可溶型破骨细胞相关受体对高血压患者合并颈动脉斑块的预测价值

目的探讨可溶型破骨细胞相关受体(soluble osteoclast-associated receptor,sOSCAR)对高血压患者合并有颈动脉斑块的预测作用。方法选取2017年1月至2018年1月在南通大学第二附属医院心内科就诊的高血压患者85例,男性50例,女性35例,平均年龄(67.70±10.65)岁。根据颈动脉彩色多普勒超声的检查结果,将以上患者分为颈动脉斑块组(A组55例)和无颈动脉斑块组(B组30例),所有患者入院时记录年龄、性别、体重指数、2型糖尿病史、高脂血症史等临床资料,次日清晨抽取空腹血液样本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测sOSCAR水平,比较两组间基线资料的差异,利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)判断sOSCAR对高血压患者合并颈动脉斑块的预测价值。多因素Logistic回归分析筛选高血压患者合并有颈动脉斑块的独立相关因素。结果A组平均年龄明显高于B组[(69.79±10.53)岁比(62.43±9.30)岁,P<0.05]、(A组2型糖尿病发生率明显高于B组(54.5%比32.0%,P<0.05)、A组低密度蛋白明显高于B组[(2.51±0.69)mmol/L比(1.96±0.71)mmol/L,P<0.05]o B组患者的血清sOSCAR水平明显高于A组[(25&56±96.36)pg/ml比(115.23±90.23)pg/ml,P<0.05],sOSCAR水平预测颈动脉斑块的ROC曲线下面积为0.802(95%CI 0.693-0.886,PvO.001)。多因素Logistic分析显示血清低sOSCAR水平与颈动脉斑块有独立相关性(O7?=0.988,95%CZ 0.981〜0.996,P=0.001)。结论血清sOSCAR可用于预测高血压患者颈动脉斑块形成。

可溶型破骨细胞相关受体对高血压患者合并颈动脉斑块的预测价值

通过检测血清OSCAR在EH伴颈动脉斑块患者中的变化,以期为疾病的预测提供一定的依据。方法:选取120例原发性高血压(EH)患者根据是否发现斑块分为颈动脉斑块组(n=77)和非颈动脉斑块组(n=43),比较两组患者血清OSCAR水平的差异,并绘制ROC曲线分析血清OSCAR对EH患者合并颈动脉斑块形成的预测价值。结果:颈动脉斑块组患者的年龄、DM和LDL-C等水平明显高于非颈动脉斑块组,而血清OSCAR水平低于非颈动脉斑块组,两组间比较有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线分析发现:血清OSCAR预测颈动脉斑块形成的曲线下面积(AUC)为0.811,最佳cut-off值为115.35pg/mL,诊断敏感度为72.53%,诊断特异度为85.85%。结论:血清OSCAR水平有助于预测EH患者颈动脉斑块形成,具有一定的临床实用价值。

破骨细胞相关受体研究进展

人破骨细胞相关受体是一种细胞表面分子,属白细胞受体复合物编码的家族成员,广泛表达于破骨细胞、单核细胞、巨噬细胞、单核源树突状细胞等髓系来源细胞,与破骨细胞分化过程中的重要调控因子相互作用,参与破骨细胞分化,在骨代谢中发挥重要作用,受多种因素调节。同时,破骨细胞相关受体与Fc受体γ链特异性结合,调节免疫反应。

类风湿关节炎患者血清破骨细胞相关受体的临床意义

目的通过比较类风湿关节炎患者及正常人血清破骨细胞相关受体(osteoclast-associated receptor,OSCAR)水平,验证破骨细胞相关受体参与类风湿关节炎的炎症过程。方法采用ELISA方法测定类风湿关节炎患者及正常人血清中破骨细胞相关受体水平。结果类风湿关节炎患者血清OSCAR水平为(1.259±0.450)ng/ml,较正常对照组(1.754±0.426)ng/ml低,且与疾病活动性呈负相关,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论破骨细胞相关受体参与了类风湿关节炎的炎症过程,在关节损伤及破坏过程中具有重要作用。

PTHrP促进RANKL诱导巨噬细胞分化为破骨细胞参与中耳胆脂瘤骨破坏

目的:骨质进行性吸收破坏是中耳胆脂瘤最重要的临床特征之一,可导致一系列颅内外并发症,而目前中耳胆脂瘤骨破坏的机制尚未明确。本研究旨在探究甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)参与中耳胆脂瘤骨破坏的机制。方法:收集后天性中耳胆脂瘤患者的25例胆脂瘤标本和13例外耳道正常皮肤组织标本。采用免疫组织化学染色方法检测PTHrP、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)在中耳胆脂瘤和外耳道正常皮肤组织中的表达,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色法检测中耳胆脂瘤和外耳道正常皮肤组织中是否存在TRAP阳性多核巨噬细胞。选取小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞进行干预,分为RANKL干预组和PTHrP+RANKL共同干预组,采用TRAP染色法检测2组破骨细胞的生成情况,实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测干预后2组破骨细胞相关基因TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)和活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T cell cytoplasmic 1,NFATc1)的mRNA表达水平,骨吸收陷窝实验检测2组破骨细胞的骨吸收功能。结果:免疫组织化学染色结果显示,PTHrP和RANKL在中耳胆脂瘤组织中的表达均显著增高,OPG表达降低(均P<0.05),且PTHrP的表达与RANKL、RANKL/OPG比值均呈显著正相关,与OPG表达呈显著负相关(分别r=0.385、r=0.417、r=-0.316,均P<0.05)。同时,PTHrP、RANKL的表达水平与中耳胆脂瘤的骨破坏程度均呈显著正相关(分别r=0.413、r=0.505,均P<0.05)。TRAP染色结果显示中耳胆脂瘤上皮周围基质中有大量TRAP阳性细胞,并存在细胞核数量为3个或3个以上的TRAP阳性破骨细胞。RANKL或PTHrP+RANKL联合干预5 d后,与RANKL干预组相比,PTHrP+RANKL联合干预组的破骨细胞数量显著增加(P<0.05),且破骨细胞相关基因TRAP、CTSK和NFATc1的mRNA表达水平均升高(均P<0.05)。骨吸收陷窝扫描电镜结果显示RANKL干预组、PTHrP+RANKL联合干预组的骨片表面均形成骨吸收陷窝;与RANKL干预组相比,PTHrP+RANKL联合干预组的骨片表面骨吸收陷窝数量显著增加(P<0.05),面积也更大。结论:PTHrP可能通过促进RANKL诱导胆脂瘤组织周围基质中的巨噬细胞分化为破骨细胞,参与中耳胆脂瘤骨破坏。

肿瘤坏死因子受体相关因子6与破骨细胞

肿瘤坏死因子受体相关因子是细胞胞浆内的一类重要的接头分子。其中肿瘤坏死因子受体相关因子6,通过与破骨细胞表面的核因子κB受体激动剂结合,并将信号下传,激活c-Src、Jun氨基末端激酶、核因子κB,在破骨细胞的分化与成熟过程中起着重要的作用。

运动上调GPR48-RANKL通路影响2型糖尿病小鼠破骨细胞分化

目的:探究T2DM小鼠OC分化变化及不同力学刺激通过GPR48-RANKL通路对T2DM小鼠OC分化的分子调控作用。方法:40只4周龄雄性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后随机分为T2DM造模组(30只)和正常对照组(ZC,10只)。T2DM造模组小鼠6周高脂膳食结束空腹12 h后注射STZ,2周后检测小鼠血糖,有27只造模成功并将其随机分为T2DM对照组(TC,9只)、T2DM游泳组(TS,9只)和T2DM游泳组(TD,9只),TS和TD组小鼠分别进行8周游泳和下坡跑训练。结束后,取右侧股骨并利用RT-PCR法检测相关因子mRNA表达;取左侧胫骨并利用West-blotting法检测相关因子蛋白表达;取小鼠BMM并诱导其向OC分化,利用TRAP染液对OC染色;取右侧胫骨并利用游标卡尺检测其大小。结果:与ZC组相比,TC组GPR48、OPG、RANKL、RANK、NFATc2、CTSK的mRNA和GPR48、RANKL、RANK蛋白表达均显著变化(P<0.05或P<0.01),OC数量显著增多,远端冠状面宽度和近端冠状面宽度显著变小(P<0.05)。与TC组相比,TS组GPR48、OPG、RANKL、NFATc2、CTSKmRNA和GPR48、RANKL蛋白表达均显著变化(P<0.05或P<0.01),OC数量显著减少;TD组GPR48、OPG、RANKL、RANK、NFATc2、CTSKmRNA和GPR48、RANKL、RANK蛋白表达均显著上调(P<0.05或P<0.01),OC数量显著减少,胫骨长度和中间矢状轴宽度显著减少(P<0.05或P<0.01)。与TS组相比,TD组OPG和CTSKmRNA及GPR48、RANK、RANKL蛋白表达均显著变化(P<0.05或P<0.01),OC数量显著减少。结论:T2DM小鼠OC分化显著增强;直接作用力激活T2DM小鼠骨中GPR48-RANKL通路,进而抑制RANK及其下游靶基因表达,抑制OC分化,且其作用效果优于间接作用力。

体外培养人牙囊细胞表达的OPG和RANKL对破骨细胞表型分化的影响

目的:建立人牙囊细胞(Human dental follicle cells,HDFCs)与人外周血单核细胞(Peripheral blood monocytes,PBMCs)共培养体系,研究体外培养人牙囊细胞表达的骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)和核心因子kappB受体激活剂(Receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)对破骨细胞表型分化的影响。方法:取健康成人外周血分离出单核细胞,同时分离12～14岁青少年第三磨牙牙囊进行原代培养,建立两种细胞共同培养系统。实验分七组:A、单核细胞;B、单核细胞+牙囊细胞(接触);C、单核细胞+牙囊细胞(接触)+集落刺激因子-1(Colony stimulating factor-1,CSF-1)+甲状旁腺相关蛋白(Parat hyroidhormone-related protein,PTHrP);D、单核细胞+牙囊细胞(不接触);E、单核细胞+RANKL+CSF-1;F、单核细胞+RANKL+CSF-1+牙囊细胞(不接触);G、单核细胞+RANKL+CSF-1+牙囊细胞(不接触)+anti-OPG。把每组细胞接种到预置玻片和牙本质片的24孔板中培养,观察细胞变化。培养第10天,取出玻片,进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,计数每组TRAP染色阳性细胞;第14天取出牙本质片,扫描电镜下观察骨陷窝形成情况。结果:B、F组可见少量破骨样细胞,A、D组无破骨样细胞,E组破骨样细胞分化最显著,C、G组破骨样细胞较E组略少,但无显著性差别(P>0.05),与其他各组差别显著(P<0.05)。结论:实验结果证实体外培养人牙囊细胞表达的RANKL和OPG分别对破骨细胞表型分化具有正向和负向调节作用。

可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体联合降钙素原检测在呼吸机相关性肺炎早期诊断及预后判断中的价值

目的探讨可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(su PAR)联合降钙素原(PCT)检测在呼吸机相关性肺炎(VAP)早期诊断及预后判断中的价值。方法选取60例VAP患者(观察组)根据不同预后情况分为存活组32例与死亡组28例,同期选择30例行机械通气治疗而未出现VAP的患者设为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测观察组及对照组患者机械通气前后血清su-PAR、PCT表达水平,同时检测死亡组和存活组治疗第1、3、5、7天时血清su-PAR、PCT表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线法分析血清su-PAR联合PCT诊断VAP和预测VAP患者生存情况的价值。结果 2组机械通气前以及对照组机械通气前后血清su-PAR、PCT表达水平比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05),观察组机械通气后血清su-PAR、PCT表达水平显著高于机械通气前及对照组机械通气后(P <0. 05);死亡组治疗第1、3、5、7天时的血清su-PAR、PCT表达水平显著高于存活组(P <0. 05),且随治疗时间的延长而显著升高(P <0. 05),存活组则在治疗第5天达到高峰,而第7天显著降低(P <0. 05);血清su-PAR联合PCT早期诊断VAP和预测VAP患者生存情况的价值均优于单一指标检测。结论血清su-PAR联合PCT检测在VAP早期诊断及预后判断中具有较高的应用价值。

Toll样受体在成骨细胞和破骨细胞中的表达及作用

Toll样受体(TLRs)在早期固有免疫中对入侵病原微生物的识别发挥重要作用,并在固有免疫和适应性免疫中起着枢纽作用。近来研究发现,TLRs在成骨细胞(OB)及破骨细胞(OC)分化、成熟及其功能中具有重要的调控作用。OC骨吸收与OB骨形成构成了持续不断的骨重建过程。阐明TLRs在OB和OC发生和功能中的作用,可加深对骨代谢相关疾病发生机制的认识并为开发针对性药物提供新的方法。

小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用

背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳朵、免疫系统、黑色素瘤,特别是骨骼和皮肤。目的:文章介绍MITF基因位点的发现与克隆,综述了MITF上调与破骨细胞活性相关的基因的表达和通过细胞融合调节破骨细胞的发育,敲除MITF后抑制破骨细胞的分化以及MITF及其信号通路在破骨细胞的分化中的作用。方法:作者以“MITF、骨破坏、破骨细胞、成骨细胞、小眼畸形相关转录因子、组织蛋白酶K、核因子κB、核因子κB配体”为关键词,检索2000年至2018年中国知网数据库和PubMed数据库中相关文献,并将这些文献进行筛选与总结。结果与结论:最终纳入文献43篇。①MITF对于多种细胞系的分化是必不可少的,并且通过与谱系特异性辅因子的相互作用以及其对特定信号级联的响应而获得其特异性;②MITF在破骨细胞的分化过程中发挥了重要的作用,其能够促进骨破坏;③研究MITF在骨破坏中的作用机制以及骨微环境的改变,可以成为治疗这一系列骨破坏疾病的关键靶点。

破而后立:骨骼系统中破骨细胞新功能解析

骨骼系统为支撑身体、协调躯体运动、控制矿物质稳态和造血提供了重要的基础。破骨细胞是由单核/巨噬细胞造血谱系前体细胞融合而成的特化细胞,在骨稳态和健康维持中至关重要。已有大量实验证实其细胞形成和功能失调与骨质疏松症、骨折愈合、骨关节炎和原发性/转移性骨肿瘤等密切相关。一直以来,破骨细胞作为“噬骨者(bone eaters)”被聚焦于探讨其在骨稳态和疾病中的角色。近年来,随着单细胞标记和检测技术的快速发展并在骨领域中的广泛应用,新的“破骨细胞亚型”概念及其功能不断得到解析和完善。骨微环境稳态是破骨细胞及其主导的细胞网络共同活动的结果;从细胞网络出发,系统阐释破骨细胞与骨/关节疾病的内在关系,才能更好地理解疾病的本质。“破而后立”——是本课题组所提出通过调控破骨细胞来重建骨微环境稳态、以延缓骨/关节疾病进程的新理念。同时,将“破骨细胞”概念引入传统组织工程骨与软骨构筑技术,有望实现骨/软骨疾病干预和再生修复的综合应用。

硼替佐米对多发性骨髓瘤患者破骨细胞生成的影响及机制研究

目的:观察多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者破骨细胞在体外诱导分化成熟过程中,硼替佐米(Bortezomib,Btzmb)对其分化和功能的影响,以及破骨细胞分化过程中上游关键信号分子肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的改变。方法:患者外周血单个核细胞在经核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)及巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导后向破骨细胞分化过程中,采用不同剂量的Btzmb进行处理,观察抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrateresistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性的破骨细胞数量,检测培养液中的TRAP活性,并观察骨片上骨陷窝数量的变化。采用Western印迹和RT-PCR法,分析Btzmb对破骨前体细胞中TRAF6蛋白和mRNA的影响。结果:2.5和5 nmol/L Btzmb组破骨细胞数量分别为(157±21)和(98±15)个,较对照组(307±25)明显减少(P均<0.05),骨陷窝形成数量分别为对照组的(53±24)%和(29±7)%(P均<0.05),上清液中破骨细胞活性分别为对照组的(86±24)%和(60±25)%(P均<0.05)。破骨前体细胞经Btzmb处理后观察24 h,TRAF6蛋白活性逐渐降低,TRAF6 mRNA水平也有所下降。结论:Btzmb抑制MM患者破骨细胞的分化和功能,该作用可能与TRAF6有关。

CCR1参与肺癌分泌因子诱导破骨细胞生成

目的建立肺癌细胞与单核/巨噬细胞间接共培养模型,观察在肺癌细胞条件培养基作用下抑制前体破骨细胞(RAW264.7)的CCR1对破骨细胞生成的影响。方法收集肺癌细胞A549的条件培养基,将条件培养基以不同浓度加入RAW264.7培养基中共培养,在共培养体系中加或不加CCR1特异性拮抗剂BX471。细胞培养至第5天进行TRAP染色,提取不同条件作用后RAW264.7细胞的总RNA,采用Real-time PCR检测CCR1及破骨细胞标志基因cathepsin K、TRAP mRNA的表达,使用细胞免疫荧光和Western blot检测不同时期RAW264.7细胞中CCR1及Cathepsin K蛋白的表达量。结果加入A549细胞条件培养基的RAW264.7细胞TRAP阳性细胞显著增多,条件培养基明显上调RAW264.7的CCR1、Cathepsin K、TRAP的表达且呈浓度依赖,CCR1特异性拮抗剂BX471可抑制肺癌分泌因子对破骨细胞的活化。结论肺癌细胞分泌因子可促进破骨前体细胞向破骨细胞分化,CCR1参与了肺癌细胞分泌因子对破骨细胞的活化过程。

降钙素基因相关肽对鼠成骨细胞IGF-I及IGF-IR mRNA表达的影响

目的 :探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)对成骨细胞胰岛素样生长因子I(IGF -I)和胰岛素样生长因子I型受体(IGF IR)基因表达的影响。方法 :将体外培养的鼠成骨细胞用不同浓度的CGRP分别处理 8h和 2 4h ,通过半定量逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)来观察成骨细胞二种目的基因 (IGF I ,IGF IR)的mRNA表达强度变化。结果 :CGRP可以刺激成骨细胞IGF ImRNA表达 ,以 10 -8M作用 8h最为明显。CGRP亦能够上调成骨细胞IGF -IRmRNA表达 ,而且维持时间达 2 4h。结论 :CGRP通过增强IGF I的自分泌作用来间接地调节成骨细胞活性 ,从而发挥成骨效应。

血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体在急性胰腺炎中的测定及意义

目的:检测急性胰腺炎患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)及其受体(u—PAR)水平,并探讨了与胰腺Balthazar CT分级的关系. 方法:收集32例急性胰腺炎患者和32例正常对照组,采用ELISA法测定血浆u—PA和u—PAR,并对急性胰腺炎患者血浆u—PA和u—PAR与胰腺Balthazar CT分级进行Pearson相关分析. 结果:急性胰腺炎患者血浆u—PA和u—PAR水平明显高于正常对照组.血浆u—PA水平为1 290.66±484.28 ng/L,高于正常对照组1 034.63±267.55 ng/L(r=2.618,P=0.012); 血浆u—PAR水平为1 240.00±442.84 ng/L,高于正常对照组870.00±265.72 ng/L(t=4.053,P=0.000).经Pearson 相关分析,急性胰腺炎患者血u-PA与胰腺CT分级呈负相关(r=-0.433,P=n.013),血u—PAR与胰腺CT分级无关(r=0.274,P=0.129). 结论:血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体水平在急性胰腺炎患者中明显升高,其中血浆u-PA水平与胰腺Balthazar CT分级呈正相关.

体外培养破骨细胞TRAF6的表达

目的:观察体外培养破骨细胞过程中肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的表达,探讨其与破骨细胞功能的相关性。方法:应用1, 25(OH)2D3 体外诱导大鼠骨髓细胞形成破骨细胞,观察记录抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistantacidphosphatase, TRAP)阳性多核巨细胞的数目,并采用免疫组织化学的方法检测TRAF6的表达。结果:应用1, 25(OH)2D3 的实验组可见TRAF6的阳性表达,并随培养时间的延长发生表达强度的变化。结论:TRAF6可能参与了体外培养破骨细胞的成熟与分化。

尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体与胃癌关系的研究进展

尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)及其受体(uPAR)是纤溶系统的重要组成部分,主要通过激活纤溶酶降解细胞外基质,促进肿瘤的浸润与转移。此文就它们与胃癌之间的关系及在临床中的应用作一综述,旨在为胃癌的诊断和治疗提供新方法、开辟新途径。

TGF-β调节破骨细胞性骨吸收的研究进展

本文介绍了转化生长因子（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－βＴＧＦ－β）及其受体的一般特点，并且就ＴＧＦ－β对破骨细胞的形成、分化、破骨细胞性骨吸收及破骨细胞的趋化作用进行全面综述，同时也概述了破骨细胞合成、分泌及活化ＴＧＦ－β的作用。此外，分析了ＴＧＦ－β１及其Ⅱ型受体在骨巨细胞瘤中的表达和作用，就其中破骨细胞的来源进行了讨论。