慢性B淋巴细胞白血病患者免疫球蛋白Fab段基因克隆及其可变区序列分析

目的 分析慢性B淋巴细胞白血病患者外周血单个核细胞免疫球蛋白Fab段基因。方法 提取慢性B淋巴细胞白血病患者外周血单个核细胞RNA ,选用与IgFR15′和CH1Cμ 3′或CL区(Cκ/Cλ) 3′互补的多对引物 ,通过RT PCR扩增IgFab段基因 ,进行克隆和序列测定 ,并通过DNAtools和计算机网络对其可变区基因同源性进行分析和基因家族归类。结果 7例患者中 4例外周血单个核细胞扩增出轻链基因 ,3例扩增出重链基因。所扩增的 4条轻链基因均属于κ轻链 ,3条重链均为 μ链基因。利用DNAtools分析软件 ,对轻链和重链分别进行同源性比较 ,3条重链可变区基因差异较大 ,轻链可变区基因具有一定的同源性。对所扩增的Ig基因进行归类 ,结果 4例患者的轻链均属于VκI亚组 ;3例患者的重链中 2例属VH3家族 ,1例为VH5家族。