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数目可变串联重复序列用于江苏省168株结核分枝杆菌菌株的基因分型研究 被引量:8
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作者 许卫国 虞浩 +2 位作者 杨丹丹 吕华坤 周扬 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1509-1512,1516,共5页
目的:初步了解江苏省结核分枝杆菌临床分离菌株的数目可变串联重复序列(Variable number of tandem repeats,VNTR)的基因型及VNTR基因分布特征。方法:在苏南、苏中、苏北三个地区13个结核病定点诊疗单位收集临床分离菌株。选取结核分枝... 目的:初步了解江苏省结核分枝杆菌临床分离菌株的数目可变串联重复序列(Variable number of tandem repeats,VNTR)的基因型及VNTR基因分布特征。方法:在苏南、苏中、苏北三个地区13个结核病定点诊疗单位收集临床分离菌株。选取结核分枝杆菌基因组中11个具有明显多态性特征的VNTR位点,通过PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳和Bio Numerics(Version 3.0)软件进行结核菌株VNTR的多态性和聚类分析。结果:共收集到168株结核分枝杆菌。不同的菌株在同一位点上具有多态性。共分为10个基因型(Ⅰ,Ⅱ~Ⅹ型),其中以Ⅷ型为主要基因型,占75.0%、其次为Ⅱ型5.4%、Ⅳ型4.2%、Ⅶ型9.5%。不同地区之间,苏南、苏中、苏北三个地区也都以Ⅷ型为主要基因型,分别占各地区的83.5%,57.1%,76.6%;但是苏南、苏中、苏北三地的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ型菌株分布在各地菌株中的比例有差异显著性((2=54.710,P<0.0001),Ⅱ型以苏中为主(11.9%)、Ⅲ型以苏南为主(3.8%)、Ⅳ型以苏南、苏北为主(5.1%与6.4%)、Ⅶ型以苏中为主(31.0%)。结论:江苏省的结核分枝杆菌具有明显的多态性,以Ⅷ型为主要流行型,不同地区间同样以Ⅷ型为主要流行型,但菌型分布存在一定的差异。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 多位点数目可变串联重复序列分析 基因分型
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老年住院患者肺炎克雷伯菌临床分离株多位点可变数目串联重复序列基因分型特征分析 被引量:5
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作者 张媛媛 徐雅萍 +5 位作者 杜鹏程 强裕俊 张雯 陈晨 于季红 郭军 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期434-437,共4页
目的探讨老年住院患者肺炎克雷伯菌分离株多位点可变数目串联重复序列分析的基因分型特点。方法收集解放军总医院南楼临床部老年住院患者肺炎克雷伯菌临床分离菌株184株,提取基因组DNA,采用多重PCR和毛细管电泳对7个位点进行分析,利用Bi... 目的探讨老年住院患者肺炎克雷伯菌分离株多位点可变数目串联重复序列分析的基因分型特点。方法收集解放军总医院南楼临床部老年住院患者肺炎克雷伯菌临床分离菌株184株,提取基因组DNA,采用多重PCR和毛细管电泳对7个位点进行分析,利用Bio Numerics 5.1软件进行聚类分析。结果 184株肺炎克雷伯菌临床分离株共产生139种基因型,呈现明显的基因多态性;聚类分析结果显示,全部菌株可分为3个基因群,其中Ⅰ群包含93.06%的菌株。结论本医疗中心老年住院患者的肺炎克雷伯菌临床分离株具有明显的优势菌群,其感染来源仍以院内感染为主。 展开更多
关键词 老年住院患者 感染 肺炎克雷伯菌 多位点可变数目串联重复序列分析
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中国汉族人vWF基因内可变数目串联重复序列的研究 被引量:4
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作者 王迎春 李震宇 +4 位作者 王泳 万海英 顾建明 台虹 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期293-296,共4页
用聚合酶链反应(PCR)和聚丙烯酰胶凝胶电泳(PAGE)的方法,研究了71名中国汉族人142条染色体的vWF基因40号内含子的可变数目串联重复序列(VNTR)。中国人群vWF基因内存在ATCT的串联重复序列,其VNTR存在14,13,12,11,10,9,8和7等八种等位基因... 用聚合酶链反应(PCR)和聚丙烯酰胶凝胶电泳(PAGE)的方法,研究了71名中国汉族人142条染色体的vWF基因40号内含子的可变数目串联重复序列(VNTR)。中国人群vWF基因内存在ATCT的串联重复序列,其VNTR存在14,13,12,11,10,9,8和7等八种等位基因,总的理论杂合率为79.4%。该VNTR携带遗传信息量大,作为血管性血友病的遗传指标之一对vWD的遗传咨询和产前诊断具有应用价值。 展开更多
关键词 血管性血友病 von WILLEBRAND因子 VWF基因 可变数目串联重复序列 遗传咨询 遗传性出血性疾病
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可变数目串联重复序列在上海崇明岛地区结核分枝杆菌北京基因型菌株微进化研究中的应用 被引量:4
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作者 乔可 王辉 +3 位作者 杨崇广 罗涛 梅建 高谦 《微生物与感染》 2010年第4期208-213,共6页
本文通过对上海市疾病预防控制中心收集并保存的、来源于上海崇明岛地区痰培养阳性肺结核患者的135株结核分枝杆菌北京基因型菌株进行可变数目串联重复序列(VNTR)和单核苷酸多态性(SNP)基因分型,并构建最小生成树(MST),来寻找适合研究... 本文通过对上海市疾病预防控制中心收集并保存的、来源于上海崇明岛地区痰培养阳性肺结核患者的135株结核分枝杆菌北京基因型菌株进行可变数目串联重复序列(VNTR)和单核苷酸多态性(SNP)基因分型,并构建最小生成树(MST),来寻找适合研究北京基因型菌株微进化的VNTR组合及区分不同亚型的分子标志。结果显示,16位点VNTR与SNP的分型结果最匹配,适合于研究该地区北京基因型菌株的微进化;SNP单倍型主要集中在ST10(42.2%)、ST19(30.4%)、ST22(14.1%)3个类型;4个VNTR位点(Mtub21、QUB26、MIRU16和QUB4156)可能是区分北京基因型菌株不同亚型的分子标志。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 北京基因型 可变数目串联重复序列 单核苷酸多态性 最小生成树 微进化
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结核分枝杆菌可变数目串联重复基因分型 被引量:1
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作者 杨本付 徐飚 +2 位作者 蒋伟利 周佩源 姜庆五 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期700-702,共3页
目的运用可变数目串联重复(VNTR)分型方法研究农村结核病研究现场的结核分杆菌分离株的分子特征,分析与VNTR优势基因型相关的因素。方法经PCR扩增各分离株的5种确切串联重复位点(ETR-A^ETR-E)。根据扩增产物大小,确定各串联重复单元的... 目的运用可变数目串联重复(VNTR)分型方法研究农村结核病研究现场的结核分杆菌分离株的分子特征,分析与VNTR优势基因型相关的因素。方法经PCR扩增各分离株的5种确切串联重复位点(ETR-A^ETR-E)。根据扩增产物大小,确定各串联重复单元的拷贝数,得出每个菌株的VNTR基因型。结果研究现场的101株菌株共分为37个不同的VNTR类型,22名病人分离株为单一基因型,79名病人的菌株分属于15个簇,VNTR42435类型占研究菌株总数的38.6%,但该基因型与卡介苗(BCG)接种耐4种一线药的相关性差异均无统计意学义。结论VNTR分型方法简单快速、分型结果数字化,可以把研究菌株分为不同的群。尚不能认为VNTR 42435的优势来自某些抗痨药和BCG接种。 展开更多
关键词 可变数目串联重复 结核分枝杆菌 基因分型
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婴幼儿淋巴结核病原体及多位点可变数目串联重复序列分析 被引量:2
6
作者 邓桂林 钱雪琴 +4 位作者 武洁 沈鑫 张军 卢水华 沈芳 《微生物与感染》 2014年第2期89-95,共7页
为了解婴幼儿淋巴结核的主要病原体及其分子生物学信息,对分离自73例0~3岁淋巴结核患儿的79份淋巴结穿刺液阳性培养物进行结核分枝杆菌鉴定、3个不同区域片段(RD1、RD9、RD10)扩增及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)。结果... 为了解婴幼儿淋巴结核的主要病原体及其分子生物学信息,对分离自73例0~3岁淋巴结核患儿的79份淋巴结穿刺液阳性培养物进行结核分枝杆菌鉴定、3个不同区域片段(RD1、RD9、RD10)扩增及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)。结果显示,婴幼儿淋巴结核以卡介苗(BCG)感染为主(95.9%),其次为人型结核分枝杆菌感染(4.1%)。通过MLVA分离出4个基因型,3个为独立基因型、1个为成簇基因型。76株属成簇基因型,均为BCG ;3个独立基因型均为人型结核分枝杆菌。研究表明,BCG是引起婴幼儿淋巴结核的主要病原体,临床分离的BCG MLVA分型无差异。 展开更多
关键词 淋巴结核 多位点可变数目串联重复序列分析 卡介苗
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副溶血弧菌的多位点可变数目串联重复序列分型方法的研究 被引量:5
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作者 张金金 李迎慧 +6 位作者 石晓路 邱亚群 林一曼 陈琼城 姜伊翔 扈庆华 李连青 《实用检验医师杂志》 2012年第4期211-215,共5页
目的评价多位点可变数目串联重复序列分析(multiple locus variable number tandem repeat assay,MLVA)方法对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的分型能力,初步了解中国深圳地区VP分离菌株可变数目串联重复序列(variable... 目的评价多位点可变数目串联重复序列分析(multiple locus variable number tandem repeat assay,MLVA)方法对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的分型能力,初步了解中国深圳地区VP分离菌株可变数目串联重复序列(variablen umber tandemrepeat,VNTR)的基因分布特征。方法依据血清型和脉冲场凝胶电泳分析型别选择2006年一2011年分离自临床和食品中的108株VP菌株。采用MLVA方法对其进行基因分型,评价该方法对VP菌株8个VNTR位点的分型能力。结果MLVA8个位点将108株VP菌株分为101个型别,分辨系数为99.86%;将主流血清型03:K6共46株菌分为44个型别,分辨系数为99.71%。MLvA8个位点的多态性都较好(DI均〉0.60),各位点多态性指数由高到低,依次为TR7,TR4,TR10,TR2,TR1,TR8,TR5,TR9。结论MLVA8个位点的联合应用适合于对VP菌株的分型。MLVA对VP的分型研究具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 脉冲场凝胶电泳 多位点可变数目串联重复序列分析 可变数目串联重复序列 基因型
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中国延边朝鲜族和汉族D17S30非翻译区的可变数目串联重复序列多态性研究
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作者 全贵红 陈华勇 黄震英 《延边大学医学学报》 CAS 2001年第3期157-160,共4页
[目的 ]探讨中国延边朝鲜族和汉族D17S3 0位点的非翻译区的可变数目串联重复序列 .[方法 ]应用聚合酶链反应法 .[结果 ]中国延边朝鲜族和汉族等位基因频率总体分布之间均有显著性差异 ;D17S3 0位点的非翻译区的可变数目串联重复序列在... [目的 ]探讨中国延边朝鲜族和汉族D17S3 0位点的非翻译区的可变数目串联重复序列 .[方法 ]应用聚合酶链反应法 .[结果 ]中国延边朝鲜族和汉族等位基因频率总体分布之间均有显著性差异 ;D17S3 0位点的非翻译区的可变数目串联重复序列在中国延边朝鲜族和汉族中的观察杂合性、多态信息含量、个体鉴别力均高于 70 % ;中国延边朝鲜族和汉族中D17S3 0非翻译区的可变数目串联重复序列位点频率分别以A3和A1的为最高 .[结论 ]D17S3 0非翻译区的可变数目串联重复序列在中国延边朝鲜族和汉族中的基因频率分布具有很强的多态性 . 展开更多
关键词 等位基因 基因频率 聚合酶链反应 可变数目串联重复序列 中国 延边朝鲜族 汉族
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不同可变数目串联重复序列组合对中国流行结核分枝杆菌分辨力的评价研究
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作者 陈海霞 蔡超 +7 位作者 刘静仪 张治国 原梅 贾俊楠 孙照刚 黄海荣 高基民 李卫民 《结核病与胸部肿瘤》 2017年第3期173-178,共6页
目的在规范化的结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)可变数目串联重复序列(variablenumberoftandemrepeats,VNTR)基因分型的基础上,构建我国31个省(自治区、直辖市)VNTR数据库,每个省优化一套VNTR位点组合,为我国... 目的在规范化的结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)可变数目串联重复序列(variablenumberoftandemrepeats,VNTR)基因分型的基础上,构建我国31个省(自治区、直辖市)VNTR数据库,每个省优化一套VNTR位点组合,为我国结核病预防控制策略的制定提供科学依据。方法对2007—2008年全国结核病耐药性基线调查的4116株MTBl5位点VNTR(15-VNTR)基因分型。汉高指数(Hunter-GastonIndex,HGI)分析每个位点的分辨率。依据谱系流行特征,以分辨率高和稳定性强为原则,为各省设计一套VNTR优化组合(12.VNTR、10.VNTR、8-VNTR和5-VNTR),采用HGI和成簇率进行评价。结果完成了涵盖率为96.36%(3966/4116)MTB完整15-VNTR图谱。发现QUB11b、MIRU26等7个高分辨率位点;QUB26、MIRU16、Mtub21、QUB11b在部分地区遗传稳定性差。内蒙古自治区、重庆市、黑龙江省的最优组合为10.VNTR,其他各省的最佳组合为8-VNTR。结论VNTR数据库的建立将推动全国范围MTB传染源的追踪;各省优化VNTR组合的推出有助于当地结核病疫情的监测和群体遗传学的研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 可变数目串联重复序列 基因分型 分辨率 成簇率
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DNA数目可变串联重复序列用于结核分枝杆菌分型研究 被引量:8
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作者 阚晓宏 万康林 +7 位作者 金玉莲 刘敬华 杨建安 刘志广 丁虹 赵秀琴 王庆 唐婧 《中国防痨杂志》 CAS 2005年第2期77-81,共5页
目的 采用数目可变串联重复序列 (VNTR)分型方法对安徽省的 5 2株结核分枝杆菌进行分子分型研究 ,探讨该方法用于结核分枝杆菌分型的作用。方法 设计引物 ,采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术对结核分枝杆菌 13个VNTR位点进行检测 ,并通过Bi... 目的 采用数目可变串联重复序列 (VNTR)分型方法对安徽省的 5 2株结核分枝杆菌进行分子分型研究 ,探讨该方法用于结核分枝杆菌分型的作用。方法 设计引物 ,采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术对结核分枝杆菌 13个VNTR位点进行检测 ,并通过BioNumerics 3 0软件进行DNA指纹图谱多态性分析。结果  5 2株结核分枝杆菌可分 4个类别 ,其中 88. 5 %菌株属于一个型 ,其他 3个型所占比例很小 ,分别为 5 . 8%、3 .8%和 1 .9%。结论 来自安徽的结核分枝杆菌存在主要的流行型 ,VNTR分型技术简便、快速 ,是较好的结核分枝杆菌分型方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 数目可变串联重复序列 基因分型 琼脂糖凝胶电泳技术
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可变数目串联重复序列与肿瘤
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作者 王德育 《国外医学(肿瘤学分册)》 北大核心 1996年第4期206-208,共3页
本文对可变数目串联重复序列可能的生理功能进行了阐述,从分子遗传学的角度讨论了可变数目串联重复序列与肿瘤发生的相关性以及在肿瘤研究中的进展。
关键词 肿瘤 可变数目串联 重复序列 分子生物学
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中国炭疽芽胞杆菌多位点可变数目串联重复序列分析基因型多态性
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作者 张慧娟 张恩民 +2 位作者 贺金荣 李伟 魏建春 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期990-996,共7页
目的分析中国炭疽芽胞杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)基因型多态性,建立中国炭疽芽胞杆菌MLVA基因型数据库。方法收集1947年以来中国不同来源的炭疽芽胞杆菌分离菌株,采用MLVA15分型策略进行基因型鉴定,对基因型进行统一编... 目的分析中国炭疽芽胞杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)基因型多态性,建立中国炭疽芽胞杆菌MLVA基因型数据库。方法收集1947年以来中国不同来源的炭疽芽胞杆菌分离菌株,采用MLVA15分型策略进行基因型鉴定,对基因型进行统一编号和命名,分析不同来源菌株MLVA基因型的分布特征,同时通过Bionumerics软件绘制聚类图,分析不同基因型间的遗传关系。结果MLVA15分型可将533株中国炭疽芽胞杆菌分为4群91个基因型,其中54个基因型为中国独有的基因型。新命名的基因型MLVA15-CHN1~MLVA15-CHN6广泛分布于中国不同地区、不同年代和宿主,其余基因型具有地区和年代特征性。结论本研究建立了中国炭疽芽胞杆菌MLVA基因型数据库,掌握了MLVA基因型分布特征及其遗传多态性,为中国炭疽疫情防控及分子溯源技术提供了参考依据。 展开更多
关键词 炭疽芽胞杆菌 基因分型 多位点可变数目串联重复序列分析 遗传多态性
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可变数目串联重复序列和全基因组测序在一起学校结核传播中的应用
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作者 张秀芝 赵爱兰 +2 位作者 张爱洁 马聪兴 徐伟 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第8期1011-1015,共5页
目的利用可变数目串联重复序列(variable number tandem repeats,VNTR)和全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)分析一起学校结核病疫情的传播情况,探讨2种基因分型方法在处理学校结核传播中的作用。方法对2019年北京市首起学校耐... 目的利用可变数目串联重复序列(variable number tandem repeats,VNTR)和全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)分析一起学校结核病疫情的传播情况,探讨2种基因分型方法在处理学校结核传播中的作用。方法对2019年北京市首起学校耐多药肺结核聚集性疫情中获得的6株菌株分别进行菌种鉴定、间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)、VNTR以及WGS分析,分析菌株的分型特征,确定传播链。结果6株阳性培养菌株共涉及2个年级4个班的6名学生,其中1人为首发病例,3人是首发病例的密切接触者,另外2人为一般接触者。经菌种鉴定6株菌株均为结核分枝杆菌。Spoligotyping分型结果显示5株菌株为北京基因型,另1株无结果。VNTR基因分型将6株菌株分成3个簇,菌株成簇率为66.7%,最大的一簇包含4株菌株,基因型相同,表明存在一定程度的近期传播。其余2株为单一菌株,分别在1~2个位点上与其他4株菌相差1.0~1.6个拷贝。WGS结果显示6株菌株间基因组单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)差异均>12个SNP,按照本研究分子生物学鉴定标准,6株菌株间异质性较大,不存在同源性。结论WGS较VNTR基因分型方法在判断结核病近期传播方面有更高的精度和优势。在学校发生结核病疫情,尤其是有耐药结核病例时,WGS能更加精准的鉴定结核病近期传播情况,应作为传统流行病学的补充。 展开更多
关键词 学校 结核病 全基因组测序 可变数目串联重复序列
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儿童结核病101例临床分离结核分枝杆菌多位点串联重复序列分型 被引量:6
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作者 王均 黄延风 +1 位作者 张爱华 许红梅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期1408-1410,共3页
目的了解重庆地区儿童结核病中结核分枝杆菌临床分离株的数目可变串联重复序列(variable numbertandem repeats,VNTR)的分布特征,寻找适合的VNTR位点组合。方法采用多位点串联重复序列(multiple locus VNTRanalysis,MLVA)分型方法,选择... 目的了解重庆地区儿童结核病中结核分枝杆菌临床分离株的数目可变串联重复序列(variable numbertandem repeats,VNTR)的分布特征,寻找适合的VNTR位点组合。方法采用多位点串联重复序列(multiple locus VNTRanalysis,MLVA)分型方法,选择标化的24个VNTR位点,对101例结核分枝杆菌临床分离株DNA进行检测,结果采用BioNumerics 6.1数据库软件进行聚类分析和单位点Hunter-Gaston分辨率指数(Hunter-Gaston index,HGI)分析,并比较分析国际推荐的分组(12、15、24位点)的基因分型鉴定能力。结果 MLVA分析结果显示24个VNTR位点在不同菌株中存在明显的多态性,101例结核分枝杆菌临床分离株可分为1个基因群83种基因型,其中69种基因型只有1个菌株,占68.32%(69/101),另有32株临床分离株表现出14种基因型,占31.68%(32/101),成簇率为17.82%;24个VNTR位点的HGI具有较大差异(0.168~0.829),HGI能达到0.5以上的VNTR位点数有16个;24个VNTR位点进行不同的位点组合:12、15个和24个位点组合的HGI分别为0.995、0.996、0.996。结论 重庆地区儿童结核病中结核分枝杆菌存在基因多态性,国际推荐的15个VNTR位点组合的MLVA分型方法适用于其流行病学的研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 多位点可变数目串联重复序列 基因分型
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云南省昭通地区结核分枝杆菌临床分离株遗传多样性和耐药分子特征
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作者 钱源 范怀艳 +1 位作者 何志坚 王梅 《传染病信息》 2024年第1期35-40,共6页
目的调查云南省昭通地区结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株的遗传多样性和耐药分子特征。方法2022年9月—2023年8月从昆明医科大学附属昭通医院收治的298例涂阳肺结核患者中共采集了MTB 298株,用MeltPro TB测定... 目的调查云南省昭通地区结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株的遗传多样性和耐药分子特征。方法2022年9月—2023年8月从昆明医科大学附属昭通医院收治的298例涂阳肺结核患者中共采集了MTB 298株,用MeltPro TB测定法通过荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)熔解曲线法鉴定所有分离株。用多色熔解曲线分析技术进行间隔区寡核苷酸分型(interval oligonucleotide typing,Spoligotyping)。用分枝杆菌散布重复单元(mycobcterial interspersed repetitive units,MIRU)-可变数目串联重复序列分型(variable number of tandem repeat typing,VNTR)(MIRU-VNTR)24位点分型法进行基因分型。使用PCR和靶向测序检测耐药基因突变。结果北京菌株占所有MTB菌株的69.80%(208/298)。其他谱系包括T、LAM、MANU2、CAS、NEW-1和SITVITWEB数据库中未发现的孤儿型,分别占5.70%(17/298)、3.36%(10/298)、0.67%(2/298)、0.34%(1/298)、8.39%(25/298)及11.74%(35/298)。北京菌株对左氧氟沙星的耐药率略高于非北京菌株(P=0.042),而北京菌株与非北京菌株2种基因型菌株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、吡嗪酰胺、卡那霉素耐药率差异无统计学意义(P>0.05)。MIRU-VNTR 24位点分型分析结果显示,33个菌株可分为13株聚类,其聚类率为39.39%。每个等位基因的Hunter-Gaston指数在0~0.814之间,其中18个位点对非北京菌株具有中高鉴别能力。但只有10个位点对北京菌株具有中高鉴别能力。结论MTB菌株在中国云南省昭通地区表现出较高的遗传多样性,北京菌株是MTB和耐药结核病菌株的优势谱系。 展开更多
关键词 云南省昭通地区 结核分枝杆菌 基因多样性 分枝杆菌散布重复单元-可变数目串联重复序列分型24位点分型 MTB间隔区寡核苷酸分型
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结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分型方法标准化操作程序的建立 被引量:28
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作者 吕冰 Christine Pourcel +6 位作者 刘敬华 董海燕 张媛媛 蒋毅 刘志广 赵秀芹 万康林 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期919-924,共6页
目的建立结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的标准化方法,评价该方法的分型能力、应用价值。方法选取15个位点,采用核酸提取、PCR和琼脂糖凝胶电泳等技术,结合BioNumerics(Version5.0)软件,对中国54株结核分... 目的建立结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的标准化方法,评价该方法的分型能力、应用价值。方法选取15个位点,采用核酸提取、PCR和琼脂糖凝胶电泳等技术,结合BioNumerics(Version5.0)软件,对中国54株结核分枝杆菌临床分离株进行分型。结果确定标准化的MLVA方法,包括细菌分离培养、核酸提取、PCR、琼脂糖凝胶电泳等实验步骤及标化参数的相关数据分析软件的使用。VNTR位点确定为ETRA、ETRB、ETRC、ETRD、ETRE、MIRU10、MIRU16、MIRU23、MIRU26、MIRU27、MIRU39、MIRU40、Mtub21、Mtub30和Mtub39。结论建立MLVA标准化技术方案,该方法操作简便,分型鉴定能力及实验室间结果可比性强,便于网络化,有利于结核病流行中追溯传染源,分析流行趋势。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 多位点可变数目串联重复序列分析 标准化操作程序
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多位点可变数目串联重复序列分析方法在布鲁杆菌病监测中的应用 被引量:14
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作者 赵鸿雁 杨杰 +5 位作者 张旭 朴东日 田国忠 李金平 崔步云 姜海 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期441-447,共7页
目的建立多位点可变数目串联重复序列分析方法(MLVA),并评价其在布鲁杆菌菌株鉴定及流行病溯源中的价值。方法使用MLVA方法,对16株羊种菌、22株牛种菌、21株猪种菌和10株犬种菌株进行分析,使用BioNumerics(Version5.0),对16个... 目的建立多位点可变数目串联重复序列分析方法(MLVA),并评价其在布鲁杆菌菌株鉴定及流行病溯源中的价值。方法使用MLVA方法,对16株羊种菌、22株牛种菌、21株猪种菌和10株犬种菌株进行分析,使用BioNumerics(Version5.0),对16个位点进行聚类分析,聚类方式用平均连锁聚类法(UPGMA)。计算每个位点的差异指数,菌株的基因型通过MLVA2010数据库确定。结果使用MLVA方法,通过Brace06、Bruce08、Bruce11、Bruce12、Bruce42、Bruce43、Bruce45、Bruce55共8个位点可以区分布鲁杆菌的种;通过Bruce04、Bruce07、Bruce09、Bruce16、Bruce30共5个位点可以对菌株进行溯源,确定菌株流行病学相关性。结论MLVA技术是一种分辨率高且易于在省级疾病防控系统监测实验室使用的标准化分型技术。可以加强布病监测能力。 展开更多
关键词 布鲁杆菌属 基因 多位点可变数目串联重复序列分析
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45个可变数目串联重复序列位点用于中国结核分枝杆菌基因型鉴定的分辨力评价 被引量:11
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作者 吕冰 李兆娜 +3 位作者 刘梅 刘志广 赵秀芹 万康林 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期58-62,共5页
目的评价结核分枝杆菌基因组中串联重复序列(VNTR)位点在中国结核分枝杆菌临床分离株的分型鉴定的分辨力。方法参考http://minisatellites.u-psud.fr/网站记载的位点选取其中VNTR位点,参照H37Rv结核分枝杆菌标准株全基因序列,利... 目的评价结核分枝杆菌基因组中串联重复序列(VNTR)位点在中国结核分枝杆菌临床分离株的分型鉴定的分辨力。方法参考http://minisatellites.u-psud.fr/网站记载的位点选取其中VNTR位点,参照H37Rv结核分枝杆菌标准株全基因序列,利用DNAStar软件设计引物,采用PCR分别对中国结核分枝杆菌临床来分离株和H37Rv标准株的VNTR位点进行检测,根据PCR凝胶电泳图片中各菌株相应位点扩增产物的大小,确定重复单元的重复次数。计算Hunter-Gaston指数来分析各位点的分辨能力,及各位点合并分辨力。结果共检测135株中国结核分枝杆菌临床分离株和H37Rv标准株的45个VNTR位点。结果显示45个VNTR位点对136株菌的分辨力各不相同,Hunter-Gaston指数最大者为0.814(0.797-0.830),最小者为O.015(0.001-0.028),〉0.5的有13个位点。位点的合并分辨力分析显示,随着位点数量增加,分辨力增强,如Qubll-b和Qub18两个位点合并分析,Hunter-Gaston指数为0.936,分组数为44组;Qub11-b、Qub18、Mtub21、Rv2372、MIRU26、Qub26、Qub4156c、Qub11-a和Qub15等9个位点合并分析,Hunter-Gaston指数已经达到1,组数为136组,表示已达到最大分辨力,即株水平分型。结论不同VNTR位点具有不同的分辨力。其分型分辨力,多位点联合明显好于单位点。Qub11-b等9个位点的合并分型能力较好,这些位点有利于结核分枝杆菌的分型研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 可变数目串联重复序列 基闪分型
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多位点可变数目串联重复序列分型方法检测布鲁氏菌分型标准化操作方法的建立和应用 被引量:16
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作者 杨杰 赵素莲 +3 位作者 崔步云 姜海 赵鸿雁 朴冬日 《疾病监测》 CAS 2012年第2期137-140,共4页
目的建立常用布鲁氏菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的标准化方法及应用研究。方法选取16个位点,通过核酸提取、聚合酶链反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳、毛细管电泳等技术,结合BioNumerics(Version 5.0)软件,对16株布鲁氏菌标准菌... 目的建立常用布鲁氏菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的标准化方法及应用研究。方法选取16个位点,通过核酸提取、聚合酶链反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳、毛细管电泳等技术,结合BioNumerics(Version 5.0)软件,对16株布鲁氏菌标准菌株和不同地区分离的32株菌株进行分型。结果利用所建立的MLVA方法可以区分16株布鲁氏菌标准菌株,并可以将32株地方株区分为牛种和羊种两大类。结论初步建立了MLVA标准化方法,可以在种的水平鉴定布鲁氏菌,还可以追溯传染源,确定流行趋势。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 多位点可变数目串联重复序列分析 分型 标准化操作程序
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结核分枝杆菌可变数目串联重复序列基因型成簇特征分析 被引量:5
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作者 罗丹 蓝兰 +2 位作者 赵锦明 张影坤 蓝如束 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期490-493,共4页
目的了解广西地区结核分枝杆菌基因型成簇特征及其传播影响因素。方法纳入广西30个结核病耐药监测点2013年登记治疗的痰涂片阳性肺结核患者1 310例,运用可变数目串联重复序列(VNTR)基因分型技术对结核分枝杆菌分离株进行基因分型。... 目的了解广西地区结核分枝杆菌基因型成簇特征及其传播影响因素。方法纳入广西30个结核病耐药监测点2013年登记治疗的痰涂片阳性肺结核患者1 310例,运用可变数目串联重复序列(VNTR)基因分型技术对结核分枝杆菌分离株进行基因分型。统计学处理采用χ2检验,运用非条件Logistic回归分析基因型成簇特征。结果1 310株结核分枝杆菌经VNTR12位点检测分为964个基因型,其中779株为单一基因型,531株可归入185个基因簇之一,每簇含2~40(平均6.6)株分离株。41~60岁成簇比例最高,占45.5%。北京基因型菌株746株,非北京基因型菌株564株,在非北京基因型菌株中原北京菌株占7.4%。结核病近期感染估计值(成簇率)为26.41%;敏感菌株成簇率为24.40%,高于耐药菌株的9.55%(χ2=23.621,P=0.000)和耐多药菌株的8.97%(χ2=9.675,P=0.002);北京基因型菌株成簇率为28.69%,高于非北京基因型菌株的23.40%(χ2=4.610,P=0.032)。敏感菌株成簇比例为37.43%,高于耐药菌株的14.09%和耐多药菌株的15.38%;北京基因型菌株成簇比例为40.88%,高于非北京基因型菌株的37.77%。结论广西地区结核分枝杆菌基因型具有高度遗传多态性,敏感菌株和北京基因型菌株是广西结核病近期传播的主要流行株。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 可变数目串联重复序列 北京基因型
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