江苏地区汉族人群HLA-G 3'非翻译区基因多态性和单体型分析

目的调查江苏地区合格献血者HLA-G 3'非编码区(3'-UTR)基因多态性和单体型特征。方法提取江苏地区合格献血者全血基因组DNA,PCR方法扩增HLA-G 3'UTR,利用基因测序对多态性位点进行基因分型,直接计算基因频率和基因型频率,利用SHEsis软件分析单体型。结果江苏地区88名献血者HLA-G 3'UTR共有8个多态性位点:+2960 14 bp插入/缺失,+3003C/T,+3010C/G,+3027A/C,+3035C/T,+3142C/G,+3187A/G,+3196C/G,其基因频率及基因型频率均符合Hardy-weinberg平衡定律(P>0.05);各位点紧密连锁(D'>0.7),SHEsis软件分析求得频率>0.03的单体型有6种,其中单体型UTR-3(DTCCCG AC,频率=0.256)最为常见。结论本研究分析了江苏地区合格献血者HLA-G 3'UTR的8个多态性位点、连锁不平衡和单体型频率的特征,对于研究本地区HLA-G的基因多态性以及与相关疾病的关系提供了重要依据。

不同类型的EBV感染患儿免疫功能与外周血sHLA-G的变化

目的分析不同类型的EB病毒(EBV)感染患儿免疫功能与外周血可溶型人类白细胞抗原-G(sHLA-G)的变化。方法选取2017年4月至2018年10月该院收治且确诊的EBV感染患儿132例。根据不同临床类型分为EBV相关淋巴组织细胞增生性噬血综合征(EBV-HLH)组(44例)、慢性活动性EBV感染(CAEBV)组(46例)和传染性单核细胞增多症(IM)组(42例),选取同期体检健康的儿童为对照组(35例)。检测各组的细胞免疫功能[CD3^+、CD4^+、CD8^+T细胞及CD4^+/CD8^+比值]、体液免疫功能[免疫球蛋白(Ig)M、IgG和IgA]和sHLA-G水平。结果与对照组比较,所有EBV感染组的细胞免疫功能均存在异常(P<0.05),IM组CD3^+T细胞水平升高(P<0.05),CAEBV组和EBV-HLH组CD3^+T细胞水平降低(P<0.05)。EBV-HLH组CD4^+T细胞水平最低(P<0.05),IM组CD8^+T细胞水平最高(P<0.05),EBV-HLH组CD4^+/CD8^+最低(P<0.05)。与对照组比较,所有EBV感染组的体液免疫功能均存在异常(P<0.05),EBV-HLH组IgA和IgG水平最低(P<0.05),IgM水平最高(P<0.05)。与对照组比较,所有EBV感染组sHLA-G水平均明显升高,IM组sHLA-G水平最低(P<0.05)。结论不同类型的EBV感染均与免疫功能紊乱相关,sHLA-G水平均明显升高,IM类型的EBV感染患儿较为特殊,T淋巴细胞处于激活状态,体液免疫功能变化较小,sHLA-G水平升高,但升高有限,检测细胞免疫功能、体液免疫功能及sHLA-G水平可鉴别IM类型的EBV感染。

宫颈癌患者高危型HPV感染状况及与血清HLA-G、TGF-β1表达的相关性

目的分析宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染状况与血清人白细胞抗原-G(HLA-G)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平表达。方法回顾性选取2018年1月至2020年2月大连市妇女儿童医疗中心(集团)收治宫颈癌患者83例为宫颈癌组,同期纳入宫颈上皮内瘤变宫颈上皮内瘤变(CIN)77例为癌前病变组,健康检查女性70名为对照组。观察3组女性高危型HPV感染状况及血清HLA-G、TGF-β1水平表达。比较不同级别CIN组患者血清HLA-G、TGF-β1表达情况。分析血清HLA-G、TGF-β1水平与宫颈癌患者临床病理特点的关系。结果对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、FIGOⅠB期组、FIGOⅡA期组的高危HPV总感染率分别为0、33.3%、58.8%、75.0%、87.1%、92.3%,宫颈癌病变程度越高,高危HPV总感染率越高,差异有统计学意义(P<0.05)。3组血清HLA-G、TGF-β1水平比较,宫颈癌组高于癌前病变组和对照组,癌前病变组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。宫颈上皮内瘤变患者组间比较,病变程度越高血清HLA-G、TGF-β1水平越高,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清HLA-G、TGF-β1水平与宫颈癌组病理类型及淋巴结有无转移无关(P>0.05);FIGO分期越高患者血清HLA-G、TGF-β1水平越高,肿瘤分化程度越低患者血清HLA-G、TGF-β1水平越高,HPV病毒负荷量越大HLA-G、TGF-β1水平越高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高危型HPV感染状况及与血清HLA-G、TGF-β1水平表达与宫颈癌患者的病变程度密切相关,同时血清HLA-G、TGF-β1水平与宫颈癌患者的肿瘤分化程度及高危型HPV病毒负荷量密切相关。

血清HLA-G LCN2水平与高危型HPV感染宫颈癌患者临床特征及病毒载量的相关性研究

目的研究血清人白细胞抗原-G(HLA-G)、脂质运载蛋白2(LCN2)与高危型HPV(HR-HPV)感染宫颈癌患者临床特征及病毒载量的相关性。方法选取2021—2023年杭州市临平区第一人民医院收治的宫颈癌患者130例为宫颈癌组,另选取该院同期收治的经病理学检查确诊为宫颈上皮内瘤变(CIN)患者68例为CIN组及慢性宫颈炎患者60例为对照组,3组均明确为HR-HPV感染。比较3组血清HLA-G、LCN2水平及病毒载量。针对HR-HPV感染宫颈癌患者,分析血清HLA-G、LCN2水平与患者临床特征的关系,并采用Person相关性分析血清HLA-G、LCN2水平与病毒载量的相关性。结果宫颈癌组血清HLA-G、LCN2水平及HR-HPV病毒载量水平[(15.83±3.35)ng/ml、(85.44±21.06)pg/ml及(1156.87±243.30)RLU/CO]均高于CIN组[(11.45±3.64)ng/ml、(46.54±10.36)pg/ml及(705.36±94.11)RLU/CO],差异均有统计学意义(t=9.242、13.231及28.098,均P<0.05)。临床TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、脉管浸润阳性及有淋巴结转移宫颈癌患者的血清HLA-G、LCN2水平均高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、脉管浸润阴性及无淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高等病毒载量组宫颈癌患者血清HLA-G、LCN2水平[(19.89±4.35)ng/ml、(92.74±25.24)pg/ml]高于中等病毒载量组[(15.45±3.64)ng/ml、(81.24±22.06)pg/ml],中等病毒载量组血清HLA-G、LCN2水平高于低等病毒载量组[(10.51±3.08)ng/ml、(75.34±20.15)pg/ml],差异均有统计学意义(t=4.609、9.184、6.633及11.027,均P<0.05)。血清HLA-G、LCN2与HR-HPV病毒载量均呈正相关(r=0.544、0.580,均P<0.05)。结论血清HLA-G、LCN2在HR-HPV感染宫颈癌患者中均高水平表达,其与患者临床TNM分期、脉管浸润以及淋巴结转移有关,与HR-HPV病毒载量均呈正相关。

子宫内膜异位症患者血清PAI-1、sHLA-G、MMIF表达及临床诊断

目的:探讨子宫内膜异位症(Ems)患者血清纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)、巨噬细胞移动抑制因子(MMIF)表达及临床诊断意义。方法:选择2019年1月-2020年6月本院接诊的Ems患者68例为Ems组,同期体检健康妇女65例为对照组,分析两组血清PAI-1、sHLA-G、MMIF水平,采用受试者工作特征曲线(AUC)分析血清PAI-1、sHLA-G、MMIF诊断Ems价值。结果:Ems组血清PAI-1(193.56±61.68 mg/L)、sHLA-G(10.68±1.74μg/L)、MMIF(2.01±0.42 ng/ml)水平高于对照组,且Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期患者,轻度痛经<中度痛经<重度痛经患者(均P<0.05);预测子宫内膜异位症的AUC,PAI-1为0.983,95%CI为0.935~1.000;sHLA-G为0.986,95%CI为0.975~0.993,MMIF为0.981,95%CI为0.959~0.992;3项联合检测(0.996,95%CI为0.993~1.000)高于单独检测(P<0.05),此时特异度(93.2%)、准确度(94.3%)均高于单独检测。结论:在子宫内膜异位症患者中血清PAI-1、sHLA-G、MMIF的表达与不同分期、痛经程度存在密切关系,对子宫内膜异位症有较高预测价值。

HLA-E与oHSV2 VP5蛋白相互作用研究

溶瘤病毒代表了一类新的免疫治疗药物。它通过选择性杀伤肿瘤细胞和诱导全身性抗肿瘤免疫的双重作用机制,促进抗肿瘤反应。溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒oHSV2是由单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)基因改造而来的新型溶瘤病毒。人类白细胞抗原E(HLA-E)是一种HLAⅠb类分子,是CD94/NKG2A的强效抑制配体,它们的结合会抑制CTL细胞和NK细胞功能。多项研究已证实HLA-E会在人肿瘤细胞表面过表达,研究团队前期研究也表明oHSV2会在体外上调部分肿瘤细胞系表面HLA-E的表达。应用GST pull-down和质谱技术确定oHSV2的VP5蛋白(由UL19基因编码)为HLA-E的相互作用蛋白,并通过激光共聚焦实验进行了初步验证。它们相互作用的确定,为探究oHSV2是否干扰HLA-E和CD94/NKG2A的结合奠定研究基础。

肥胖与精液质量及精浆肿瘤标志物的相关性研究

目的探讨肥胖对精液质量及精浆肿瘤标志物表达的影响。方法选取2019年1月至6月在河北省人类精子库捐精的44例体重指数(BMI)<24kg/m^(2)的志愿者作为对照组,另选取河北省生殖医学中心就诊的39例BMI≥28kg/m^(2)的男性不育患者作为观察组。采用计算机辅助精液分析(CASA)系统检测精液参数,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测精浆糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原153(CA153)、转化生长因子β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、酸性成纤维细胞生长因子-1(aFGF-1)、癌胚抗原(CEA)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、可溶型人白细胞抗原-G(sHLA-G)水平。结果与对照组比较,观察组体重、BMI明显升高(P<0.01),精子浓度、精子总数明显降低(P<0.05),精浆VEGF表达水平明显降低(P<0.01),sHLA-G表达水平明显升高(P<0.01);除VEGF、sHLA-G两个因子外,CA125、CA199、CA153、TGF-β1、CEA、NSE、CYFRA21、EGF、aFGF-1、IGF-1相互间均显著相关(P<0.01),sHLA-G仅与IGF-1因子具有相关性(P<0.05),VEGF与其他因子均无相关性(P>0.05)。结论肥胖导致精液质量下降,精浆VEGF与sHLA-G水平可能是肥胖人群精液质量下降的重要原因之一。

解毒活血中药对急性冠脉综合征患者PCI术后CD40-L及tPA的影响

目的检测解毒活血中药对急性冠脉综合征(ACS)患者冠脉介入术(PCI)术后白细胞分化抗原40及其配体(CD40-L)及组织型纤溶酶原激活剂(tPA)的影响,探讨解毒活血中药治疗急性冠脉综合征不稳定斑块的机制。方法采用经皮Seldinger穿刺法或经桡动脉穿刺法选择性冠脉造影术。检测PCI术前及PCI术后用药30d后采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定CD40-L、tPA水平。结果治疗组治疗后CD40-L及tPA水平下降更明显(P<0.05)。结论解毒活血中药能降低ACS患者PCI术后CD40-L及tPA水平,抑制PCI术后炎症。

HLA-G基因上游调控区-725单核苷酸多态性与重度子痫前期易感性的关系

目的:采用病例-对照研究,探讨人类白细胞抗原(HLA)-G上游调控区-725单核苷酸多态性与子痫前期的发病是否存在关联。方法:对孕晚期重度子痫前期患者40例、正常足月妊娠妇女41例,提取全血基因组DNA,特异引物巢式聚合酶链反应扩增5’上游调控区,并进行基因测序,对-725位点基因型及等位基因频率进行χ2检验。结果:重度子痫前期组人类白细胞抗原-G基因-725单核苷酸多态性基因型频率GG、GC、CC分别为0%、7.5%、92.5%,正常对照组分别为0%、7.3%、92.7%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。重度子痫前期组该位点等位基因频率G、C分别为3.8%、96.2%,正常对照组分别为3.7%、96.3%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HLA-G基因-725单核苷酸多态性与中国河南汉族人群重度子痫前期的发病可能没有直接相关。

主动免疫治疗对URSA患者外周血sHLA-G的表达影响的研究

目的检测URSA患者经主动免疫治疗前后外周血中sHLA-G的水平表达,为主动免疫治疗对URSA患者疗效评价提供一定的理论及方法学依据。方法将研究对象分为四组,URSA组、URSA主动免疫治疗组、正常早孕组及正常未孕组。用ELISA法定量检测样本中sHLA-G的表达情况,RT-PCR半定量检测外周血中sHLA-G的表达情况。结果(1)正常早孕组血清中sHLA-G的表达水平显著高于原因不明性流产组以及正常未孕组(P<0.05);URSA患者主动免疫治疗组sHLA-G的表达水平高于原因不明性流产组以及正常未孕组(P<0.05),与正常早孕组相比无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR半定量检测显示URSA组及正常未孕组sHLA-G表达均低于正常早孕组及治疗组(P<0.05)。结论淋巴细胞主动免疫治疗可以提高外周血中sHLA-G的表达,主动免疫治疗能够有效治疗URSA妊娠后的流产患者。