV抗体的应用研究

目的探讨胶体金法快速筛查HIV抗体的可行性和适用性。方法用胶体金法快速筛查测试对象口腔黏膜渗出液中HIV抗体,与ELISA法检测相同测试对象血样HIV抗体作对照。结果本组研究对象150例,用胶体金法快速筛查其口腔黏膜渗出液样本的HIV抗体,阴性127例(阴性率84.7%),阳性23例(阳性率15.3%);再用ELISA法检测研究对象的血浆标本的HIV抗体,阴性129例(阴性率86.0%),阳性21例(阳性率14.0%),二者结果无显著差异(P>0.05)。结论用胶体金法检测人类口腔黏膜渗出液样本作为快速筛查HIV抗体是可行的,值得基层医疗机构推广应用。

男男性行为人群HIV抗体唾液快速自检的准确性及影响因素分析

目的了解MSM人群HIV抗体唾液快速自检的准确性及其影响因素。方法采用非概率抽样，对接受调查的研究对象进行自检全程评判，并对结果进行分析。结果调查对象中年龄21。30岁占57．0％，大专／本科及以上文化程度占45．7％，未婚者占78．5％，临时工占59．3％。调查对象唾液快速自检准确率95．0％，操作步骤中准确率最高为“试纸箭头朝下插入试管”（98．0％），最低为“轻倒置试管三次使溶液混合均匀”（65．0％）。X^2检验结果显示：学历为文盲、取出时不触碰到试纸中间膜、箭头向下插入试管内、是否仔细阅读说明书、是否读懂说明书与自检结果之间差异具有统计学意义（P〈0．05）。多因素logistic回归分析结果显示，学历、取出时不触碰到试纸中间膜和读懂说明书与自检结果准确性有关。结论MSM人群HIV抗体唾液快速白检准确率高，不同文化程度自检的准确性不同；检测中取出试纸时是否触碰到试纸中间膜和读懂说明书影响自检结果准确性。