口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1的构建与理化学特性研究

目的 构建含有口蹄疫病毒（FMDV）衣壳蛋白前体PI-2A和蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗并研究其理化学特性。方法选用鸡痘病毒作为载体，将FMDV的衣壳蛋白前体P1—2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中，构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，并与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞，通过药物BrdU加压筛选、间接免疫荧光实验以及Western blot等方法筛选并获得了一株重组鸡痘病毒。将其经酸、碱、加热、氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理，接种到CEF上观察处理前后口蹄疫重组活载体疫苗vUTAL3CP1细胞病变，分析这些理化因子对口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1重组鸡痘病毒的影响。结果 在pH3．0～9．0范围内，pH值变化不会造成该口蹄疫重组活载体疫苗vUTAL3CP1毒价的显著变化；口蹄疫重组活载体疫苗VUTAL3CP1经50℃60min、55℃30min或60℃15min即可被灭活；对氯仿敏感；经胰蛋白酶37℃作用1h，毒价降低2．44log10TCID50对乙醚有抵抗力，经乙醚作用24h病毒滴度下降1．0log 10TCID50结论 筛选并鉴定了含有口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P12A和蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1，为疫苗研制奠定基础。