激光扫描共聚焦显微术在生物医学中的研究

激光扫描共聚焦显微技术的发展 ,为形态学、分子细胞生物学、神经科学、肿瘤医学、药理学、遗传学等领域的研究提供了新的先进研究方法和手段。本文对激光扫描共聚焦显微术在粘附细胞分选 ,动态荧光分析测定 ,显微细胞外科和光陷阱技术 。

应用激光共聚焦显微技术研究荧光双标记条件下的DAPI光转化效应

DAPI作为重要的荧光染料,在细胞核标记实验中被广泛使用。近期有报道指出,DAPI会因紫外光照射而发生光转化效应,光转化后的DAPI可被蓝色光激发而发出绿色荧光信号,进而影响荧光观察。本文通过对细胞核DAPI染色的同时进行细胞质绿色荧光标记,观察到DAPI光转化效率显著下降,说明胞质的绿色荧光对胞核DAPI光转化效应产生抑制。该研究通过激光共聚焦显微手段,对DAPI光转化效应进行观察和分析,为多标记荧光实验观察提供一定依据。

基于可控光剂量的低荧光漂白共聚焦成像技术

激发光引起的荧光漂白限制了共聚焦成像技术在长时间观测生物样本方面的应用。提出了一种基于可控光剂量的共聚焦成像技术(CLE-CM),该技术通过预实验设置高低阈值,定时读取采样像素值并与预设阈值进行比较,根据比较结果控制每个物方像素的光照时间,以更高效地利用荧光信息,在不牺牲图像质量的情况下降低了荧光漂白。用CLE-CM和标准共聚焦对牛肺动脉内皮细胞样本连续成11幅图像,与第11幅标准共聚焦图像相比,第11幅CLE-CM图像的荧光漂白减少了52.62%,具体降漂白效果与样本中的荧光分布有关。CLE-CM通过减少光剂量大幅降低了共聚焦显微成像的荧光漂白,使共聚焦显微镜能连续成更多张高质量图像。

红叶石楠叶片色素含量测定方法比较

采用分光光度法和激光共聚焦显微术测定不同发育时期的红叶石楠叶片色素含量,并对2种方法进行比较,以期为植物色素测定提供一定参考。