可溶性胶原蛋白含量、肌原纤维小片化指数和粗钙激活因子活性的测定及其与牛肉嫩化效果之间的关系研究

本试验采用宰后向牛的股二头肌注射CaCl2溶液和木瓜蛋白酶来嫩化牛肉,并于后熟24h左右进行了肌原纤维小片化指数(MFI)、粗钙激活因子活性(CAF)和可溶性胶原蛋白含量等指标的测定。实验结果表明,宰后注射CaCl2溶液和木瓜蛋白酶,显著降低了股二头肌的剪切力。注射3%CaCl2溶液导致CAF活性比对照组显著增强。试样的可溶性胶原蛋白含量与剪切力相关性显著(r=-0.96)。对照组MFI与相应的剪切力相关显著(r=-0.736)。因此,MFI可作为衡量常规方法后熟或注射CaCl2牛肉的嫩度的方法。对于采用注射植物蛋白酶嫩化的牛肉,测量其可溶性胶原蛋白含量对于预测嫩度具有重要意义。而CAF活性的测定则可衡量常规方法后熟或注射CaCl2溶液的牛肉后熟的程度及其嫩度。

人源型可溶性胶原的研制

目的 寻找人面部或体表软组织病变或缺损造成凹陷的填充和修复材料。方法 从胎盘中提纯可溶化性胶原 ,并经动物实验进行观察。结果 在动物皮内可较长期存在而不改变形态 ,且未检出相应抗体 ,也未引起过敏反应 ,组织形态学观察未见明显异常。结论 此胶原制剂是一种安全。

可溶性胶原蛋白含量、MFI、CAF与牛肉嫩化的关系

宰后向牛的股二头肌注射 Ca Cl2 和木瓜蛋白酶 ( Papain)来嫩化牛肉 ,并于后熟2 4 h左右进行了肌原纤维小片化指数 ( MFI)、粗钙激活因子活性 ( CAF)和可溶性胶原蛋白含量等指标的测定。实验结果表明 ,这些指标对于衡量牛肉嫩度 。

基于可溶性胶原的牙周缓释剂体外抑菌对照实验研究

目的:研究可溶性胶原作为缓释材料的牙周缓释剂对4种牙周致病菌的抑菌作用,为研制安全有效的牙周缓释剂提供实验基础。方法:制备可溶性胶原二甲胺四环素、环丙沙星缓释剂,并将药物等比稀释至10个浓度。测量缓释剂对牙龈卟啉单胞菌、中间型普氏菌、具核梭杆菌、粘性放线菌的最低抑菌浓度(MIC),用钢管法测量缓释剂的抑菌环直径。结果:环丙沙星组对4种菌株的最低抑菌浓度小于0.009mg/mL,二甲胺四环素组对4种菌株的最低抑菌浓度小于0.003mg/mL,且在药物浓度较低时(<0.009mg/mL),胶原浓度相同(2%)的环丙沙星组和二甲胺四环素组相比,二甲胺四环素组对4种牙周致病菌的抑菌能力普遍要高于环丙沙星组。对于牙龈卟啉单胞菌,药物浓度小于0.781mg/mL时,可溶性胶原缓释剂组的抑菌能力高于盐酸米诺环素软膏(派丽奥)(P<0.05)。对于中间型普氏菌,当药物浓度大于2.344 mg/mL时,胶原浓度为3.5%的二甲胺四环素组抑菌作用最强,且在药物浓度逐渐降低后(<0.086mg/mL),盐酸米诺环素组的抑菌能力低于可溶性胶原二甲胺四环素组(P<0.05)。对于具核梭杆菌和粘性放线菌,也出现了在药物浓度较低时(<0.009mg/mL),可溶性胶原二甲胺四环素组的抑菌作用要高于盐酸米诺环素组(P<0.05)的现象。结论:可溶性胶原二甲胺四环素组具有比可溶性胶原环丙沙星组更强的抑菌作用。可溶性胶原缓释剂具有良好的抑菌作用,且在药物浓度降低时,可溶性胶原良好的缓释作用保证了牙周缓释剂稳定的抑菌效能。

可溶性胶原牙周缓释剂治疗兔牙周炎的实验研究

目的研究可溶性胶原缓释剂在兔体内对牙周炎的治疗效果。方法将可溶性胶原缓释剂和派丽奥注射至兔颊黏膜内,分别在1周和2周时取兔颊黏膜组织,观察组织学切片,比较两组药物在兔体内的吸收和降解情况。将20只新西兰白兔随机分为4组,分为正常组(阴性对照组)、牙周炎组(阳性对照组)、实验组(可溶性胶原缓释剂组)和对照组(派丽奥组),建立兔牙周炎模型,将药物置于兔牙周袋内,分别在1周、2周和4周后检查临床牙周指标:牙龈探诊出血(BOP)和牙周探诊深度(PD)。结果1周后可溶性胶原缓释剂组中有血管长入,2周后可溶性胶原缓释剂基本被胶原纤维替代。1周后实验组的BOP以及实验组和对照组的PD和牙周炎组相比,差异无统计学意义;2周后实验组和对照组的BOP和PD均优于牙周炎组,差异有统计学意义(P<0.05);4周后实验组和对照组的BOP和PD均优于牙周炎组,差异有统计学意义(P<0.05),但实验组和对照组之间的差异无统计学意义。结论相同的时间内,可溶性胶原缓释剂较派丽奥有更强的组织修复作用,在体内的降解程度较派丽奥组更加完全;可溶性胶原缓释剂对兔牙周炎有较好的治疗作用。

古骨可溶性胶原蛋白的提取及其重建古食谱的可行性分析

当前在古食谱研究中,胶原蛋白（不可溶性）的提取,主要采用明胶化法.然而,胶原蛋白的直接降解产物——可溶性胶原蛋白,常常予以忽视并摒弃.本文通过凝胶层析,分管提取了古骨的酸提取液,从中分辨出三个峰,对各峰提取物的C和N含量,C/N摩尔比值及稳定同位素比值进行分析,并与对应的不可溶胶原蛋白（ISC）进行了比较,以探讨可溶性胶原蛋白（SC）在古食谱研究中的可行性.三个峰中,第二峰（保留时间在17.5~27.5 min）峰形最为平缓,表明其所含蛋白质的分子量不一致;其各管提取物,在C和N含量,C/N摩尔比值上与ISC最为接近.基于以上发现,可以看出,第二峰提取物即为SC.更为重要的是,两种蛋白的δ13C值和δ15N值均相近.具体而言,C/N摩尔比值落于正常范围的SC,与对应的ISC相比,δ13C差异的平均值仅为（0.3±0.2）‰（N=2）,δ15N值大约相差（0.6±0.1）‰（N=2）;而C/N摩尔比值稍高于正常范围的SC,与对应的ISC相比,δ13C差的平均值也仅为（0.4±0.1）‰（N=2）,δ15N值也约相差（0.3±0）‰（N=2）.这些差异,远低于δ13C和δ15N值在食物链营养级之间的差异（δ13C约为1‰~1.5‰,δ15N值约为3‰~5‰）,表明SC与ISC具有相似的性质,其C和N稳定同位素分析,在古食谱研究中极具应用价值.

古骨中可溶性、不可溶性胶原蛋白的氨基酸组成和C、N稳定同位素比较分析

提取考古遗址出土的人和动物骨中的不可溶性胶原蛋白(ISC),进行C、N稳定同位素分析,是目前古食谱分析的主要研究方法。然而,对于无法提取出ISC的骨样,古食谱的重建也就无从谈起。之前,我们通过凝胶层析法,首次成功提取出古骨中ISC的降解产物——可溶性胶原蛋白(SC),并发现:SC与ISC的C、N稳定同位素比值相似,同样可以应用于古食谱研究。为进一步探明两者稳定同位素相似的机理,本文选取更多的古骨样品,开展了SC和ISC的元素含量、稳定同位素值和氨基酸组成分析。研究结果表明,SC与ISC的总氨基酸组成,完全符合I型胶原蛋白的特点。此外,SC与ISC相比,8种必需氨基酸组成,非常接近,变异范围仅为0.25%(n=3);而11种半必需氨基酸和非必需氨基酸,则变化稍大(0.90%,n=3)。显然,不同性质氨基酸含量的少许差异,是造成两种蛋白C、N稳定同位素相似但不相同的主要原因。

麦门冬汤对特发性肺间质纤维化小鼠肺组织PPARγ表达和可溶性胶原蛋白含量的影响

目的探讨麦门冬汤治疗特发性肺间质纤维化的可能作用机制。方法BABL/c小鼠随机分为模型组、实验组和对照组,每组15只。模型组和实验组小鼠分别在气管内连续5次滴注博来霉素40 mg/kg,每2天1次,建构特发性肺间质纤维化小鼠模型。实验组滴注博来霉素48 h后采用麦门冬汤(浓度为0.6 g/ml)混悬液按照2 ml/200 g灌胃,模型组和对照组以等容积生理盐水灌胃,均每日1次,灌胃2周。干预后检测各组小鼠肺功能[包括吸气峰流速(PIF)、呼气峰流量(PEF)及每分钟通气量(MV)]、肺组织可溶性胶原蛋白含量及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠PIF、PEF及MV均显著下降,肺组织中PPARγmRNA及蛋白表达水平均降低,可溶性胶原蛋白显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,实验组小鼠PIF、PEF及MV均显著升高,肺组织中PPARγmRNA及蛋白表达水平升高,可溶性蛋白显著降低(P<0.05)。结论麦门冬汤可能通过升高肺组织中PPARγ表达,降低可溶性胶原蛋白含量,从而改善特发性肺间质纤维化小鼠肺功能。

可溶性鸡Ⅱ型胶原对大鼠胶原性关节炎的免疫治疗作用

目的 考察可溶性鸡Ⅱ型胶原 (SCCⅡ )对大鼠胶原性关节炎 (CIA)的免疫治疗作用及机制。方法 检测CIA大鼠血清抗Ⅱ型胶原 (CⅡ )抗体、腹腔巨噬细胞 (PMΦ)与滑膜细胞产生白介素 1(IL 1)和肿瘤坏死因子α(TNFα)和SCCⅡ /刀豆球蛋白A(ConA)诱导 5个部位淋巴细胞的增殖反应 ,同时测量继发炎症反应和免疫器官系数。结果 ig 0 .0 3,0 .3和 3.0mg·kg- 1·d- 1SCCⅡ (d 14～ 2 2 ) ,明显减轻患鼠继发炎症 ,抑制针对SCCⅡ的皮肤迟发型超敏反应和PMΦ,滑膜细胞超常分泌IL 1和TNFα ,促进体重和免疫器官系数恢复 ,提升低下的淋巴细胞ConA反应 ,但不能降低血清抗CⅡ抗体水平 ,5个部位的淋巴细胞对SCCⅡ体外刺激也几无反应性。结论 SCCⅡ通过T细胞免疫耐受途径对大鼠CIA产生治疗作用。

可溶性鸡Ⅱ型胶原对关节炎大鼠的免疫治疗作用

目的 :考察口服小剂量可溶性鸡Ⅱ型胶原(SCCⅡ )对大鼠佐剂性关节炎 (AA)的免疫治疗作用。方法 :检测脾细胞、肠系膜淋巴结细胞 (MLNCs)和肠派伊尔结细胞 (PPCs)的ConA增殖反应、腹腔巨噬细胞 (PMΦ)和滑膜细胞 (SMCs)产生IL 1和TNFα水平 ,结合观察踝关节继发炎症、胸腺指数等指标变化。结果 :SCCⅡ (0 .0 3、0 .30和 3.0 0mg·kg- 1·d- 1,ig)治疗 (d 1 2～1 8) ,能提升患鼠脾细胞低下的ConA增殖反应 ,进一步抑制MLNCs和PPCs低下的ConA增殖反应 ,显著抑制PMΦ和SMCs产生IL 1和TNFα,明显减轻大鼠AA的炎症反应。结论

IL-10与可溶性鸡Ⅱ型胶原对实验性关节炎的联合治疗作用

目的 :考察重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对可溶性鸡Ⅱ型胶原 (SCCⅡ )治疗大鼠佐剂性关节炎(AA)疗效的影响。方法 :通过测量足肿胀度、体重、胸腺与脾脏系数 ,观察不同部位淋巴细胞ConA增殖反应并检测腹腔巨噬细胞 (PMΦ)与滑膜组织细胞(SMCs)产生IL 1的水平。结果 :与SCCⅡ(0 .0 3mg·kg-1·d-1,ig)或IL 10 (1,2 μg·d-1,sc)单独治疗比较 ,二者联合治疗大鼠AA ,明显改善上述观察指标 ,同时使SCCⅡ的口服耐受诱导期缩短 ,增强了治疗效果。结论 :IL 10能提高SCCⅡ治疗大鼠AA的治疗效果。

可溶性鸡Ⅱ型胶原分散组合物延缓骨关节炎大鼠关节软骨形态学的变化:不同口服剂量及赋形剂比较(英文)

背景:可溶性鸡Ⅱ型胶原分散组合物(soluble dispersal mixture of chicken collagen typeⅡ,SmCC Ⅱ)治疗类风湿性关节炎安全有效,骨关节炎与类风湿性关节炎在免疫发病机制及软骨退变方面有许多类似之处,其是否有延缓骨关节炎软骨退变的作用有待研究。目的:观察国产SmCCⅡ对大鼠骨关节炎的防治效果并分析关节软骨中基质金属蛋白酶与组织蛋白酶等水平的变化。设计:随机对照观察。单位:上海交通大学附属第六人民医院临床药学研究室。材料:选用258只6周龄Wistar大鼠,清洁级,雌雄各半,SmCCⅡ(白色粉末)由上海本草生物医学工程研究所任庚夫教授惠赠,使用前配成CCII有效成分分别为20mg/L与80mg/L溶液,批号:00031004。赋形剂:甘露醇(江苏天元医药股份有限公司),灌胃前用无菌生理盐水将200g/L甘露醇溶液稀释成0.25%的溶液。方法:实验于2003-03/2006-02在上海交通大学附属第六人民医院整体动物实验室及实验中心完成,①预防性实验:取132只大鼠摸球法随机分为5组:模型组(n=36):无菌生理盐水灌胃,1mL/d;SmCCⅡ低剂量组(n=24)与高剂量组(n=24):分别用20mg/L与80mg/LSmCCⅡ1mL灌胃;赋形剂组(n=24):2.5g/L甘露醇灌胃,1mL/d;以上4组均采用Hulth氏手术法稍做改良诱导大鼠骨关节炎模型。正常组(n=24):大鼠不造模,但给予无菌生理盐水灌胃,1mL/d,各组均在造模当天开始给药。②治疗性实验:取126只大鼠分为5组,除模型组动物数目为30只外,其余各组分组方式、组内大鼠数目和干预措施同预防性实验。但药物干预时间在术后6周。药物干预持续时间均为8周,所有大鼠在完成治疗1周后取下大鼠右后肢膝关节,将标本沿冠状面切开备用。③采用苏木精-伊红染色观察关节软骨形态学变化并计算Mankin积分评估关节炎严重程度;采用免疫组化染色法(ABC法)原位测定关节软骨中基质金属蛋白酶-13,基质金属蛋白酶-9及组织蛋白酶K阳性软骨细胞百分比;用半定量RT-PCR法测定大鼠关节软骨组织中基质金属蛋白酶-13、基质金属蛋白酶-9、CathK及基质基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的mRNA水平。主要观察指标:①两实验中各组大鼠关节软骨形态学改变。②各组大鼠关节软骨基质金属蛋白酶-13,基质金属蛋白酶-9及组织蛋白酶K水平及相应mRNA水平。结果:纳入大鼠258只均进入结果分析。①预防性实验:模型组大鼠关节软骨出现明显退行性变,Mankin积分高于SmCCⅡ高、低剂量组[(6.44±0.81),(2.75±0.85),(2.70±0.81)分,P<0.05],关节软骨中基质金属蛋白酶-13、基质金属蛋白酶-9、组织蛋白酶K阳性软骨细胞百分比及mRNA其均高于SmCCⅡ高、低剂量组(P<0.05～0.01),蛋白酶组织抑制剂-1mRNA与SmCCⅡ高、低剂量组差异不显著(P>0.05)。赋形剂组大鼠关节软骨基质金属蛋白酶-13、基质金属蛋白酶-9、CathK水平与模型组差异不显著(P>0.05)。①治疗性实验:模型组大鼠Mankin积分高于SmCCⅡ高、低剂量组[(6.96±1.02),(3.08±0.45),(4.00±0.94)分,P<0.05～0.01],关节软骨中基质金属蛋白酶-13、基质金属蛋白酶-9、组织蛋白酶K阳性软骨细胞百分比及其mRNA均高于SmCCⅡ高、低剂量组mRNA(P<0.05～0.01),蛋白酶组织抑制剂-1mRNA与SmCCⅡ高、低剂量组差异不显著(P>0.05)。结论:SmCCⅡ能缓解大鼠骨关节炎关节软骨的退行性变,对骨关节炎防治有效,其作用机制可能与其在转录水平降低基质金属蛋白酶-13、基质金属蛋白酶-9及组织蛋白酶K的合成有关。

赢创推出面向医疗器械行业的商业化非动物源胶原蛋白平台Vecollan

赢创重组非动物源胶原蛋白平台正式商业化上市。Vecollan是一种通过发酵工艺制备的高纯度可溶性胶原蛋白,其特有的三螺旋结构模拟天然胶原蛋白的特性,适用于医疗、制药、细胞培养、组织工程及其他生命科学领域的应用。Vecollan是赢创专为医疗器械行业打造的全新差异化系统解决方案,并通过美国阿拉巴马州伯明翰、德国达姆施塔特与中国上海的赢创医疗器械技术中心为客户提供应用、研发及制造服务方面的支持。

可溶性Ⅰ型胶原蛋白对移植肝细胞凋亡的抑制作用

目的 研究可溶性Ⅰ型胶原蛋白对自体移植肝细胞凋亡的抑制作用及相关机制。方法 建立自体肝细胞脾内移植大鼠模型 ,按肝细胞处理的不同分为肝细胞悬液不处理组 (A组 )、拮抗型抗整合素 β1单克隆抗体及Ⅰ型胶原蛋白处理组 (B组 )以及Ⅰ型胶原蛋白处理组 (C组 ) ,应用99mTc AnnexinV的单光子发射计算机体层摄影术 (SPECT)显像测定肝化脾对99mTc AnnexinV的摄取率 ,采用原位末端标记法 (TUNEL法 )检测肝细胞凋亡指数 ,并用免疫组织化学法检测移植肝细胞磷酸化酪氨酸蛋白的表达。结果 C组的移植肝细胞凋亡指数和99mTc AnnexinV摄取率分别为 (3 .86±1.37) %和 5 5 1.2± 98.3,均显著低于A组和B组 (P <0 .0 1) ,其磷酸化酪氨酸蛋白表达强度在 + +以上者为 75 % ,高于A组和B组 (P <0 .0 5 ) ,其磷酸化酪氨酸蛋白的表达与凋亡指数呈负相关。

氯化钙和木瓜蛋白酶复合处理对羊肉嫩度影响的研究

以云岭黑山羊股二头肌为原料,以可溶性胶原蛋白的含量为指标,采用中心符合设计(CCD),对氯化钙(CaCl2)和木瓜蛋白酶(papain)复合处理的嫩化条件进行了优化。其最佳嫩化条件为:CaCl2浓度为0.31mol/L,papain浓度为0.00184%,成熟时间为64.93h。

利用酶解-发酵联用技术提高猪骨泥的功能性

通过对酶解-发酵组合处理猪骨泥的可溶性胶原蛋白、可吸收钙、小肽、功能性氨基酸以及抗氧化活性的分析发现：与蛋白酶酶解样品相比,经酶解-发酵处理的猪骨泥产物中可溶性胶原蛋白、小肽、可吸收性钙含量显著提高;必需氨基酸含量提高了2倍以上,鲜味氨基酸、抗氧化氨基酸分别提高了112%、142%,抗氧化活性提高了45.32%～164.23%。研究表明,酶解-发酵联用技术不仅可以提高猪骨泥原料利用率及风味,还可增强其营养保健功能。

响应面法优化超声波辅助超高压改善牛肉质构的研究

为改善牛肉的质构特性,将超声波辅助超高压处理技术应用到牛肉的嫩化处理中,对其硬度、弹性和咀嚼性进行研究。结果表明,超高压处理压力、超声波处理温度和超声波处理时间均对牛肉起到一定的嫩化作用,能够改善牛肉质构特征,不同程度地降低其硬度、弹性和咀嚼性。超声波辅助超高压处理压力后的牛肉结缔组织总胶原蛋白和可溶性胶原蛋白的含量随着处理压力的升高而增加。通过响应面法对回归模型进行预测,结果表明,对于牛肉的嫩度值各因素影响程度大小顺序为:超声波处理温度>超高压处理压力>超声波处理时间。通过优化验证,当超高压处理压力为302.52 MPa,超声波处理时间为41.37 min,超声波处理温度为23.31℃时牛肉的剪切力值最小。

3D打印HAP-GEL支架复合BMSCs和HUVECs细胞修复兔颅骨缺损

目的:探讨3D打印羟基磷灰石晶体-可溶性胶原(hydroxyapatite-geltin,HAP-GEL)支架复合骨髓间充质干细胞(bone regeneration bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)组织工程骨对兔颅骨缺损的修复效果。方法:将3D打印的HAP-GEL复合物支架与BMSCs和HUVECs共培养;制作颅骨缺损模型,随机分为3组,即单独HAP-GEL支架组,HAP-GEL支架复合细胞组和空白对照组。术后12周对标本进行大体观察和X线检测,分析骨修复情况。结果:大体标本观察,空白对照组仅有少量骨质形成;HAP-GEL组材料有部分降解,骨缺损边缘较清晰;HAP-GEL复合细胞组骨痂形成较多,骨缺损界限不清。X射线显示,空白对照组骨缺损为较明显的透射影;与HAP-GEL组相比,HAP-GEL复合细胞组缺损区域密度明显增高,接近正常骨组织。结论:负载有细胞的HAP-GEL复合体对兔颅骨缺损的修复效果优于单纯HAP-GEL支架材料,是一种相对理想的骨缺损修复替代材料。