可溶可逆聚合物Eudragit S-100对猪胰脂肪酶的固定化

为了降低不溶性载体固定化对酶催化效率和回收利用的影响,本文作者采用智能性聚合物Eudragit S-100对猪胰脂肪酶进行了固定化修饰。Eudragit S-100主要由甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯共聚而成,具备p H响应的可溶可逆性。结果显示:活化后的Eudragit S-100树脂能够与脂肪酶进行共价结合,在15℃条件下反应6 h后,脂肪酶的平均氨基修饰率约为52.4%;荧光光谱测试表明固定化修饰使得脂肪酶分子肽链发生了一定折叠,脂肪酶的结构较修饰前更为紧凑。固定化后脂肪酶的最适温度保持不变,最适p H向碱性方向移动,总体上表现出更好的稳定性。此外,固定化脂肪酶具备p H响应的可溶可逆性,能够重复使用,经过5次重复使用后,酶活保留仍有45%左右。