重组人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(sTNFRⅡ)的纯化

目的 从大肠杆菌破碎液中纯化可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ,获得能够中和TNF活性的受体蛋白。方法 菌体破碎液经热沉淀处理后,用金属鳌合层析柱纯化重组蛋白。并对蛋白的理化特性和生物学活性进行分析。结果 纯化的重组蛋白纯度大于95％,并且能中和TNF的生物学活性,抑制其对细胞的杀伤作用。结论该工艺能简便有效地纯化出TNF受体蛋白,为进一步深入研究奠定了基础。

人可溶性TNF受体Ⅱ克隆、原核表达与活性鉴定

目的构建人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)原核基因表达载体,并在大肠埃希菌中高效表达之。方法采用RT-PCR技术,从人外周血的单核细胞中扩增出肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)基因的胞外区,将其克隆入pET28a(+)高效表达载体进行诱导表达,并对表达产物进行纯化及鉴定。结果在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,转入外源基因的大肠埃希菌BL21(DE3)可高效表达sTNFRⅡ蛋白,SDS-PAGE显示在32kD处有一特异表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的30%左右。纯化的sTNFRⅡ经Western blot鉴定具有生物学活性;生物活性实验(MTT法)显示它可有效地封闭分泌性肿瘤坏死因子α(sTNF-α)对L929细胞的胞毒效应;直接免疫荧光显示它可以特异性抑制GFP-sTNF-α与靶细胞肿瘤坏死因子受体的结合。结论通过基因工程技术获得了人sTNFRⅡ的重组蛋白。

血清可溶性白细胞介素2受体和可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ水平在判断肺结节病活动性中的应用

目的探讨血清可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）和可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ（sTNFRⅡ）水平在判断肺结节病活动性中的应用价值。方法52例经病理确诊的肺结节病患者中，活动期28例，非活动期24例。用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测其外周血血清中sIL-2R、sTNFRⅡ，用紫外分光光度法测定血管紧张素转换酶（ACE）的水平，并与30例健康志愿者（对照组）对比。结果活动期肺结节病患者血清中sIL-2R、sTNFRⅡ水平分别为（1．3±0．6）、（0．95±0．29）μg／L，明显高于对照组、非活动期肺结节病组[分别为（0．9±0．4）、（0．71±0．21）μg／L及（0．9±0．4）、（0．77±0．32）μg／L]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；对照组与非活动期肺结节病组患者血清中sIL-2R、sTNFRⅡ水平差异无统计学意义（P〉0．05）。活动期肺结节病患者血清中ACE与sIL-2R水平呈正相关（r=0．869，P〈0．01），与sTNFRⅡ水平无相关性（r=0．103，P〉0．05）。结论血清中sIL-2R及sTNFRⅡ可能作为评价肺结节病活动性的指标，以指导临床治疗。

慢性乙型肝炎患者血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体及一氧化氮含量与肝组织炎症活动度的关系

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中可溶性白细胞介素Ⅱ受体(sIL-2R)、一氧化氮(NO)含量与肝组织炎症活动度(G)的相关性。方法:应用硝酸还原酶法和酶免疫法分别检测71例慢性乙型肝炎、21例急性肝炎及29例正常人血清中sIL-2R和NO的含量,并作肝组织活检。结果:慢性乙型肝炎组两者的含量显著高于急性肝炎组及正常人,且肝组织炎症活动度越高,其含量也越高,两两比较,差异有统计学意义。炎症活动度与sIL-2R和NO密切相关。结论:CHB患者免疫机能低下,sIL-2R及NO均参与炎症活动的过程,并可作为预后判断的指标。

血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体水平对乳癌患者治疗及预后的临床意义

目的 :探讨血清中可溶性白细胞介素 受体 (SIL - 2 R)与乳癌诊断、病情分析及疗效评价的关系。方法 :应用酶联免疫法 (双抗体夹心法 )对乳癌患者及正常人血清中可溶性白细胞介素 受体 (SIL - 2 R)进行测定。结果 :乳癌患者 SIL - 2 R水平显著高于正常人 (P<0 .0 0 1) ,乳癌患者手术后血清 SIL - 2 R水平较治疗前显著降低 (P<0 .0 1) ,乳癌转移患者治疗前 SIL - 2 R显著高于无转移患者 (P<0 .0 0 1) ,乳癌患者化疗三周再行手术 ,血清 SIL - 2 R水平较单独手术治疗显著降低 (P<0 .0 5 )。三年随访发现 ,乳癌患者中治疗前 SIL - 2 R水平 10 0 0 u/ ml以上的病人 ,术前化疗组三年生存率明显高于单纯手术组 ,二者比较差异显著 (P<0 .0 1)。结论 :此项研究对乳癌诊断、病情分析。

两种治疗方法对乳癌患者血清可溶性白介素Ⅱ受体水平的比较研究

目的 探讨乳癌患者单纯手术和化疗再手术后血清可溶性白介素Ⅱ受体水平对预后的临床意义。方法 采用双抗体酶联免疫吸附法对 5 0例正常人、5 0例乳癌单纯手术患者与 68例乳癌化疗再手术患者血清可溶性白介素Ⅱ (SIL 2R)水平进行了测定。结果 乳癌患者血清SIL 2R显著高于正常人 (P <0 .0 1) ,单纯手术后和化疗 3周再手术后患者血清SIL 2R水平分别为 ( 5 2 6.5 2± 2 45 .77)U/ml与( 4 3 2 .14± 167.3 6)U/ml。两种治疗方法差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 提示乳癌患者化疗后再手术切除对预后有十分重要的意义。

可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ在慢性心功能不全患者中的变化

目的:观察慢性充血性心力衰竭患者血清可溶性坏死因子受体II(sTNFR II)的改变与临床意义。方法:sTNFR II采用酶联免疫双抗体夹心法测定。结果:对照组(n=30)sTNFR II为2.59±0.58μg/L,实验组(n=30)sTNFR II为8.62±5.32μg/L,两组间有极显著差异(P<0.01)。实验组的轻度组(n=12)sTNFR II为5.3l±1.54μg/L,重度组(n=18)sTN-FR II为10.87±5.78μg/L,两组间有极显著差异(P<0.01)。对照组与实验组的心力衰竭轻、重组间有极显著差异(P<0.01),TNF的变化与病情呈正相关,相关程度较高(r=0.5,P<0.01)。结论:心力衰竭患者血清sTNFR II值升高,并与心力衰竭的严重程度相关。sTNFR II可以作为判断心力衰竭严重程度的指标之一。

血清可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ在子宫内膜异位症患者中的检测意义

子宫内膜异位症是常见的妇科疾病种类之一，虽然对中内膜异位症的研究不断深入，但其发病机制尚未明确。目前研究表明，有免疫因子参与子宫内膜异位症的发生和发作，如肿瘤坏死因子-α与子宫内膜异位症的关系密切，而肿瘤坏死因子-α发挥其相关作用是通过与其相应受体结合后产生的。本文观察可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ在子宫内膜异位症中其水平改变情况。现报告如下。

乳癌患者可溶性白细胞介素Ⅱ受体的相关研究

目的 探讨血清中可溶性白细胞介素Ⅱ受体 (SIL - 2R)与乳癌诊断、病情分析及疗效评价的关系。方法 应用双抗体夹心法对乳癌患者及正常人血清中可溶性白细胞介素Ⅱ受体 (SIL - 2R)进行测定。结果 乳癌患者SIL - 2R显著高于正常人 (P <0 0 0 1) ,乳癌患者手术后血清SIL - 2R较治疗前显著降低 (P <0 0 1) ,乳癌患者化疗三周再行手术 ,血清中SIL - 2R水平较单独手术治疗显著降低 (P <0 0 5 ) ,乳癌转移患者治疗前SIL - 2R显著高于无转移患者 (P <0 0 0 1)。结论 检测乳癌患者SIL - 2R水平 ,在乳癌诊断、病情分析及疗效评价等方面有重要的临床意义。

肾移植受者血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体检测的意义

本文采用 ELISA 法对39例肾移植病人血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体(sIL-2R)进行了检测。结果表明,7例急性排异反应和5例感染病人血清 sIL-2R 水平明显高于肾功能稳定组和环孢素肾中毒组。7例排异反应病人中5例经抗排异治疗后逆转,血清 sIL-2R 逐渐降至排异前水平。排异反应时血清 sIL-2R 升高较血清肌酐升高平均提前1.5天。因此,血清 sTL-2R 是诊断和预测肾移植排异反应的有用指标,有助于鉴别排异反应和环孢素肾中毒。

肺心病急性期免疫球蛋白、血清可溶性白介素Ⅱ受体研究

为研究肺心病急性期患者免疫功能失调原因,测定肺心病急性期患者血清可溶性白介素Ⅱ受体(Soluable Interleukin—2 receptor,SIL—2R)及免疫球蛋白IgA、IgG、IgM,结果报告如下。

人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ与IgG Fc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母菌中的表达及产物分析

目的:在乳酸克鲁维酵母中表达人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)与IgG Fc的融合蛋白。方法:首先获得sTNFRⅡ-IgGFc融合基因片段,然后构建至乳酸克鲁维酵母表达载体pKLAC1中,获得sTNFRⅡ-IgGFc的表达载体,并将其电转化乳酸克鲁维酵母(Δura3),通过ELISA方法筛选高表达sTNFRⅡ-IgGFc融合蛋白的重组乳酸克鲁维酵母菌株,采用还原和非还原SDS-PAGE分析融合蛋白是否形成二聚体结构,Western印迹验证sTNFRⅡ-IgGFc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母(Δura3)中的表达。结果:构建了sTNFRⅡ-IgGFc表达载体pKLAC1-sTNFRⅡ-IgGFc,获得了表达sTNFRⅡ-IgGFc的乳酸克鲁维酵母菌株,SDS-PAGE和Western印迹表明该融合蛋白能自发形成类似于抗体的二聚体结构。结论:实现了sTNFRⅡ-IgGFc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母(Δura3)中的表达。

肝硬变患者血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体测定

作者用酶免疫法检测了３１例肝炎后肝硬变患者血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体（ＳＩＬ─２Ｒ）水平，并与３０例正常人进行了比较，结果显示：肝硬变患者血清ＳＩＬ─２Ｒ含量较正常人明显升高（Ｐ＜０．００１），提示淋巴细胞在肝炎后肝硬变患者的发病过程中有非常重要的作用。在肝炎后肝硬变患者存在着淋巴细胞激活状态检测血清ＳＩＬ─２Ｒ对肝炎后肝硬变的活动观察，对治疗的反应及预后估计是一个有用的指标。

西咪替丁对肾综合征出血热NK细胞及可溶性白细胞介素II受体的影响

为了探讨西咪替丁 (CMD)对肾综合征出血热 (HFRS)NK细胞及可溶性白细胞介素受体的影响 ,采用流式细胞分析仪检测NK细胞活性 ,可溶性白细胞介素II受体 (SIL -2R)采用夹心酶联免疫吸附法。结果是NK活性及SIL -2R治疗前CMD组与对照组差异无显著性 ;治疗 6d后 ,CMD组及对照组NK活性分别是 (5 9.2 77± 19.819)、(4 1.5 49±15 .40 9)CMD组NK活性明显升高 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。CMD组及对照组SIL -2R分别是 (2 96.4±48.5 )、(4 0 8.6± 69.1) ,CMD组SIL -2R活性明显降低 ,而对照组略有升高 ,CMD抑制SIL -2R活性 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。这表明 ,CMD治疗HFRS的抗病毒作用是通过抑制SIL -2R活性 ,增强NK细胞活性。

子痫前期患者血清CTRP6、sTNFR-Ⅱ水平及其诊断价值

目的:探究子痫前期(PE)患者血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)、可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)-Ⅱ水平及其诊断价值。方法:选取2021年6月-2022年6月在本院确诊为PE的患者148例临床资料为PE组,根据病情程度分为轻度PE组(85例)和重度PE组(63例),常规产前检查健康孕妇75例为对照组。酶联免疫吸附测定法测定各组血清CTRP6、sTNFR-Ⅱ水平;Pearson法分析PE患者血清CTRP6、sTNFR-Ⅱ的相关性;受试者工作特征曲线(ROC)分析CTRP6、sTNFR-Ⅱ对PE发生发展的诊断价值。结果:重度PE组、轻度PE组、对照组尿蛋白定量、ALT、Fib、Cr、收缩压、舒张压水平依次降低,PT值依次增加,血清CTRP6、sTNFR-Ⅱ水平依次降低(均P<0.05)。相关性分析,PE患者血清CTRP6与sTNFR-Ⅱ的表达呈正相关(r=0.354,P<0.001)。ROC曲线分析,CTRP6与sTNFR-Ⅱ联合诊断PE发生的曲线下面积(AUC)(0.975)高于CTRP6、sTNFR-Ⅱ单独诊断,其敏感度、特异性分别为79.7%和92.3%;诊断重度PE的AUC为0.925,敏感度、特异性分别为39.7%和98.8%,高于CTRP6和sTNFR-Ⅱ单独诊断(均P<0.001)。结论:PE患者血清CTRP6、sTNFR-Ⅱ水平异常升高,二者与疾病严重程度有关,且联合诊断可提高PE的诊断效能。

肾癌患者外周血sTNFR-Ⅱ、sCD163预测切缘阳性的价值

目的:分析肾癌患者外周血可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFR-Ⅱ)、可溶性CD163(sCD163)预测切缘阳性的价值。方法:选取我院肾癌患者324例,同期健康体检者108例。Logistic回归分析患者术后切缘阳性的影响因素,应用相加模型评估血清sTNFR-Ⅱ、sCD163对肾癌患者术后切缘阳性的交互作用,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sTNFR-Ⅱ、sCD163预测肾癌患者术后切缘阳性的价值。结果:肾癌患者血清sTNFR-Ⅱ、sCD163水平高于健康体检者(P<0.05);324例患者术后切缘阳性37例,切缘阴性287例,切缘阳性率为11.42%;血清sTNFR-Ⅱ、sCD163水平是肾癌患者术后切缘阳性的影响因素(P<0.05);血清sTNFR-Ⅱ、sCD163对患者术后切缘阳性存在协同作用,协同效应为二者单独存在产生效应之和的1.375倍(协同指数=1.375);血清sTNFR-Ⅱ水平>A、sCD163水平>B时肾癌患者术后切缘阳性风险较高,其AUC值分别为0.739、0.826,二者联合检测的AUC值为0.860。结论:肾癌患者血清sTNFR-Ⅱ、sCD163水平明显升高,二者对肾癌患者术后切缘阳性存在协同作用,其中血清sTNFR-Ⅱ>3.26μg·L^(-1)、sCD163>66.90 mg·ml-1时提示患者术后切缘阳性风险较高。

类风湿性关节炎(RA)湿热阻络证与三种可溶性细胞因子受体关系的探讨

目的:探讨RA湿热阻络证患者与三种可溶性细胞因子受体(sCKR)之间的关系。方法:用ELISA方法检测了31例RA患者治疗前后三种sCKR的水平。结果:在31例RA湿热阻络证患者中发现三种可溶性细胞因子受体(sIL-2R、sIL-6R、sTNFR_I)均显著升高(P<0.01),治疗后均显著下降(P<0.01)。在本证型中又观察了活动期12例、非活动期19例、活动期和非活动期上三项指标治疗后均显著下降,在活动期与非活动期治疗前与前,治疗后与后的比较中发现活动期sIL-2R、sIL-6R均显著高于非活动期,而非活动期的sTNFR_I治疗后仍显著高于活动期治疗后的水平。结论:以上三种可溶性细胞因子受体均参与了RA湿热阻络证的病理发展过程。