免疫印迹法检测可提取核抗原多肽抗体谱的临床应用分析

目的 探讨临床应用免疫印迹法 (IBT)检测可提取核抗原 (ENA)多肽抗体谱中出现的常见问题和解决措施。方法 于 98年和 99年相继 3次对上海部分大中型医院相关实验室进行IBT法抗ENA抗体检测的血清交流和测定 (主要为抗Sm、抗U1RNP、抗SS A/Ro、抗SS B/La、抗核糖体P蛋白等 5种自身抗体 ) ,归纳和分析存在的主要问题。结果 1.因缺乏对风湿病自身抗体谱以及IBT技术的了解 ,常导致对抗Sm、抗SS A/Ro、抗U1RNP等抗体的判断有误 ;2 .对国际上尚未公认的IBT法“自身抗体”显色区带不宜出具检验报告。 3.通过交流 ,有关实验室的检测水平得到逐步提高。结论 为保障临床IBT法抗ENA抗体检测质量 ,需对该项目有较全面的了解 ,并有必要建立培训。

ENA多肽抗体免疫功能检测在自身免疫性疾病诊断中的应用价值

目的探讨可溶性核抗原(ENA)多肽抗体免疫功能检测在自身免疫性疾病(AID)中的应用价值.方法198例AID患者,其中系统性红斑狼疮(SLE)99例,类风湿关节炎(RA)45例,干燥综合征(SS)24例,混合性结缔组织病(MCTD)12例,系统性硬化症(PSS)8例,自身免疫性肝炎(AIH)6例,特发性血小板减少性紫癜(ITP)4例.另选取40例健康体检者作为对照组,均进行ENA多肽抗体免疫功能检测.观察不同类型AID患者及对照组不同抗原IgG类抗体的免疫功能检测结果.结果SLE患者的抗核小体抗体(抗NKS)阳性检出率为96.97%(96/99),RA患者的抗组蛋白抗体(抗His)阳性检出率为46.67%(21/45),SS患者的抗干燥综合征A抗体(抗SS-A)阳性检出率为66.67%(16/24),MCTD患者的抗SS-A阳性检出率为58.33%(7/12),PSS患者的抗硬皮病抗原70抗体(抗Scl-70)阳性检出率为62.50%(5/8),AIH患者的抗SS-A阳性检出率为50.00%(3/6),ITP患者的抗Scl-70阳性检出率为75.00%(3/4).结论ENA多肽抗体免疫功能检测可以作为AID的重要筛查手段,尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗体的应用敏感度更高.

ENA多肽抗体检测分析

目的 比较两种检测可溶性核抗原 (ENA)多肽抗体方法的敏感性和特异性 ,正确认识ENA抗体。方法 用免疫印迹法 (IBT法 )和免疫双扩散法 (ID)检测 13 3例结缔组织病和 413例非结缔组织病患者血清中的ENA抗体。结果 13 3例结缔组织病患者 ,IBT法检测抗Sm、抗u1RNP、抗SSA、抗SSB的敏感性均高于ID法 ,但由于IBT法抗原制作过程中某些技术性原因 ,造成IBT法不可避免的假阴性和假阳性。结论 IBT法检测ENA抗体敏感性高于ID法。IBT法和ID法在临床抗ENA抗体的检测中可以互相验证和补充 ,二者相结合可显著提高检出率。

自身抗体检测对自身免疫性肝炎的诊断研究

目的 检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体抗体(LKM)、抗可溶性肝抗原抗体(SLA)、抗肝细胞膜抗体(LMA)、抗线粒体抗体(AMA)，来探讨自身抗体检测对诊断自身免疫性肝炎的临床意义。方法 应用ELISA方法筛选出肝炎病毒血清标志物阴性而谷丙转氨酶异常升高的病人血清。应用间接免疫荧光法检测自身抗体。结果38份血清中有9例存在一项或一项以上的自身抗体，其中ANA阳性5例，SMA阳性4例，LKM阳性4例，SLA阳性1例，LMA阳性2例，抗线粒体抗体阳性2例。结果 全为阴性的血清标本29例；而对照组健康人只有1例ANA呈阳性。结论 自身免疫性肝炎是一组以存在自身抗体为特点的肝损害疾病，通过检测自身抗体可对一部分AIH病人进行确诊。

ENA多肽抗体谱试剂检测自身抗体

ENA多肽抗体谱所包括的七种自身抗体(Sm,RNP,SSA,SSB,Rib,Scl-70和Jo-1抗体)存在于不同的自身免疫疾病中。有的抗体仅见于某一疾病,有的抗体虽可见于多种疾病,但在不同疾病中的阳性率有明显差异。识别可提取核抗原(ENA)是近年来抗核抗体(ANA)研究的一项重大进展。我们采用ENA多肽抗体谱试剂盒检测了不同自身免疫病患者血清中七种自身抗体,结果报告如下。

ENA多肽抗体检测临床意义的初步探讨

风湿性疾病病患者血清中存在各种自身抗体，已作为疾病的血清标记性抗体广泛用于临床诊断。应用免疫印迹技术（ＩＢＴ）以兔胸腺可提取核抗原（ｅｘｔｒａｃｔａｂｉｅｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎＥＮＡ）为抗原，建立在一条硝酸纤维薄膜上检测包括系统性红斑狼疮相关抗体（抗Ｓｍ），抗核糖多肽抗体（抗Ｒｉｂ）细胞核核糖蛋白抗体（ＲＮＰ）干燥综合征相关抗体（抗ＳＳＡ）。

免疫印迹法检测抗ENA抗体结果分析

抗ENA抗体是针对核内可提取性核抗原（eX—tractable nuclear antiger，ENA）的一种自身抗体。不同的自身免疫性疾病其抗ENA抗体阳性率有明显差异，有的特异性很高。本组对疑为自身免疫性疾病、风湿病患者采用免疫印迹法（IBT）检测抗ENA多肽抗体。